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《EGCG对人乳腺癌MDA-MB-435细胞株细胞增殖的抑制及机制.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、《中国癌症杂志》2004年第14卷第1期CHINAONCOLOGY2004Vol.14No.19EGCG对人乳腺癌MDA-MB-435细胞株细胞增殖的抑制及机制＊李鹤成,陆劲松,侯意枫,邵志敏,沈镇宙(复旦大学附属肿瘤医院乳腺外科,上海200032)[摘要]目的:研究绿茶提取物表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin-3gallste,EGCG)对人乳腺癌细胞株细胞周期的影响及机制。方法:利用细胞增殖测定试剂盒(CellProliferationAssaykit)来制作细胞生长曲线;流式细胞仪分析EGCG作用于人乳腺癌MDA-MB-435细胞株
2、前后细胞周期的变化;RT-PCR及Western印迹法研waf1/cip1究肿瘤细胞株加药干预前后细胞周期抑制因子p21的mRNA及蛋白表达的变化。结果:EGCG可明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-435细胞的增殖活性,40μg/mlEGCG干预后,MDA-MB435细胞主要阻滞于G0/G1期,在24小时阻滞最为明显。在48及72小时也有阻滞。对照组G0/G1期的比例49.92%,40μg/mlEGCG干预24、48及72小时后G0/G1期的比例分别为71.56%、67.20%和61.59%。EGCG40μg/ml处理肿瘤细胞株细胞后24小时可检测p21mRNA和蛋白表
3、达提高。结论:绿茶有效成分可抑制乳腺癌细胞的增殖,这可能与其诱导p21表达从而抑制细胞周期的时相转换有关,这表明绿茶可能在乳腺癌的治疗上具有一定的前景。[关键词]表没食子儿茶素-3-没食子酸;细胞周期;乳腺癌;p21;培养的肿瘤细胞+中图分类号:R73-361文献标识码:A文章编号:1007-3639(2004)01-0009-03Inhibitioneffectsofepigallocatechin-3-gallste(EGCG)oncellcycleofhumanbreastcancercellsMDA-MB-435anditsmechanismLIHe-chen
4、g,LUJing-song,HOUYi-feng,etal(DepartmentofBreastSurgery,CancerHospital,FudanUniversity,Shanghai200032,China)[Abstract]Purpose:TostudytheeffectofEGCG(extractsfromgreentea)oncellcycleinhumanbreastcancercelllineanditsmechanism.Methods:Cellproliferationassaykitwasusedtoproducethedose-respon
5、securve.FlowcytometricassaywasusedtoevaluatethecellcyclechangesonMDA-MB435cellswithandwithoutEGCG.TheexpressionofproteinwasdetectedbyWesternblot.Results:EGCGcouldinhibittheproliferationofthebreastcancercellsMDA-MB-435,40waf1/cip1μg/mlEGCGinducedG0/G1phasearrestandtheentrancetoSphase.Bot
6、hmRNAandproteinlevelofp21wereupregulatedinMDA-MB435cellswhentreatedby40μg/mlEGCG.Conclusions:Greenteacaninhibitthegrowthofhumanbreastcancercells,perhapsbymeansofp21andthereforeinhibitingtheprogressionofthecellcycle.[Keywords]EGCG;cellcycle;breastcancer;p21;cuturedtumorcellsWAF1/Cip1绿茶是人
7、类最常饮用的健康饮料之一,为探讨(EGCG)购自Sigma公司。P21多克隆抗体绿茶对乳腺癌细胞的作用及其可能机制,我们研究购于美国SantaCruz公司。了绿茶主要成分表没食子儿茶素-3-没食子酸酯二细胞培养人乳腺癌细胞株MDA-MB435(EGCG)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435细胞的购自ATCC公司,采用DMEM培养基(含5%小牛增殖的影响及其与细胞周期时相及细胞周期蛋白依血清,100U/ml青霉素,100μg/ml链霉素),在waf1/cip1赖型激酶抑制剂p21表达的关系。37℃5%CO2培养箱内进行培养。三增殖曲线绘制利用细胞增殖测
