珙桐组织培养技术体系研究

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1、摘要本研究为探索珙桐组织培养快速繁殖的有效途径，以珙桐芽为外植体，着重研究各阶段的最佳培养基配方及培养程序，以及培养中试管苗的异常表现及其原因，建立珙桐快繁技术体系。结果表明：1)利用珙桐芽作为初代培养的外植体材料，最佳的取材时间为10月。不带木质部接种可降低外植体的褐化率。2)珙桐组织培养条件：启动阶段为昼温26。C，夜温24。C，光照14h／d：继代和生根阶段为昼温24。C，夜温22℃，光照13h／d；光强1500～20001x，pH值为5．8～6．2。3)珙桐启动培养的最适培养基为1／2MS+BAl．5mg／l+IBAlmg／l，30d后，芽的诱导启动率可达95％以上。4)愈伤组织诱导

2、丛生芽继代增殖的最适培养基为N6+BA2．5mg／l+IBAlmg／1+GA31mg／1，其平均增殖系数可达8．00以上。5)侧芽继代增殖方式的最适培养基为N6+BAlmg／l+GA32rag／1，其平均增殖系数可达3．90。6)可以试管苗的顶芽和带芽茎段作为外植体，在初代培养基中进行二次启动，启动率高达90％以上，通过增加外植体种类，达到增殖快繁的效果。7)生根阶段的最适培养基为1／8MS+BA0．1mg／1+NAAlmg／1+活性炭0．59／1，生根率可达95％以上，生根根数多，生长迅速。8)炼苗阶段以河沙作为培养基质，并以基本培养基1／10MS为营养液进行叶面施肥，移栽成活率可达62％

3、以上。关键词：珙桐组织培养快速繁殖本研究为四川省教育厅重点资助项目“国家一级保护树种珙桐苗木繁育机理研究’’的部分内容。1．前言珙桐(DavidiainvolucrataBaill)，为珙桐科(或蓝果树科)，珙桐属落叶乔木，是我国特有的珍稀、濒危树种，属国家一级保护植物。珙桐起源古老，是第三纪古热带植物的孓遗种‘1,2】。因为它的棕红色头状花序下具有两枚大型白色苞片，形似白鸽，开花时犹如满树群鸽栖息，故有“中国鸽子树”之称口巧】，是世界上著名的观赏树种。几百万年前，地球上曾一度广泛生长过琪桐，随着第四纪冰川的到来，全球性的急剧降温，地球上很多地方的珙桐都被冰川吞没而灭绝，只有我国西南地区由于

4、地形十分复杂，使得珙桐部分地保存下来，故珙桐也有“活化石”之称【6】。1869年法国人ArmandDavid在四川宝兴县穆坪首次发现了这种世界上绝无仅有的奇花，并由BaillionH．E．定名为Davidiainvolucrata发表，引起世界植物学家们的关注【31。20世纪初，欧美国家多次从我国采集、引种包括珙桐在内的观赏植物，并广泛栽植，大大丰富了世界园林种质库，从那时起我国便享有了“世界园林之母”的美誉。现在瑞士日内瓦街头和美国白宫门前的“鸽子树”均已开花结实，成为当地著名的景观。由于珙桐深居大山，长期以来未得到有关部门的相应重视。建国后，我国领导人到国外访问，看到珙桐盛花时的美景，追

5、问其祖籍，才知为我国特有，遂责成林业部门考察和繁育，才使这一隐居深山的“稀世珍宝”有了名声‘7，81。近几十年来，为了科学地制定出对珙桐的保育策略，我国科学工作者对琪桐的分类[9-11】，自然分布[6,12-151，生物学和生态学特性[8,16-18】，群落结构‘19。27】，濒危状况【2引，引种繁殖[12,15,29-37】，保育遗传【381，解剖‘401，木材结构【39—4们，化学成分【41m】，资源保护和开发模式‘431进行了研究。随着人们对珙桐在科研及园林绿化等领域价值的不断认知，市场对珙桐苗木的需求也不断增加，而珙桐至今未成为广泛应用的园林绿化树种，关键在于其繁殖和引种的困难。本研

6、究旨在探索通过组织培养技术，加快珙桐的繁殖进度，以期更好地保护和利用珙桐资源。2．文献综述2．1珙桐的形态特征及生物学特性琪桐为落叶大乔木，一般高达lO一25m，最高可达30m以上，胸高直径可达1～1．5m，树皮灰黄色，粗糙呈不规则片状脱落。树形端正，树枝上伸，树冠馒头形或圆锥形。冬芽大，圆锥形，紫褐色，磷芽3～4对，覆瓦状排列。单叶互生，心脏形或阔卵形，长9～16cm，顶端短尖尾状，基部心脏形，叶缘有三角形粗大的锯齿，具有毛刺状尖突，叶面鲜绿色，背面密生丝状白绒毛，叶柄长4～8cm，常生灰色绒毛。花异性同株，由多数雄花和一朵两性花组成球状花序，偶有一个花序全是雄花，基部有对生叶状纸质大苞片

7、。花蕊含苞待放时有1～1．5cm大，从含苞待放到花蕊的包膜破裂要经过10—15d。花开初期两苞片直立向上，颜色为鸭蛋青色，花蕊部分呈红棕色，经15～20d，两苞片长大，颜色变为雪青色。两个苞片的发育速度在这一时期有明显的差别，一个苞片发育生长较快，而另一个发育速度较慢，随着苞片继续生长和种子受精后逐渐膨大，花梗承受不了苞片和种子的重量，被压弯，苞片和种子相继下垂，苞片颜色变为洁白色。苞片下垂后继续生长10～1