梨果实品质相关基因pl、fw2.2在micro-tom番茄中的遗传转化研究

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1、分类号：％６１．２学校代码：１的％密级：公开学号１巧如２０３５３：杂覆《寺乂爹硕±学位论文－梨果实品质相关基因化、／ｗ２．２在ＭｉｃｒｏＴｏｍ番茄中的遗传转化研究ＳｔｕｄｙｏｎＧｅｎｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＰｅａｒＦｒｕｉｔＱｕａｌｉｔｙＲｅｌａｔ：ｅｄＰＬａｎｄｗ－／２．２ｅｎｅｓｉｎＭｉｃｒｏＴｏｍＴｏｍａ化ｇ研究生姓名孙瑶．导师姓杂及职称李疆教授合作导师姓養及跟称学位口类级别理学硕去专业名称生态学

2、研究方向果树生埋生态所在学院林学与园艺学院新疆？乌鲁木齐二〇—五年六月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加臥标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。Ｖ喉：＾研究生签名；知时间：月）曰关于学位论文使用授权的说明本人

3、完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定，目Ｐ：新疆农业大学有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文档，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，允许论入文有被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编关数据库进行检索，可公布（包此括刊登）论文的全部或部分内容。（保密的学位论文在解密后应遵守协议）研究生签名：任矿－命时间：挪争年＾月日＾导师签名：Ｉ时间：如分年＾月日４本文是国家高技术研究发展计划（863计划）课题-梨分子育种

4、与品种创新项目的部分研究成果（项目编号：2011AA10020604）课题主持人：李疆教授（新疆农业大学）梨果实品质相关基因PL、fw2.2在Micro-Tom番茄中的遗传转化研究摘要梨果实硬度和大小是影响其果实品质的重要因素。增加果实食用部分、延长货架期，是梨生产栽培育种亟需解决的问题。本研究拟利用根癌农杆菌介导法将与梨果实硬度、大小相关的PL、fw2.2基因转入番茄中，对阳性植株进行筛选与鉴定，以获得整合梨PL、fw2.2基因的转基因番茄，建立了完整的遗传转化体系。旨在为梨果实品质基因功能的进一步研究奠定

5、基础。主要研究结果如下：1.通过比较外植体不同灭菌消毒方式，子叶背部是否划伤对不定芽诱导率的影响及不同梯度对诱导生根的影响，从而优化了再生体系建立的外植体的消毒处理方式和诱导生根激素配比率，结果表明：用10%NaClO+Tween-801滴消毒的种子发芽率高达97.3%；子叶背部划伤可提高不定芽诱导率为98.67%；诱导粗细根系分布均匀、平衡生长的植株移栽成活率可达96.7%。2.以番茄高效的再生体系为基础，本试验通过比较研究外植体对Kan抗性的筛选、对Cef敏感性测定和同时添加Kan和Cef对子叶再生率的影

6、响，得到子叶再生率的大小与Kan的浓度呈显著正相关。在40mg/LKan与30mg/LCef共同作用下，筛选出55株抗性苗植株，通过PCR检测，初步验证37株为转PL基因苗，转化率为12.7%，阳性率为67.3%。3.通过接种300个背部划伤的子叶，暗处理预培养36h，利用农杆菌介导转梨果实大小相关基因fw2.2，在OD600=0.4，充分接触菌液6min，共培养60h的条件下浸染，分别在浸染菌液和分化培养中添加150μmol/L和180μmol/L的AS，在筛选诱导抗Kan不定芽的过程中，运用Kan延迟筛选

7、的方式，将25mg/L和40mg/L的Kan依次添加到分化培养基和生根培养基中，获得63株筛选苗，通过PCR检测，初步验证获得转梨果实大小相关基因fw2.2的转基因苗42株，转化率为14.9%，阳性率为68.2%。关键词：梨；Micro-Tom番茄；遗传转化；果实品质IStudyonGenicTransformationofPearFruitQualityRelatedPLandfw2.2genesinMicro-TomTomatoAbstractThefirmnessandsizeofpearfruitar

8、eimportantfactorsaffectingthefruitquality.Increasingthefruitedibilityandprolongingtheshelflifehavebecametheurgentproblemstobesolvedfortheproductionandcultivationofpear.Inthisresearch,thestableMicro-Tom