DNA和激素受体测定在乳腺癌中的应用.pdf

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1、上海9904月134·.医学1年(第卷第期)191DNA和激素受体测定在乳腺瘤中的应用上海医科大学附属肿瘤医院邵志歌沈镇宙曹世龙刘尚廉韩企夏庄传经李月云、7例。提要作者应用流式细胞分析仪检测乳腺癌腋淋巴结及正常乳腺组织标本共12在57例乳腺癌标本中,34例(的.7解)为异倍体肿瘤;40例腋淋巴结标本中,16例(40.0多)为异倍体。,、DNA;30例正常乳腺组织均为二倍体DNA57例乳腺癌标本中39例行酶联雌孕激素受体测定。结果显示异倍体肿瘤的S期细胞百分率明显高于二倍体肿瘤和正常乳腺组织(p<0.05),且、,,.ERPgR阴性的发生率亦明显高于二倍体肿瘤当原发病灶及腋淋

2、巴结均为异倍体时更为明显应,用流式细胞分析仪检测及激素受体测定发现在相同的组织学形态下常有不同的DNA含量和S期细,。,胞的百分率提示其恶性程度不同应用此两项检渺可弥补形态学检查的不足为预测预后提供客观。的依据`,I,。影响乳腺癌预后的因素很多以往主5帕PI荧光染料lml调整细胞悬液浓度至`,。要根据临床和形态学的检查来判断手术后的10过滤后上机检测,、、、:预后其中主要包括临床分期组织学分类三DNA含量的测定方法使用双激、`21。,淋巴结有无癌转移癌细胞的分化程度等光流式细胞分析仪(EPICS万)以波长为488,,但有些形态学相似的癌细胞其恶性程度并nm功率为300nw氢

3、离子激光离子作为光,,,,不相同预后亦不相似说明形态学的检查源细胞发出的荧光信号以组方图形式(图1。,,有一定的局限性本文主要应用流式细胞分2)在多道脉冲分析仪上显示所得数据经,、,析仪从分子水平检测乳腺癌细胞腋淋巴计算机处理每次检测前都以人淋巴细胞或DNA。D结的含量和细胞增殖周期中各期细胞鸡血红细胞定标NA含量主要以DNA指,,e,比率的变化结合激素受体的测定以探讨数(DNAIdnx)简称DI来表示其lD确定。:其与癌细胞生物学特性的联系方法如下:DI~所检测病变细胞的GO/峰均道值//、人淋巴细胞的0G峰均道值或鸡血红细胞材料与方法.,x2的GO/峰均道值75、:、一

4、样品来源取术后新鲜的乳腺癌细胞增殖周期各期细胞相对分布均由计旅琳巴结和正常乳腺组织标本各0.5~1.09算机分析得出。。..:送流式细胞检测及常规病理检查同时送新结果判断DI>11或Dl<09均为异..ER,01鲜乳腺癌标本作雌激素受体()和孕酮受倍体细胞9

5、40冰箱以备检测rgHRP溶液置过夜用BTS溶液洗去多余试:,S,细胞悬液DNA染色将细胞悬液用剂后浸入DAB液显色邓冲洗后苏木、、、。1a、e1肠Trito一,0呱RN和-nX100处理加入素复染脱水透明封片后观察癌细胞一·192.,、`、沙八八之图1正常乳腺组织细胞的DNA分布平面图(左)图2乳腺癌细胞的DNA分布平面图(左)和立体图(右).,Dl=1,DN,和立体图(右)其0为二倍体细其前面一峰示二倍体细胞的A分布后面一蜂胞示异倍体细胞的DNA分布,其Dl二1.7、浆和/或核内有棕色颗粒者为ER或PgR阳表1异倍体肿瘤二倍体肿瘤及正常乳。,腺组织的S期细胞百分率性细胞

6、如阳性细胞<20呱为阴性>20肠。为阳性此方法和葡聚糖包埋活性炭法(DCC类别例数S期细胞(书)P值,`sl。..法)比较符合率达80帕以上乳腺癌异倍体肿瘤20230246(135、402)3)的乳腺癌二倍体肿瘤14.5(3.4、16.钊冲.正常乳)床组织15.6(4.8、17结果表2DNA含量和激素受休的关系,ER(一)+)(57例乳腺癌标本其中40例同时取腋类别例数班(ER一)ER(+)PgR(一)R一)PgR(+)PgR(+),30gP(淋巴结标本例同时取标本边缘的正常乳。片`2曰上,145腺组织作流式细胞分析仪检测异倍休肿瘤231伊、二倍体肿瘤163一流式细胞分析仪

7、测定结果,..:,,P(一)仪的测定30例正常乳腺组织均与二倍休肿瘤相比P0肠,,、为二倍体或近二倍体57例乳腺癌标本中二流式细胞分析仪检测结果和激素受.34例(597肠)为异倍体肿瘤,40例测定腋下体测定结果的分析,.,39淋巴结16例(40。肠)为异倍体DNA含量57例中有例同时测定雌激素受体和,,。其中13例病理证实有癌转移3例未见转孕酮受体结果如下、。(一)DNA含量和ERpgR之间的结移:。(二)细胞增殖s期细胞的测定结果果分析列于表2,,ER、57例乳腺癌标本中43例可进行细胞增殖周表

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