DNA探针在固体电极上的固定以与对转基因植物产品的检测

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1、青岛科技大学研究生学位论文thephosphategroupofDNA．ThesensorpreparedbyfixingDNAonthechitosanfilmwascharacterizedbyelectrochemicalmethodsandtheconditionsfortheimmobilizationandhybridizationofDNAwerealsooptimizedandthebiosensorwasusedtodetecttheN盯IIgeneandPeRamplifiedsampleofNOSgene．Theresultsshowthatthissensorc

2、anbeusedinpracticalwithgoodpropeny．Atlast，theconclusionofthethesisislisted．KEYWORDSDNAelectrochemicalbiosensor,Aluminumion，Zirconiumion，Chitosan，Transgenicplant，VoltammetryIII符号说明CV：循环伏安c：溶液浓度mol／LC：表观电容¨Fcm‘2DPV：微分脉冲伏安E：峰电位VED。：氧化峰电位VED。：还原峰电位VE0’：式电位v△Ep：氧化峰还原峰电位差值Vj。：电容电流斗A‰：氧化峰电流¨AfDc．还原峰电流“

3、A△k：还原峰电流差值¨Am：质量gpH：溶液酸度t：时间sT：温度℃v：扫描速度mV／sv1／2扫描速度的平方根(roWs)1胆v：溶液体积¨L青岛科技大学研究生学位论文第一章文献综述1．1转基因植物产品的意义和存在的问题转基因作物(geneticallymodifiedcrops，GMC)指经遗传基因修饰了的生物体。自1983年问世以来至今已有20余年的历史，而其在世界范围内大面积推广种植也有10余载了。到目前为止，全世界共有45个国家2．5万多例转基因植物进入田问试验，涉及烟草、棉花、水稻等60多种植物和10种性状眠自1992年转基因作物首次商品化种植以来，世界转基因植物作物种植

4、面积增长迅速，从1996年的170万公顷猛增到2003年6月的6770万公顷，8年间增长了40多倍：其中，我国转基因作物作物的种植面积达150万公顷，占世界的3％，居世界第四位【2】。由于世界人口，特别是发展中国家人口的不断增长，如何使粮食也能与人口的增加同步甚至超越人口的增长是一个全世界关心的问题。这个问题由于越来越多的土地退化及气候变化引起的频繁自然灾害而更趋严重。基因工程技术，特别是转基因技术将是解决21世纪不断增加的人口对粮食需求造成压力的有效手段或重要途径。转基因技术不仪可望提高粮食或作物产量，还可提高农作物品质。例如，全球每年由于维生素A缺乏症而导致50万人失明，100万儿

5、童死亡，这类事件主要发生在以稻米为主食的发展中国家。瑞士科学家IngoPe仃ykus领导的研究组运用基因工程技术培育出一种成为“金稻”的水稻，它是一种具有高含量维生素A原物质的水稻，有可能解决维生素A缺乏症这个世界性大难题。转基因技术还可能大大缩短作物生长期或使农作物高产。例如，西班牙科学家Pena等从拟南芥菜中提取一种基因插入柑橘树，是原来要5--6年才成熟的柑橘树在一年内开花结果。转基因农作物大多作为食品或饲料提供人们或动物食用。因此，用转基因生物制成的转纂因食物(GMF)的安全是社会公众普遍关注的重大问题。转基因食品的安全性是转基因生物的安全的核心问题之一。有关农业转基因生物及其

6、产品的食用安全性问题概括来说有以下几点：DNA探针曲：闹体电极I‘的B1定以及对转基因植物产品的榆测(1)毒性问题尽管迄今还没有具有说服力的研究报告表明GMF的毒性，但由于转摹因作物可能产生“非预期后果”，凶此其加T成的食品可能存在潜在的健康风险。例如，巴西豆过敏事件(1996)，转基凶马铃薯引起大鼠器官生长异常(1998)，RR大豆中不明基因(2001)，星联Bt玉米事件(2000)，美国转基因玉米污染人d(2002)等都表明转基因作物及食品并不安全。(2)过敏性反应问题过敏性反应即医学上的变应原性风险，它同免疫系统有密切关系。而转基因作物可能诱发或加重变应原性风险。这足由于农作物中

7、引入外源性目的基因后，会使转基因生物带上新的遗传密码而产生’种新的蛋白质，这些蛋白质可能引起食用者或接触者出现过敏反应。近年来转基因食物引起过敏时有发生，特别是Bt玉米和RR大豆导致过敏症发生的频率增大。(3)抗药性问题由于技术限制，外来基因转化进入生物体的成功率很低，必须有一套检测转基因试验是否成功的方法。为此，在转化靶标基因(如Bt基因)的同时转入特定抗生素抗性(antibioticresistance)基因作为标记基因(markergen