《需氧革兰阳性杆菌》PPT课件

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1、需氧革兰阳性杆菌芽胞杆菌属Bacillus李斯特菌属Listeria丹毒斯菌属Erysipelothrix加德纳菌属Gardnerella需氧芽胞杆菌属(Bacillus)48个种与医学有关5个种炭疽芽胞杆菌(B.anthracis)蜡样芽胞杆菌(B.cereus)蕈状芽胞杆菌(B.mycoides)巨大芽胞杆菌(B.megaterium)苏云金芽胞杆菌(B.thuringiensis)1临床意义引起人、蓄共患的急性传染病,包括皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽、败血性炭疽,烈性传染病,死亡率极致病因子:荚膜:抗吞噬,有利于细菌在组织内繁殖扩散炭疽毒素:保护性抗原、致死因子、水肿因子病后可获得持久

2、免疫力炭疽芽胞杆菌2炭疽芽胞杆菌革兰阳性大杆菌,两端截平,竹节状排列,有芽胞、无鞭毛、可有毒株有荚膜,芽胞椭圆形,小于菌体,位于菌体中央,多在有氧条件下形成,25~30℃,在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中,都易形成芽胞在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞,尸体严禁解剖3普琼平板:灰色、粗糙型菌落;卷发状边缘(低倍镜下)BAP:不溶血NaHCO3BAP:--有毒株产生荚膜呈黏液型菌落,挑取时呈粘丝状(鉴别要点)--无毒株—粗糙型菌落培养特性肉汤培养基:絮状沉淀明胶—37℃18~24h表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。4生化反应葡萄糖+、麦芽糖+、蔗糖+、

3、卵磷脂酶弱+、触酶+硝酸盐还原试验+、VP+、吲哚-、硫化氢-、柠檬酸盐-、尿素-明胶液化+胨化牛乳:在牛乳中生长2~4天后牛乳凝固并缓慢胨化5抗原菌体多糖抗原:与毒力无关,耐热,特异性不高,病兽脏器皮毛加热后仍可与相应抗体反应,称Ascoli热沉淀反应荚膜多肽抗原:抗吞噬,与毒力有关芽胞抗原:炭疽毒素Anthraxtoxin:由保护性抗原、致死因子、水肿因子形成。6抵抗力耐热、耐干燥对氧化剂敏感对青霉素、磺胺类抗生素敏感7微生物学检查标本的采集:分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液等,严禁宰杀解剖死蓄。标本的处理:液体标本取沉渣分离培养;固体标本用生理盐水浸泡,水浴杀死非芽胞菌;血液

4、、脏器、渗出液增菌或直接分离培养8痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物2%兔血清肉汤快速增菌37℃4h荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验直接涂片荚膜染色G染色初步报告0.2ml注射小白鼠腹腔,8h后解剖涂片G染色、荚膜染色初步报告快速检验程序核酸检测Ascoli试验皮毛、腐败脏器等9生化反应噬菌体裂解青霉素抑制毒力试验皮毛、腐败脏器等血液以NG制成悬液经加温或饱和尿素处理肉汤增菌培养BAP或戊烷脒平板2%兔血清肉汤4-8hG染色镜检菌落特征动力观察串珠试验确定报告荚膜肿胀试验分离培养检验程序法定报告传染病,发现疑是病例应于24小时内上报CDC10戊烷脒多粘菌素琼脂基础培养基25μg/L戊烷脒:杀灭

5、利什曼原虫等寄生虫3000IU/L多粘菌素2%脱纤维羊血11检验方法涂片染色:革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞—初步报告荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验核酸检测:核酸杂交分离培养:BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性培养基。2%兔血清肉汤增菌→分离培养12菌落特征形态染色生化试验:表13-1串珠试验:接种于含青霉素(0.05~0.5U/ml)的肉汤中,37℃6h,大而均匀成串的圆球状菌体,与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关,类炭疽无此现象鉴定试验13接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板,37℃24h生长受抑制不生长串珠和青霉素抑制联合试验:兔血琼脂平板抑菌环青霉素纸片青霉素抑

6、制试验串珠形成区14噬菌体裂解试验:AP631炭疽噬菌体NaHCO3毒力试验:接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板,10%CO2、37℃、24~48h,有毒株形成荚膜—黏液型菌落,无毒株不形成荚膜—粗糙型菌落毒素动物试验:小鼠、家兔或豚鼠皮下接种植物凝集素试验:荧光或酶标记PHA与菌体多糖反应Ascoli热沉淀试验:可作追溯性诊断其它实验15临床意义食物中毒:含菌量达105/g以上,夏、秋季多见,中毒食物大多无腐败、变质现象,感官性状正常,应引起注意呕吐型——耐热肠毒素腹泻型——不耐热肠毒素全眼球炎(外伤后)心内膜炎、败血症和脑膜炎蜡样芽胞杆菌Bacilluscereus16

7、蜡样芽胞杆菌Bacilluscereus形态:革兰阳性大杆菌、两端钝圆、有芽胞、周鞭毛、无荚膜培养特性:需氧或兼性厌氧,最适温度30~35℃,营养要求不高。普通琼脂平板:菌落较大,灰白色,表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状,有蜡样光泽BAP有β溶血卵黄平板—生长迅速,培养3h后,虽看不到菌落,但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环,称乳光反应或卵黄反应17生化反应葡萄糖+、蔗糖+、麦芽糖+等卵磷脂酶+、VP+胨化牛乳+、液化明胶+,多次传代后

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