含CpG的寡脱氧核苷酸联合化学药物对肝癌的治疗作用

《含CpG的寡脱氧核苷酸联合化学药物对肝癌的治疗作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、华中科技大学硕士学位论文含CpG的寡脱氧核苷酸联合化学药物对肝癌的治疗作用姓名：盛蓁申请学位级别：硕士专业：病理学指导教师：阮幼冰2003.4.1华中科技人学同济医学院硕士学位论文含CpG的寡脱氧核苷酸联合化学药物对肝癌的治疗作用中文摘要小鼠经由右大股皮下接种小鼠肝癌细胞(Hepatoma．22，H22)制造皮下移植肿瘤模型，后分别用合成的含CpG寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotidecontainingCpGmotifs，CpG组)、不含CpG寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotidenon．containingCpGmo

2、tifs，非GpC组)及白细胞介素一2(interleukin-2，IL一2组)并同时给以5一氟脲嘧啶(5一Fluorouracil，5一Fu)组成三个实验组即CpG+5．Fu、IL一2+5一Fu和5．Fu等三组，单纯生理盐水作为对照组对模型动物进行治疗并观察药物对肿瘤的治疗效果。f]立用免疫学方法、组织学方法、免疫组织化学方法和核酸原位分子杂交方法对上述模型的肿瘤组织、血清及脾脏中各种免疫学指标的变化特征进行了仔细的观察和综合分析，从而对含CpG寡脱氧核苷酸联合化学药物对实验性肝癌的治疗作用及机制进行了探讨。，f1、形态学观察～各组动物用药后主要脏器

3、变化各组间有所差异，5．Fu组和IL．2+5．Fu组有广泛的肾小管上皮变性和局部少量出血，个别肝脏有重度水变性，即有较严重的脏器损伤；其余组主要脏器形态学变化不显著。2、小鼠肿瘤生物学变化从各组动物肿瘤体积和肿瘤重量来看，两个指标的总差异有极显著意义，F检验P0．05。两次白细胞计数结果各

4、组间的数值变化总差异均有极显著意义，P<0．01。其中，CpG组、CpG+5一Fu组有显著升高(P<0．01)，5-Fu组、IL．2+5一Fu组则有华中科技人学同济医学院硕士学位论文明显降低(与CpG组比较P<0．01)，对照组、非CpG组、IL-2组变化不大(与CpG组、CpG+5一Fu组比较P

5、中IL一12、r—IFN的含量显著高于对照组、非CpG组、5．Fu组、IL一2组、IL．2+5．Fu组(P<0．01)，其中5一Fu组的IL一12、r．IFN含量下降非常明显。5、小鼠脾脏lL．12、卜IFN核酸原位分子杂交结果由于脾脏在处死动物的同时要做NK细胞杀伤活性测定，因此只有对照组、非CpG组、cpG组、IL一2组动物的脾脏做核酸原位分子杂交。对照组、非cpG组、IL一2组小鼠脾脏组织的IL一12、r。IFN均呈阴性表达。IL-12的原位杂交仅在CpG组脾脏细胞见有弱阳性表达0r_IFN的原位杂交CpG组脾脏细胞也没有阳性表达。因此未做半定量

6、分析。6、小鼠脾脏NK细胞杀伤活性检测结果小鼠脾脏NK细胞杀伤活性差异各组问有极显著意义P<0．叭。CpG组、CpG+5．Fu组脾脏NK细胞杀伤活性明显增高(与对照组、非CpG组比较P<0．01)，5一Fu组脾脏NK细胞杀伤活性明显受抑制(与CpG组比较P<0．01)，这些结果和血清中IL．12、卜IFN含量变化有一定的协同性。7、Alcianblue肥大细胞特殊染色Alcianblue肥大细胞特殊染色显示CpG组、CpG+5．Fu组肿瘤周边浸润肥大细胞数量多，>10／高倍镜，并且在肿瘤组织内亦见有肥大细胞浸润。5一Fu组、IL．2组IL一2+5一Fu

7、组肿瘤周边浸润肥大细胞<5个／高倍镜，对照组、非CpG组肿瘤周边仅见个别或完全无肥大细胞浸润。8、PCNA免疫组织化学结果PCNA免疫组织化学结果显示：对照组、非CpG组、IL一2组PCNA在肿瘤2华中科技人学周济医学院硕土．学位论文细胞核中的表达呈强阳性，CpG组、5．Fu组、IL．2+5一Fu组PCNA在肿瘤细胞核中的表达呈阳性，CpG+5一Fu组PCNA在核中的表达呈弱阳性。＼，上述实验结果表明：含CpG的寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotidecontainingCpGmotifs，CpGODN)在肿瘤周围使用后，刺激免疫细胞分泌

8、包括ILq2、TNF—a等在内的一系列细胞因子，它们活化NK细胞的细胞毒活性和刺激NK细胞分泌