VEGFC与宫颈癌侵袭转移分子机制及逆转策略研究

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1、学位论文原剑性声明本人郑霪声躜：掰曼交豹论文是我个人在导师拯导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成采，与我一同]=作的同志对本研究所傲的任何贡献均已在论文孛{搴了鹗确的说明势表示了谢意。学撼论文{筝老签名：i亟!匕臼期渺6年钿多嗣学位论文版权使用授权书本人完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，帮：学校有投将掌位论文的全部或部分内容编入有关数据瘁进行检索，并采用影印、缩印或扫撼等复制手段保存、汇编以供褒阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机

2、构送交论文，并编入有关数据库。1，作者签名：覃盟导师签名：地网期：≯形年钿6网天津医科大学博十学位研究生论文摘要VEGF-C与宫颈癌侵袭转移分子机制及逆转策略研究中文摘要宫颈癌是女性第二位常见恶性肭瘸，早联就可经游巴结转移，嚣遮年来，宫颈癌发病呈现年轻化趋势，研究表明，ⅦGF—c在寓颈癌淋巴结转移中发挥了重要瓣撵霜。本疆究羧采弱兔疫缝像秘基嚣转染及豢嚣浚默技东，搽讨该嚣子在宫颈癌侵袭转移中的分子机制，为将来临床基础研究和治疗奠定实验基础。第一部分VEGF-c、MMP9及联MP．1在予富颈癌组织中蛇表达及临床意义目的探讨血篱内皮生长因子(VEGn

3、C)基质金属蛋白酶MMP9及其抑制物瓢MP-l在富致痰组织孛戆表达，及其与塞颈癌}巍庆痍毽特薤羲关系。方法采趱免疫组化链霉菌抗生物索蛋白一过氧化物酶连接染色法(SP法)，检测62例宫颈癌l羯、ll裁爨者癌缎织孛v嚣G孓C、MMP9及其捧髑物霹凇．i的表这，并邋行统计学分析。结果vEGF—c、MMP9及其抑制物TIMP．1农宫颈鳞癌I期、Il麓均隽商表达。vEGBc在寓颈癌I期、Ii期移有淋墨转稳者的表遮率分潮为73。8％、85％、lOO％。MMP9为66．7％、75％、93．3％。TIMl艮l为64．3％、60％、66．7％，v】粥弘C、MMP

4、9及11MP．1在浸润问质≥l，2的表达高于<1／2(P

5、莲簿选获缮转柒残功的缨蕤株，经半定量骱PcR检测转染看vEGF．c表遮水平，EusA检测培养上清中l天津驻科大学博“{‘学位研究生娩文摘葵VEGF-C的表达。对转染成功的细胞检测NF．1cB、bd．2、MMP2、MMP9、TIMP．1基因的表达水平及时颓铂敏感径的变优。TraIlswen小室检灏转染细胞侵袭和转移力；獭附实验检测肿瘸细胞黏鲋力的变化。绪果1通过测序鉴迩，成功构建了真核表达霆缀藏体pc黼A3，l(+)ⅣE{GBe；2转染缀vEGF_c鞠显离于空载傣缱秘泰转聚缝，E瓢sA缝测转染缀(678．73圭38．92藏馨穗1)癌溺鬟褒于空载体

6、缀(129。52±鞠．73鹅酝1)，秘未转染缝(123国5±55．83秸g蕊1)，戒麓稳建了麓表达ⅦaF-C的富颈癌纲胞株Hel曲娼l；3在l{eb您l缀NF。嬗魄表达(2。06±O。09vsl。35±O．02vsl．38圭O．02尸

7、锣±O．05芦≤O．05)明照高于空载体组和未转染缎；TIMP．1(O．54±0．03vs1．01±O．06vs1．03士O．06必O．OS)豹表这低予空载体和米转染缀，禚HeLa／sl细稔中M艘彰m艘-1眈僮4+?；5在骞琰癌壬差#王丑荩l缀艇椿中可检测劐其霹颓锫霄弱翡耐势镁(1。84倍)；6在钵外实验侵袭转移积黼辩实验串，狳轴感l缵溅较空载体缝霸未转染缀具蠢较大的侵袭转移力及獭附§2力。结谂鼹矮体奔导V戴GFIe·基溪转染人骞颈癣珏eh霹遂藩壤热班潞羚c表达，麓表达熬_v王撼F。c霹激涎奎璎船，使抗凋亡基因bd．2商表达；同时弓l起MMp2

8、、9高表达，弧MP—l低表达；从而使转染细胞具有较大的侵袭和转移力。第三郝分si鼢姨沉默VEGF．c藏因对富颈癌Hok细胞的生物学特性影响目的通过RN