复养场采样方案.docx

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1、复养场采样方案一、目的通过监测环境中是否存在非洲猪瘟病毒二、材料与方法1.材料商品化灭菌（环境）拭子，样品保存液，生理盐水，离心管；乳胶手套，PE手套，隔离服，鞋套；泡沫箱，塑封袋，干冰或冰块，登记表，记号笔，标签纸。2.采样准备人员穿隔离服，戴鞋套进入采样区域；一人负责采集样品，一人负责样品收纳，登记；采样前将拭子提前使用样品保存液浸润。3.采样流程3.1.风险点采样1)采样员需穿戴好防护服，配戴一次性PE手套；2)根据采样区域选取采样点（参见表1），使用商品化灭菌环境拭子对环境进行擦拭；a.对于面积较大

2、的采样区域，使用浸润样品保存液的环境拭子进行以25cmx25cm为单位的擦拭；b.对于面积比较小的采样点，使用浸润样品保存液的灭菌拭子，在采样点进行来回擦拭；c.通常随机选取几栋猪舍采集样品，可视场内发病情况和位置选择增加采集的数量或所有猪舍均采集；d.固定样品采集点的持续性监测比单次的所有区域全部检测更有效。3）选取采样点时，尽量固定采集点以便后续的持续跟进；采集点尽量选取避光、湿润、有利于病毒存在的地方；4）将拭子装入套管内，折断拭子手柄（注意不要触到离心管外壁）；5）收集员将样品标记，登记，并将样品置

3、入塑封袋中，放入盛有冰袋的收纳箱；6）完成一个区域（栋舍）采样后，采集员将一次性手套脱下，置入垃圾桶；7）样品可冷藏或常温运输。表格1环境采样点采样点采集方式和内容1.走（过道）猪舍入口处+过道中不易清洗处+凹凸不平处，环境拭子多点采样检测2.猪栏地面栏内四角和中央位置共5个点环境拭子（包括采样点的地板缝隙）多点采样检测3.猪栏栏杆栏杆底部不易清洁处，多点环境拭子采样检测4.料槽、水槽环境拭子多点采样，包括底部凹处不易清洁点，可多点采集检测；同时分开多点采集饲料下料口处5.粪沟粪沟四角和中央位置共5个点环境

4、拭子（包括下粪口）多点采样检测6.水嘴多个水嘴环境拭子采样检测7.风机环境拭子做多个出风口风机样品采集检测8.水帘尽量选取靠猪或赶猪通道较近的水帘做多点环境拭子采样，适当混样检测9.墙壁选取靠猪或赶猪通道较近的，以及有破损处、清洗死角的多个点做环境拭子采样检测10.生产工具还没有丢掉的铁锹、扫把、赶猪挡板等做多点环境拭子采样检测11.走廊温控器表面及内部人员可碰触道的点做多点环境拭子采样12.赶猪道/猪道采集赶猪道地面及两侧壁不易清洁处，环境拭子做多点采集检测13.赶猪道/人道采集人走过道地面及两侧壁不易清

5、洁处，环境拭子做多点采集检测14.道路赶猪道上方人员通道处、上下楼梯处多点做环境拭子采样检测15.场内卡/铲车固定采集9个点：驾驶室脚踏板、上车脚踏板、轮胎、底盘、车厢上层左上角、车厢上层右下角、车厢下层右上角、车厢下层左下角、车厢后挡板。可混样或单独检测。铲车：驾驶室脚踏板、上车脚踏板、轮胎、铲斗正面及背面16.猪只处死点周边地面、墙壁及设备做多点环境拭子采样，可混样或单独检测17.场内掩埋点掩埋点及周边多点采集少量没有沾到生石灰的土壤运到实验室后加样品保存液离心取上清做检测18.脏净区交界处环境拭子采集

6、侧壁，多点混样19.脏区侧壁、地面环境拭子采集，多点混样20.净区侧壁、地环境拭子采集，多点混样21.赶猪工具、挡环境拭子采集，多点混样22.地面环境拭子采集，多点混样23.药品架表面环境拭子采集，多点混样多个下料口处的纱布用10-20毫升生理盐水沾取洗24.下料口纱布涤后，取1毫升加入到样品保存液中；或用环境拭子在多个下料口纱布上做采集检测25.饲料堆放点饲料堆放处做多点环境拭子采集检测26.水源储藏处水井、河水、后备猪舍附近污水处理点分别共取1ml,样品到样品保存液中做检测27.洗澡区域冲凉房入口地面、

7、衣橱柜、换鞋处，环境拭子采集，混样检测；冲凉房出口地面、衣橱柜、换鞋处，环境拭子采集，混样检测；地面多点采样，混样检测28.人手、头发拭子采样，混样检测；还没有清洗或清洗不干净的衣物做多点环境拭子采集检测；靴底部拭子采样，多个混样检测29.人员进场处环境拭子采集风险点较高处，混样检测；消毒脚垫换鞋处环境拭子采集，混样检测；堆叠物品处、架子、地板多点采样，混样检测30.路面在车辆入场处做多点环境拭子采样，混样检测;在猪场门口车辆（特别是拉猪车）频繁来往的路面上做环境拭子采样，混样检测;净区污区处做多点环境

8、拭子采样，混样检测31.洗消工具高压水枪等做环境拭子采样，混样检测