酚类内分泌干扰物的雌激素受体结合能力及其对相关生物酶活性的影响研究

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1、酚类内分泌干扰物的雌激素受体结合能力及其对相关生物酶活性的影响研究摘要内分泌干扰物(EDCs)广泛存在于人类生活和工作环境中，并可通过食物链或其他途径进入动物和人体，干扰机体正常的内分泌功能，包括对生殖系统，神经系统和免疫系统的危害等。拟雌激素类内分泌干扰物可以通过与雌激素受体结合或影响细胞信号转导途径等方式模仿或部分模仿雌激素，发挥类似于雌激素的效应，称为环境雌激素。壬基酚(NP)、辛基酚(OP)、二氯酚(2，4一DCP)和双酚A(BPA)是酚类化合物中具有代表性的拟雌激素类内分泌干扰物。1998年美国

2、环保署建立了一个分级筛选和测试EDCs的测设框架体系，其中雌激素受体结合测试法是此筛选体系的组成部分，且因其方便快捷而成为目前应用最广泛的离体筛选方法。由于传统的雌激素受体结合测试法使用放射性标记化合物，容易造成放射性污染，因此本研究尝试将酶联免疫技术应用到雌激素受体结合试验中，以避免放射性污染，同时应用此方法测定四种酚类物质的雌激素受体结合能力，并分析其潜在雌激素效应。本研究在传统的雌激素受体结合试验方法基础上，引入竞争酶联免疫技术，避免放射性污染的同时提高了灵敏度，可以作为今后EDCs筛选体系的备选方

3、法，但由于此方法还未进行推广，缺乏实验室间比对数据，因此还需进行大量室内研究以及与其他内分泌干扰物筛选方法的比对研究。根据此结合试验方法测定了四种酚类内分泌干扰物及己烯雌酚(DES)的雌激素活性，结果表明：四种酚类物质均具有雌激素活性，且其相对于DES自',j雌激素结合能力顺序为，BPA>t-OP>NP>2,4一DCP，2,4．DCP的雌激素活性最弱。BPA相对于DES的相对雌激素受体结合能力(RBA)为2．1X10～，与t．oPfJ',j1．2×10。在同一个数量级水平上；NP的RBA为7．3×10～，

4、与2，4．DCP雕J5．3x10‘4在同一数量级水平上。当四种酚类物质分别以等毒性单位比和等环境浓度比混合时，其联合作用表现为部分j：HDrl或拮抗作用。由于酚类内分泌干扰物的广泛应用及已报道的越来越严重的水体污染，对四种酚类物质污染的预警作用越来越重要。因此本研究试图以蛤蜊为受体生物，通过四种酚类物质对生物体内抗氧化酶包括超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)以及解毒酶谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性的影响研究，分析三种酶活性对酚类污染的响应，试图通过多种酶活变化指示水体污染状况。研究结果表明：对

5、于壬基酚，二氯酚和双酚A，CAT和SOD的变化趋势一致，且二者呈现较好的相关性。对于壬基酚和二氯酚，CAT和SOD活力随浓度升高表现为持续下降趋势，而GST表现为先升高后下降的趋势；对于BPA，CAT和SOD活力随浓度上升表现为先上升后下降的趋势，而GST则表现为持续下降的趋势。由此可见，对于这三种酚类内分泌干扰物，三种酶活变化呈现较好的规律性，因此可以联合三种酶活变化分析判断水体中壬基酚、二氯酚和双酚A的污染，以期对水体中酚类物质污染进行预警。但是对于辛基酚，这三种酶活变化未呈现较为明显的规律性，因此无

6、法通过三种酶活变化指示水体中辛基酚污染，这可能是由于抗氧化酶系和解毒酶变化受多种因素影响，实验室间数据对比以及野外实验还有待进一步研究。关键词：酚类内分泌干扰物；雌激素受体结合试验；SOD酶；CAT酶；GST酶ThecapabiIitiesofbindingtotheestrogenreceptorandtheinfIuencetotheenzymeactiVityofphenoISbeIongingtotheEDCsAbstractEndocrineDisruptingChemicals(EDCs)wh

7、icharewidespreadinenvironmentrelatedtoourlifeandwork，onceenteringthebodiesofanimalsandhumanthoughfoodchain，canalterthenormalfunction(s)oftheendocrinesystem，includingthedamagetoreproductive，nervousandimmunesystem．OftheEDCsthereisonekindofchemicalthatcansti

8、mulateorpartlystimulateestrogensthoughbindingtoestrogenreceptororaffectingthetransformationprocessofcellsignalsthatcouldactasestrogens，SOthatitiscalledEnvironmentalEstrogens．Nonylphenol(NP)，0ctylphenol(0P)，2，4一Dichl