岛津LC-20A高效液相色谱仪操作规程.doc

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时间:2020-11-25

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1、岛津高效液相色谱仪LC-20A操作规程一、目的:为了安全、规范、正确使用岛津LC-20A型高效液相色谱仪,特制订本操作规程。二、范围:仅适用于岛津LC-20A型高效液相色谱仪。三、环境要求:温度4~35℃,相对湿度为40~80%,最好是恒温、恒湿,远离高电干扰、高振动设备。四、LC-20A高效液相色谱仪工作原理:高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配

2、过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到工作软件,数据以图谱形式表现出来。开机顺序:A泵→B泵→柱温箱→自动进样器→检测器→系统控制器后→电脑显示器→主机(注:仪器各单元的开关均在左下角)五、样品准备:5.1开机之前,准备好所用的流动相和样品,检查储液器的吸滤头是否在液面以下。流动相和样品必须通过0.45um过滤器过滤。5.2流动相:必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相,并通过0.45um过滤器过滤。过滤后的流动相必须经过充分脱气,以除去其中溶解的气体O2等,如不脱气易产生气泡、基线噪声增加、灵敏度下降,

3、甚至无法分析。5.3查看仪器使用记录,了解仪器当前状况。5.4样品前处理:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理。图4样品前处理六、操作规范流程:6.1启动:双击LCsolution,“LCsolutionLauncher”启动:此时仪器发出“嘀嘀”两声,表明系统与仪器连接成功6.2设置系统配置:单击,选择自动配置,检查系统与仪器的实际配置是否相符。图7:系统配置6.3设定方法:仪器参数视图“高级”处,分别设定数据采集、LC时间程序、泵、荧光检测器、柱温箱、自动进样器、自动排气等参数,保存方法(另存为)。单击下载,将设置传输到仪器。如图8:图8

4、:仪器参数视图6.4排气:点击“自动排气”,出现图9界面。打开排液阀(逆时针旋转15°),开始排空,检查流动相入口管路中没有气泡后。图9:系统排气显示图10:仪器排气操作示意图6.5运行变化:关闭排液阀(顺时针旋紧),点击“仪器开/关”,听到“嘀”声,系统开始运行并显示“就绪”,观察基线和压力变化,待基线和压力平稳,准备进样。图11:观察基线与电压变化6.6进样:打开进样器,将准备好的样品依次放入样品架后,样品架轻轻推回进样器内,听到“咯噔”一声表明样品架正确归位;图12:样品架6.6.1单次运行:点击“单次运行”,如图设置相关参数,点击“开始”后检查信息提示栏出现,进样器开始进样

5、。进样过程中如有异样需停止采集数据,点击。图13:单次运行6.6.2批处理运行:点击“批处理运行”进入批处理界面,再点击“向导”,如图设置相关参数,完成后点击,进样器开始进样。图14批处理表向导图15批处理表向导-标准位置图16批处理表向导-未知样品图17批处理表向导-汇总报告图18:批处理表注:保存为自己清楚的方法名,切勿覆盖或删除他人的方法及实验数据。6.7数据采集:图19:数据采集6.8数据处理:点击左侧助手栏图标进入“再解析”界面,进行数据处理,编辑报告并保存结束图20:“再解析”界面6.9报告编辑:单击“LC再解析”助手栏中的图标,出现“报告”窗口,根据报告所需内容选择工

6、具栏相应的按钮,如图:工具栏图21报告编辑6.10系统清洗:用流动相清洗柱子30min;6.11系统关闭:退出工作站软件→系统控制器→检测器→自动进样器→泵B→泵A6.12使用者须认真履行使用登记制度,保存实验数据并填写仪器使用记录表,未经操作培训,不得擅自使用仪器。

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