常用病毒载体的基础研究及临床应用

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1、408中国生化药物杂志ChineseJournalofBiochemicalPharmaceutics2011年第32卷第5期常用病毒载体的基础研究及临床应用潘志敏，马勇，程细高(南昌大学第一附属医院，江西南昌330006)摘要:分子生物学的发展已引领现代医学进入分子医学时代，其中病毒载体的研制成功从根本上推动了基因治疗的发展。本文浅析了逆转录病毒载体、腺病毒载体、慢病毒载体、腺相关病毒载体近年的基础研究、临床应用及前景。随着载体学研究的深入，病毒载体的应用范畴将不断拓展。关键词:病毒载体;基因治疗;结构;功能中图分类号:R944．9文献标识码:A文章编号:1005-1678(20

2、11)05-0408-04ViralvectorsusedforbasicresearchandclinicalapplicationPANZhi-min，MAYong，CHENGXi-gao(TheNo．1AffiliatedHospitalofNanchangUniversity，Nanchang330006，China)基因治疗是指能将外源基因导入靶细胞并有效表达从合，从而引导病毒趋向特异性靶细胞。为提高Rv载体的转而实现治疗疾病的一种疗法。如何选择高效、低毒、靶向性染率，也有人提出多次重复感染，用水泡性口炎病毒包膜G强的载体，以协助目的基因进入靶细胞并正确表达，是基因蛋白替

3、代原病毒蛋白包装Rv。［1-2］治疗过程中必须解决的问题，也是基因治疗研究领域的1．3Rv载体的应用核心技术之一。基因载体主要分为病毒载体和非病毒载体以Rv为载体的基因转移技术在基因治疗、外源基因表［3］两类。病毒载体具备传送其携带的基因组进入其他细胞达和RNA干扰等方面均有广泛应用。世界上第一例基因治［4］并进行感染的分子机制，包括逆转录病毒(Retrovirus，疗病例就是应用Rv携正常的腺苷脱氨酶(ADA)基因成功Rv)、腺病毒(Adenovirus)、慢病毒(Lentivirus，Lv)、腺相关病治愈了ADA缺乏症患者。随后英国奥蒙德大街医院也运用毒(Adenoassoci

4、atedvirus，AAV)及杆状病毒(Baculovirus)等。Rv作为治疗载体根治了一名患X染色体连锁重症免疫缺陷1Rv载体病儿童。1．1Rv及其载体的结构王韫芳等［6］利用复制缺陷型Rv和pMSCVneo成功构建Rv在逆转录酶的作用下能将RNA转变成cDNA的单了pMSCV-HGF。为进一步应用HGF基因进行干细胞工程、链RNA。其产物cDNA可进入细胞核并整合在染色体中随组织工程的研究奠定了基础。还有顾红祥等［7］将凋亡素基宿主细胞的增殖而转录翻译。Rv的RNA基因组核心部分因(VP3)与Rv连接，构建出重组Rv凋亡素载体，用其感染含三个开放读码区:gag-编码病毒核心蛋

5、白，PoL-编码逆转录人肝癌细胞系HepG。发现它可在四环素调控下表达VP3［5］酶，env-编码病毒被膜蛋白。利用这些结构可将Rv设计并诱导HepG2凋亡。此理论为肿瘤的可控性基因治疗提供成一种复制缺陷性病毒，使其能携带某些目的基因。［8］［9-10］了依据。此外Rv载体在治疗艾滋病、神经系统疾病1．2Rv载体的优缺点及改良等方面同样具备巨大的应用潜力。Rv载体的优点有:(1)宿主范围广，对细胞感染率可高2腺病毒载体达100%;(2)能持久表达目的基因;(3)有强启动子，能高效2．1腺病毒的结构稳定表达外源基因;(4)感染细胞不产生病变。Rv载体也有腺病毒是无包膜的线状双链DNA

6、病毒，由壳粒呈二十不足:(1)只能整合至分裂期细胞;(2)插入诱变，引起机体面体排列构成。衣壳内的五联体及纤毛顶端形成的头节区免疫反应;(3)双嗜性Rv载体也不能解决感染特异性靶细能与细胞表面的病毒受体结合。腺病毒基因组中的蛋白VI胞问题。针对这些问题，研究者们不断寻找解决方案:Roux与病毒衣壳连接在一起，在两条链的5'端各结合DNA蛋白等曾提出用双特异性分子桥来解决感染特异性靶细胞问题。复合物结构，其与腺病毒复制密切相关。基因组编码区分为此分子桥既可与病毒颗粒结合，也可与特异细胞表面受体结早期基因区和晚期基因区，前者主要编码病毒的调节蛋白，后者编码病毒的结构蛋白。第三代腺病毒载

7、体去除了所有收稿日期:2011-06-02编码基因，只保留了5'和3'末端反向末端重复序列及包装信基金项目:国家自然科学基金(81060147)作者简介:潘志敏，男，硕士，研究方向:骨外科创伤，E-mail:jas-号。因此载体容量大，可携带36kbDNA。onpum@sina．com。2．2腺病毒载体的改良中国生化药物杂志ChineseJournalofBiochemicalPharmaceutics2011年第32卷第5期409腺病毒载体不整合入宿主细胞染色体，插