安息香总香脂酸的提取纯化工艺及其脑保护作用研究

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1、成都中医药大学2015届硕士学位论文成都中医药大学（药学院）二0一五届硕士研究生学位论文安息香总香脂酸的提取纯化工艺及其脑保护作用研究StudyontheextractionandpurificationoftotalbalsamicacidsfromBenzoinumandthecerebralprotectioneffectoftotalbalsamicacid研究生姓名：黄小燕指导教师：夏厚林教授学科专业：药物分析二○一五年五月1万方数据成都中医药大学2015届硕士学位论文学位论文安息香总

2、香脂酸的提取纯化工艺及其脑保护作用研究黄小燕指导教师姓名：夏厚林教授申请学位级别：硕士专业名称：药物分析论文提交时间：2015年4月论文答辩时间：2015年5月二○一五四月2万方数据成都中医药大学2015届硕士学位论文安息香总香脂酸的提取纯化工艺及其脑保护作用研究中文摘要目的:研究安息香中主要成分总香脂酸的提取纯化工艺及其脑保护作用。方法：①总香脂酸评价方法的建立以重量法（药典法）为参照，建立紫外分光光度法(UV)测定安息香总香脂酸含量；以高效液相色谱法（HPLC）测定总香脂酸中苯甲酸含量。②总

3、香脂酸提取工艺以总香脂酸和苯甲酸转移率为指标，在预试基础上,采用溶剂提取法，对不同提取溶剂、不同提取方法进行考察后进一步对提取溶剂浓度、用量、提取时间三个主要影响因素进行正交设计实验，以确定安息香总香脂酸最佳提取工艺的各项参数。③总香脂酸纯化工艺以总香脂酸、苯甲酸吸附量和洗脱率为指标，对树脂种类、上样液pH、浓度、上样量、上样流速、解吸附剂用量、洗脱剂体积分数及用量进行考察，以确定总香脂酸最佳纯化工艺参数。④总香脂酸脑保护作用研究选用小鼠急性脑缺血模型、小鼠常压耐缺氧模型进行实验，考察总香脂酸对

4、小鼠存活时间的影响。结果：①总香脂酸评价方法的建立UV法检测波长为223nm，回归方程为A=66.750C+0.0377(r=0.9991)；HPLC法回归方程为Y=5839.9X－259.06（r=0.9994）。UV法与重量法相比较，P=0.437（＞0.05），即认为两种方法测定结果无显著性差异，提示UV法可用于测定安息香总香脂酸含量。②总香脂酸提取工艺最佳提取工艺参数为：氢氧化钠浓度为0.75mol/l、溶媒用量为15倍、提取时间为1h，提取1次。③总香脂酸纯化工艺最佳纯化工艺参数为：上

5、样液pH为12、上样液浓度为0.02g/ml、上样量8BV、上样流速为2BV/h、3BV去离子水除杂、2BV的稀盐酸解吸附、6BV的95%乙醇洗脱。纯化后，总香脂酸平均纯度达73.49%，纯化倍数达2.78；苯甲酸平均纯度达63.97%，纯化倍数达2.95。④总香脂酸脑保护作用研究与溶媒对照组比较，总香脂酸组、安息香组、冰片组对抗小鼠急性脑缺血、缺氧作用均不明显，但一定程度上延长了小鼠存活时间；而总香脂酸-冰片配伍组、安息香-冰片配伍组对抗小鼠急性脑缺血、缺氧作用明显，能够显著延长小鼠存活时间；

6、总香脂酸组与安息香组比较、总香脂酸I万方数据成都中医药大学2015届硕士学位论文-冰片配伍组与安息香-冰片配伍组比较，P值均大于0.05，表明总香脂酸与安息香生药在药效学上无显著性差异，但总香脂酸对小鼠存活时间有延长趋势，与课题组前期研究结果一致；上述结果表明总香脂酸为安息香有效成分，且进一步验证了冰片的“引药入脑、佐使有功”的作用。结论：①UV法与重量法对总香脂酸含量测定的结果无显著性差异，但重量法步骤繁琐、周期长而UV法操作步骤减少、周期缩短，测定结果准确可靠，可用于安息香总香脂酸的含量测定

7、。②提取工艺科学合理，稳定可靠，提取效率高；717型阴离子交换树脂对安息香总香脂酸的纯化效果好，周期短，成本低，为后期开展总香脂酸脑保护作用的研究奠定了基础。③总香脂酸较安息香生药而言，药效学上虽然无显著性差异，但在一定程度上也延长了小鼠存活时间，提示总香脂酸可能为安息香有效成分，且进一步验证了冰片“引药入脑、佐使有功”的作用，对后期安息香开展深入研究奠定了实验基础。关键词：安息香；总香脂酸；UV法；HPLC法；提取纯化；脑保护II万方数据成都中医药大学2015届硕士学位论文Studyonthe

8、extractionandpurificationoftotalbalsamicacidsfromBenzoinumandthecerebralprotectioneffectoftotalbalsamicacidAbstractObjective:①tostudytheextractionandpurificationprocessoftotalbalsamicacidsfromBenzoinumandcerebralprotectioneffectoftotalbalsamicacids.M