小麦MITE扩增体系的建立.pdf

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1、华北农学报·2014，29(2)：110-1l5小麦MITE扩增体系的建立谢欢，杨文香，彭巧慧，赵丽娟，刘力伟，张娜，刘大群(1．河北农业大学植物病理学系，河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心，国家北方山区农业工程技术研究中心河北保定071001；2．河北省农林科学院，河北石家庄050011；3．邯郸市种子管理站，河北邯郸056002)摘要：以Thatcher及23个以Thatcher为遗传背景的小麦抗叶锈病近等基因系为材料，开展了MITE扩增体系的建立研究，获得了适合小麦MITE分子标记的扩增体系及不同引物的退火温度，所用56对引物

2、有27对获得稳定扩增。关键词：小麦叶锈病；抗病基因；MITE；分子标记中图分类号：$512．03文献标识码：A文章编号：1000—7091(2014)02—0110—06Establishment0fMITEAmplificationSystemintheWheatStudyXIEHuan，YANGWen—xiang，PENGQiao—hui，ZHAOLi-juan，LIULi—wei，ZHANGNa，LIUDa．qun(1．CollegeofPlantProtection，AgriculturalUniversityofHebei，Bio

3、logicalControlCenterofPlantDiseasesandPlantPestsofHebeiProvince，NationalEngineeringResearchCenterforAgricultureinNorthernMountainousAreas，Baoding071001，China；2．HebeiAcademyofAgricultureandForestySciences，Shijiazhuang050011，China；3．PlantSeedsManagementStationofHandan，Handan

4、056002，China)Abstract：Thatcherand23ofwheatleafrustresistancenearisogeniclinesinThatcherbackgroundwerechosenasmaterialsinthisexperiment．ResearchontheestablishmentofMITEamplificationsystemwascarriedout．27ofthe56primerpairswereamplifiedstably，reactionsystemanddifferentanneali

5、ngtemperatureofprimerswerecon-firmedforamplificationofMITE(Miniatureinve~edrepeattransposableelements)．Keywords：Wheatleafrust；Resistancegene；MITE；Molecularmarkers小麦叶锈病是小麦的主要病害之一，严重发生AFLP、RFLP、SSR等技术开展了分子标记研究，获得时可造成15％～40％甚至更高的产量损失，是影了20余个基因的分子标记，为这些基因的分子标记响世界小麦稳产高产的重要因素。抗病

6、品种的合理辅助鉴定提供了有力工具]。然而，还有很多抗病利用是防治该病害的安全、有效、经济的方法。抗病基因需要获得紧密连锁或完全连锁的分子标记。基因的分子标记与定位对于提高抗病育种的效率具微型反向重复转座子元件(Miniatureinve~ed有重要意义。repeattransposableelement，MITEs)是在动植物中广国际上对于小麦叶锈病抗病基因的研究比较深泛存在的一种转座子L4-61。Komori等[研究表明，入，利用遗传分析、缺失体系和分子标记鉴定明确了MITE区域的单核苷酸多态性(Singlenucleotidepol—1

7、00余个抗叶锈基因。到目前为止，已经正式命名ymorphism，SNP)的频率为2．96％；MITEs侧翼序列70余个抗叶锈病基因_2J。通过寻找与抗病基因紧SNP的频率比非MITEs区域高3倍。Chang等J密连锁的分子标记，可以从基因水平上对抗病基因以MITE的TIR序列为基础设计引物，以PCR技术进行准确鉴定和定位，同时还可建立遗传连锁图，为为基础，发明了IMP(Inter．MITEpolymorphisms)标最终分离、克隆抗病基因奠定基础，因而受到育种工记技术，该技术可以检测2个相邻MITE位点间的作者和植保工作者的广泛关注。目前

8、，利用RAPD、DNA多态性，是一种共显性分子标记。国外研究学收稿日期：2013—10—28基金项目：国家重点基础研究发展计划“973计划”项目(2013CB127700)；国家