微生物的生长繁殖

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1、一、微生物生长繁殖   微生物生长是细胞物质有规律地、不可逆增加,导致细胞体积扩大的生物学过程,这是个体生长的定义。繁殖是微生物生长到一定阶段,由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。可以看出微生物的生长与繁殖是两个不同,但又相互联系的概念。生长是一个逐步发生的量变过程,繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。在高等生物里这两个过程可以明显分开,但在低等特别是在单细胞的生物里,由于个体微小,这两个过程是紧密联系很难划分的过程。因此在讨论微生物生长时,往往将这两个

2、过程放在一起讨论,这样微生物生长又可以定义为在一定时间和条件下细胞数量的增加,这是微生物群体生长的定义。   1、 细菌的个体生长   细菌的个体生长包括细胞结构的复制与再生、细胞的分裂与控制,染色体DNA的复制和分离 细菌在个体生长过程中通过染色体DNA的复制,使其遗传特性能保持高度的连续性和稳定性。   细胞壁扩增:细胞壁是细胞外的一种“硬”性结构。细菌在生长过程中,细胞壁只有通过扩增,才能使细胞体积扩大。   细菌的分裂:当细菌的各种结构复制完成之后就进入分裂时期。此时在细菌长度的中间位置,通过细胞质膜内

3、陷并伴随新合成的肤聚糖插入,导致横隔壁向心生长,最后在中心会合,完成一次分裂,将一个细菌分裂成两个大小相等的子细菌。   2、 细菌的群体生长繁殖   除某些真菌外,我们肉眼看到或接触到的微生物已不是单个,而是成千上万个单个的微生物组成的群体。微生物接种是群体接种,接种后的生长是微生物群体繁殖生长。   细菌接种到均匀的液体培养基后,当细菌以二分裂法繁殖,分裂后的子细胞都具有生活能力。在不补充营养物质或移去培养物,保持整个培养液体积不变条件下,以时间为横坐标,以菌数为纵坐标,根据不同培养时间里细菌数量的变化,可

4、以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线,这种曲线称为生长曲线(growth cuwe)。一条典型的生长曲线至少可以分为迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期等四个生长时期。   ①延迟期 lag phase(停滞期、调整期)   表现:不立即繁殖,生长速率近于0,菌数几乎不变,细胞形态变大。   特点:分裂迟缓,合成代谢活跃,体积增长快,对外界不良环境敏感。   原因:调整代谢,合成新的酶系和中间代谢产物以适应新环境。   消除:增加接种量;采用最适菌龄接种;培养基成分(种子、发酵)   ②对数期 log 

5、phase   表现:代谢活性最强,几何级数增加,代时最短,生长速率最大。   特点:细菌数目增加与原生质总量增加,与菌液浊度增加呈正相关性。   代时(generation time):单个细胞完成一次分裂所需时间,亦即增加一代所需时间。   G=t1-t0/n   y=xo×2 n    n=lgy - lgx/lg2   导出 G = t1-t0 /3.3(lgy - lgx)   影响G因素:菌种、营养成分、营养物浓度(很低时影响)、培养温度。   ③稳定期 stationary phase(最高生长期

6、、静止期)   表现:新增殖细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,活菌数动态平衡。   特点:生长速率又趋于0,细胞总数最高。   原因:养分减少;有毒代谢物产生。    稳定期细胞内开始积累贮存物,此阶段收获菌体,也是发酵过程积累代谢产物的重要阶段。   延长:补料,调pH、温度等。此时,菌体总数量与所消耗的营养物之间存在一定关系,称为产量常数(生长效率)。Y = X - X0 /C    其中X-稳定期细胞干重/ml, X0 -接种时干重/ml,C-限制性营养物浓度。   根据这一原理,可进行生物测定。   将未

7、知混合物加到只缺乏特定限制性营养物的完全培养基中,测定培养基所能达到的生长量,就可以计算出原混合物中特定限制性营养物的浓度。   ④衰亡期 decline phase   表现:出现 "负生长 ",有些细胞开始自溶。   对于丝状真菌,细胞数目不呈几何级数增加,无对数生长期,一般有调整期,最高生长期,衰退期。   迟缓期(lag phase)   细菌接种到新鲜培养基而处于一个新的生长环境,因此在一段时间里并不马上分裂,细菌的数量维持恒定,或增加很少。此时胞内的RNA、蛋白质等物质含量有所增加,相对地此时的细胞

8、体积最大,说明细菌并不是处于完全静止的状态。产生迟缓期的原因,认为是微生物接种到一个新的环境,暂时缺乏足够的能量和必需的生长因子,“种子”老化(即处于非对数生长期)或末充分活化,接种时造成的损伤等。   在工业发酵和科研中迟缓期会增加生产周期而产生不利的影响,但是迟缓期无疑也是必需的,因为细胞分裂之前,细胞各成分的复制与装配等也需要时间,因此应该采取一定的措施:①通过遗传学方法改变种的

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