生物实验一:《检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质》

生物实验一:《检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质》

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1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一.实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:①.还原性糖的鉴定:还原性糖+斐林试剂砖红色沉淀②.脂肪的鉴定:脂肪+苏丹Ⅲ橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ红色③.蛋白质的鉴定:蛋白质+双缩脲试剂紫色④.淀粉的鉴定:淀粉+碘液蓝色二.目的要求:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质1、还原糖的检测和观察:选材(1)含糖量高;(2)颜色为白色或接近白色的植物组织以苹果.梨为最好。问题:西瓜可以吗?制备组织样液:研磨成浆:取苹果洗净、去皮、切块,取5g放入研钵,加石英砂、5ml水研磨、过滤三.实验

2、过程:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明植物组织样液中含有还原糖。注入2mL苹果组织样液注入1mL刚配制好的斐林试剂水浴加热约2min呈色反应变成砖红色50----650C的温水结论:甲乙液等量混匀振荡、混合摇匀呈现蓝色①还原糖有。②试剂:.(甲液:0.1g/ml的,乙液:0.05g/ml的.)甲乙液必须后再加入样液中,。③必须。葡萄糖,果糖,麦芽糖用水浴加热斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀现配现用注意事项:④颜色变化:浅蓝色棕色砖红色2、脂肪的检测和观察:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。取材:花生种子(浸泡3~4h),将

3、子叶削成薄片制片①取最理想的薄片②在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液(3min)③去浮色(用50﹪酒精)④制成临时装片观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察结论:注意事项:①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。②酒精的作用是:。③需使用显微镜观察④使用不同的染色剂染色时间不同颜色变化:。洗去浮色橘黄色或红色3、蛋白质的检测和观察:选材应该选择含丰富的豆浆或鸡蛋清溶液。(避免材料自身的颜色对实验变化颜色的掩盖)蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液呈色反应组织样液2mL双缩脲试剂A液1mL双缩脲试剂B液4滴摇匀后变成紫色

4、结论:说明组织样液中存在蛋白质。(3)注意事项:①试剂:(A液:0.1g/ml的;B液:0.01g/ml的)先加,再加。B液要求量适中,否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。②鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比双缩脲试剂A液1mlB液4滴NaOHCuSO4蛋白质的检测结果③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免实验后粘住试管壁,不易洗刷斐林试剂与双缩脲试剂的比较:A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物质生成砖红色沉淀先加A液,再加B液,

5、不需加热甲液与乙液先混再用,且现配现用,需加热蛋白质还原性糖试剂组成检验结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂4、淀粉的检测和观察:取材:马铃薯匀浆检测组织样液2mL碘液2滴结论:说明组织样液中存在淀粉。注意:常用材料:马铃薯试剂:。颜色变化:。碘液变蓝摇匀后变成蓝色1.在下列四支试管中分别加入一些物质,甲试管:豆浆;乙试管:氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是()A.甲、丁B.甲、乙、丁C.甲、乙、丙D.甲、丙对应训练D2.下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是 A.用于

6、鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定 B.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴C.鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液 D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现配现用()B3.甘薯和马铃薯都富含淀粉,但甘薯吃起来比马铃薯甜,为探究其原因,某兴趣小组以甘薯和马铃薯块茎为材料,在不同温度、其他条件相同的情况下处理30min后,测定还原糖含量,结果表明马铃薯不含还原糖,甘薯的还原糖含量见下表:处理温度(℃)010203040甘薯还原糖含量(mg/g)22.12

7、3.325.837.640.5处理温度(℃)5060708090甘薯还原糖含量(mg/g)47.454.768.945.328.6(1)由表可见,温度为70℃时甘薯还原糖含量 最高,这是因为_________________________ ________________________。(2)马铃薯不含还原糖的原因是__________。 (3)为了确认马铃薯不含还原糖的原因,请完 成以下实验: 实验原理:①__________________________;  ②_____________________________________。备选材料

8、与用具:甘薯提取液(去淀粉和还原糖,马铃薯提取液(去淀粉),二苯胺试剂,斐林试剂

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