食用真菌黄白侧耳次级代谢产物研究

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1、中国科学院大学UniversityofChineseAcademyofSciences硕士学位论文作者姓名：王坐娼指导教师：割宏焦巫宜虽生国科堂医邀生堑巫宜压真菌堂国塞重壶塞坠室学位类别：堡堂亟±学科专业：邀生物堂研究所：生国型堂院邀生物班究匮2013年05月musIIroom州eurotuscornucoplaeByShao-juanWangADissertationSubmittedtoTheUniversityofChineseAcademyofSciencesInpartialfulfillmentoft

2、herequirementForthedegreeofMasterofMicrobiologyStateKeyLabofMycology，InstituteOfMicrobiology，ChineseAcademyofSciencesMay,2013学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文不包含任何其他个人或集体己经发表或未发表的成果、数据或撰写过的科研成果，也不包含为获得任何教育机构的学位或证书已使用过的材料。对本论

3、文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。申请学位的论文与资料若有不实之处，本人愿承担一切责任。学位论文作者签名：王夕氓矽1弓年箩月加Et学位论文使用授权声明本人完全了解中国科学院大学及微生物研究所关于提交、保存和使用学位论文的规定。同意研究所保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸制版和电子版，允许论文被查阅和借阅；论文保存单位及借阅人有义务保护论文作者及单位的知识产权。本论文的成果归中国科学院微生物研究所所有；本人离所后发表、使用本学位论文或与本论文直接相关的学术成果时，第一署名单位

4、仍然为中国科学院微生物研究所。(保密论文在解密后遵守此规定)作者签名：导师签名：El#C]：洳吩年箩月Ⅶ日日期：汩侈年岁月20Et摘要人们食用蘑菇已有数世纪历史。最近，食用菌子实体／菌丝体来源的功能食／药品及生物活性化合物引起世界范围关注。截止到2005年，80％左右的食药用真菌产品来源于子实体，20％左右来源于菌丝体。因此，研究食用真菌发酵菌丝体次级代谢产物对深入开发食用真菌资源具有重要的意义。食用真菌能够产生结构多样、复杂多变的次级代谢产物，这些天然产物为药物研发提供了大量先导化合物；为开发食用真菌高附加值产

5、品提供化学基础。本论文对一株食用真菌黄自侧耳大米固态发酵次级代谢产物进行了研究。运用“OSMAC”法进行单菌株多培养基发酵。研究表明黄白侧耳大米固态发酵提取物含有丰富的次级代谢产物。运用多种柱色谱分离技术，如正相硅胶、反相ODS、凝胶LH一20及RP．HPLC对乙酸乙酯粗提物进行分离纯化。通过HR．ESI．MS、NMR、IR及CD等鉴定技术得出化合物结构。共得到23个化合物，其中18个新颖结构化合物(1-18)，包括1个新颖骨架大环二萜类化合物EryngiolideA(1)，5个新颖骨架5，5螺环倍半萜类化合物P

6、leurospiroketalA．E(2．6)。这些化合物均为首次从该菌株中分离得到，填补了该菌株次级代谢产物研究空白。对化合物生源合成进行推测，发现自然界中可能存在新的二萜合成途径，为生物学研究提供分子指导。此外，对化合物进行了体外抗肿瘤活性评价(MTT法)及抗炎活性评价(LPS诱导RAW264．7细胞释放NO抑制活性)。化合物1l、22及23对HeLa肿瘤细胞有较弱的抑制活性，IC50值分别为70．6、66．2及65．和M。化合物2、3、4及22抗炎活性优于阳性对照药(氢化可的松，53．7跏M)，IC50值为

7、6．8、12．6、20．8及17．21#M；化合物1、11、及23抗炎活性近似于阳性对照药，IC50值分别为57．02、65．63及67．86／．tM，这些活性结果对黄白侧耳的开发利用提供了理论依据。关键词：食用真菌；黄白侧耳；次级代谢产物：萜类：生源合成途径；生物活性AbstractMushroomfruitingbodieshavebeenusedasfoodforcenturies．InrecentyearS，mushrooms，includingfruitingbodiesandmycelia，haveb

8、ecomemoreattractiveasfunctionalfoodsandasasourceofbioactivecompounds．Atpresent，about80％ofallmushroomproductsarederivedfromthefruitingbodies．Only20％ofallmushroomproductsarederivedfrommycel