《细菌生理生化反应》PPT课件

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1、细菌生理生化反应2010.10~2010.127/19/2021目的要求学习并掌握细菌分类鉴定中常用的生理生化反应。2实验原理细菌的代谢与呼吸，主要取决于酶的催化作用，各种细菌具有不同的酶系统。不同的细菌分解大分子碳水化合物、蛋白质和脂肪的能力不同，所能发酵的类型和终产物也不一样。细菌代谢类型的多样性，具体表现在生化反应多样性，因此在细菌分类鉴定中，常利用其生理生化反应作为重要依据。3糖发酵试验在肠道细菌的鉴定上尤为重要细菌可发酵的基质糖（葡萄糖、蔗糖、乳糖）醇（甘露醇）糖苷（甘油）发酵后产生的有机酸乳酸、醋酸、丙酸等发酵后产生的气体甲烷、氢、二氧化碳等4葡萄糖发酵试验乳糖发酵

2、试验指示剂：溴甲酚紫（变色范围pH5.2-6.8,pH<5.2黄色，pH>6.8紫色）安装倒立的徳汉氏氏小管（内充满液体）pH<5.2,溶液由清亮紫色变为浑浊黄色乳酸、醋酸、丙酸葡萄糖/乳糖甲烷、氢、二氧化碳徳汉氏小管内有气泡，产气漂浮5乙酰甲基甲醇试验（V.P.试验）甲基红试验（M.R.试验）细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖，所产生的丙酮酸，可被进一步代谢。细菌体内丙酮酸代谢途径的不同，可通过V.P.和M.R.这一对实验进行鉴别。6V.P.反应阳性途径：7吲哚产生试验判断细菌是否（含色氨酸酶）能利用色氨酸。8实验材料1.大肠杆菌（Escherichiacoli）2.产气肠杆菌（

3、Enterobacteraerogenes)3.普通变形杆菌(Proteusvulgaris)9实验方法与步骤（一）液体培养基的制备与灭菌1）蛋白胨培养基：蛋白胨4.0gNaCl2.0gH2O400mL调pH7.6，分出2管，然后加0.5ml1.6%溴甲酚紫乙醇溶液,溶液呈浅紫色；分装到装有倒立的德汉氏小管的试管中（6管）102）10%葡萄糖溶液，10%乳糖溶液各20ml112度，30分钟灭菌3支德汉氏管中加葡萄糖溶液各1ml3支德汉氏管中加乳糖溶液各1ml113）葡萄糖蛋白胨培养基：葡萄糖0.5g蛋白胨0.5gK2HPO40.2gH2O100mL分装2管12（二）接种培养试验名

4、称被接菌种1（管数）被接菌种2（管数）对照（管数）1．葡萄糖发酵大肠杆菌普通变形杆菌不接种2．乳糖发酵大肠杆菌普通变形杆菌不接种3．VP试验大肠杆菌产气肠杆菌4．吲哚试验大肠杆菌产气肠杆菌13（三）反应结果鉴定葡萄糖/乳糖发酵试验直接观察。VP试验：去塞，加40％KOH10滴，再加等量5%α－奈酚，用力振荡，37℃培养30min，观察。吲哚试验：加1ml乙醚（作用是萃取出吲哚）。振荡，静止片刻使分层，沿管壁慢慢加入吲哚试剂10滴，观察。14