灭菌工艺基础知识资料ppt课件.ppt

《灭菌工艺基础知识资料ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、灭菌工艺基础知识灭菌和消毒的目的与定义消毒、灭菌的目的：抗生素发酵是纯种培养过程，培养基在储存、运输、加工、配制过程中不同程度污染了多种杂菌，需要通过严格的消毒、灭菌以彻底清除杂菌。消毒的定义：消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体，但不一定能杀死细菌芽孢的方法灭菌的定义：用物理或化学方法杀灭或除掉物料及设备中所有的生命物质的工艺过程。包括致病和非致病微生物以及芽孢。灭菌比较彻底。消毒、灭菌的重要性：消毒、灭菌工作在发酵车间占有举足轻重的地位。灭菌的方法1、化学灭菌法：使用化学药剂如甲醛、苯酚、新洁尔灭、过氧乙酸、高锰酸钾、漂白粉等进行某些容器或物料及无菌区域的灭菌。2、物

2、理灭菌：主要有射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌。3、按温度划分：100℃为常用消毒杀菌温度，100-120℃为高温灭菌，120-150℃为超高温灭菌。4、湿热灭菌比干热灭菌更有效，对芽胞的杀灭效果更佳。湿热灭菌法湿热灭菌法的原理通过饱和蒸汽加热、加压，使温度上升到微生物致死范围，菌体蛋白质或核酸发生变性、凝固、继而死亡。消毒介质----饱和蒸汽抗生素培养基通常以饱和蒸汽做为灭菌介质。饱和蒸汽灭菌（湿热灭菌）的优点(题解1）：1）本身无毒、无公害。2）蒸汽具有很大潜热，穿透力强，有利于彻底灭菌。3）制备输送容易，调节方便，操作上易管理。决定灭菌效果的主要因素灭菌效果取决于——菌的种类与灭

3、菌温度。微生物有一个共同的行为特征——耐热性。不同的微生物耐热性（灭菌温度）不同；相同温度下，芽胞比生长期细菌的耐热性强。灭菌效果仅与菌的种类与灭菌温度有关。细菌芽胞灭菌时间和温度细菌芽胞名称灭菌时间（min）100℃105℃110℃120℃125℃炭疽杆菌2-5枯草杆菌数小时40韦氏梭菌4527151肉毒梭菌3001209020嗜热杆菌400300358灰黄霉素的菌体形态（发酵液）决定灭菌效果的主要因素由上表可以看出，芽胞比生长期细菌的耐热性强。芽胞：是细菌抵抗外界不良环境（高温、低温、光线、干燥、化学品）的休眠体，具有很强的耐热性。因此，以杀灭最耐热的芽胞为标准，把121℃、30分钟作为

4、最安全的灭菌温度和灭菌时间。灭菌对培养基的影响湿热灭菌属于高温灭菌，灭菌的时间越长、温度越高，营养成分破坏也越严重。灭菌是一把双刃剑，在保证全部杀灭杂菌的同时为抗生素纯种发酵提供无菌培养基，还不同程度地破坏培养基，同时发生一系列物理、化学反应。各车间根据培养基特点、工艺要求，在经过理论计算、工艺验证的基础上，制定不同的灭菌温度和灭菌时间。此外，还要注意升温阶段、降温阶段，与保温阶段同样有灭菌效果。灭菌温度、时间对培养基的影响灭菌温度（℃）灭菌时间（min）破坏程度（%）10040099.3110306711515501204271300.5081400.0821500.01＜1发酵培养基各组

5、分的性质及作用1、碳源：为细胞生命活动提供能量以及合成产物的碳架。淀粉、糊精、豆油、葡萄糖、鱼油属于碳源。2、氮源：是构成生物体的蛋白质、核酸及其他氮素化合物的材料。黄豆饼粉、豆粕粉、玉米浆、酵母粉、硫酸铵、氨水属于氮源。黄豆饼粉、酵母粉为有机氮源，硫酸铵为无机氮源。3、无机盐：硫酸亚铁、磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁。4、微量元素：氯化钴。5、其它辅料：淀粉酶、抗生素、消泡剂等。消毒、发酵指标及常用参数1、效价：抗生素是一种生理活性物质，其活性常用特定的单位---“效价”来表示，它是衡量抗生素有效成分的尺度，也是衡量其抗菌性能的标志。常用单位/毫升（r/ml）或单位/毫克（u/mg）来表示。2

6、、PH值要想得到比较理想的发酵单位，必须重视消前、消后、发酵过程中PH值的控制，即应将PH值控制在抗生素产生菌的生长繁殖及合成抗生素的最适合的PH值范围内。3、发酵液体积（一）理论放罐体积=发酵罐空罐体积×装料系数空罐体积=π×内半径的平方×罐体高度+下封头容积（二）放罐体积=（一、二级种子液+发酵罐消后体积+全程补料液体积）-蒸发量放罐总亿和发酵指数根据发酵效价、体积、与泡沫系数，计算发酵产物的总亿效价实体积／虚体积=泡沫系数虚体积×泡沫系数=实体积实体积×放罐效价=发酵总亿发酵指数是衡量发酵水平的技术指标。平均发酵单位×平均放罐体积发酵指数=———————————————平均发酵周期×发

7、酵罐空罐体积发酵指数单位（发酵液总亿/小时·m3）消后体积的重要性对于种子罐、发酵罐、补料罐消毒体积的要求，必须保证碳、氮比例协调，符合工艺规定的消后指标。对于种子罐的消后体积，体积过小，移入下级罐的接种量偏低，使产生菌生长代谢缓慢，起步单位低；体积过大，容易起沫染菌，不利于正常生产。对于补料罐的消后体积，主要控制计料液的含糖量。发酵罐消后体积的重要性（题解2）对于发酵罐的消后体积，除了要保证工艺条件外，还需