酶的概述电子教案.ppt

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1、酶的概述一、酶的概念及其作用特点1、酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的生物催化剂。2、酶与非生物催化剂相比的几点共性:①催化效率高,用量少(细胞中含量低)。②加快反应速度但不改变化学反应平衡点。③降低反应活化能。④反应前后自身结构不变。3、酶催化反应的特点(1)、催化效率更高酶催化反应速度是相应的无催化反应的108-1020倍,并且高出非酶催化反应速度至少几个数量级。(2)、专一性高酶对反应的底物和产物都有极高的专一性,几乎没有副反应发生。(3)、反应条件温和常温、常压,中性pH环境。(4)、活性可调节别构调节、酶的共价修饰、酶的合成、活化与降解等。(5)、酶的

2、催化活性离不开辅酶、辅基、金属离子二、酶的化学本质及其组成(一)酶的化学本质绝大多数酶是蛋白质证据(1)酸水解的产物是氨基酸,能被蛋白酶水解失活;(2)具有蛋白质的一切共性,凡是能使蛋白质变性的因素都能使酶变性。少数酶是RNA(核酶)(二)酶的化学组成单纯酶类(simpleenzyme):仅由蛋白质组成脲酶、溶菌酶、淀粉酶、脂肪酶、核糖核酸酶等缀合酶类(conjugatedenzyme):全酶(holoenzyme)=脱辅基酶(apoenzyme)+辅因子(cofactor):超氧化物歧化酶(Cu2+、Zn2+)、乳酸脱氢酶(NAD+)★酶的辅助因子主要有金属离子和有机化

3、合物金属离子:Fe2+、Fe3+、Zn2+、Cu+、Cu2+、Mn2+、、Mn3+、Mg2+、K+、Na+、Mo6+、Co2+等。有机化合物:NAD,NADP,FAD,生物素,卟啉等辅酶(coenzyme):与酶蛋白结合较松,可透析除去。辅基(prostheticgroup):与酶蛋白结合较紧。★酶蛋白决定酶专一性,辅助因子决定酶促反应的类型和反应的性质。三、单体酶、寡聚酶、多酶复合体、多酶融合体1、单体酶由一条或多条共价相连的肽链组成的酶分子牛胰RNase124a.a单链鸡卵清溶菌酶129a.a单链胰凝乳蛋白酶三条肽链2、寡聚酶①含相同亚基的寡聚酶:苹果酸脱氢酶(鼠肝)

4、,2个相同的亚基②含不同亚基的寡聚酶:琥珀酸脱氢酶(牛心),αβ2个亚基寡聚酶中亚基的聚合,有的与酶的专一性有关,有的与酶活性中心形成有关,有的与酶的调节性能有关。3、多酶复合体★由两个或两个以上的酶,靠非共价键结合而成,其中每一个酶催化一个反应,所有反应依次进行,构成一个代谢途径或代谢途径的一部分。大肠杆菌丙酮酸脱氢酶复合体由三种酶组成:①丙酮酸脱氢酶(E1)以二聚体存在2×9600②二氢硫辛酸转乙酰基酶(E2)70000③二氢硫辛酸脱氢酶(E3)以二聚体存在2×5600012个E1二聚体24×9600024个E2单体24×700006个E3二聚体12×56000总分子

5、量:560万4、多酶融合体(多功能酶)★一条多肽链上含有两种或两种以上催化活性的酶,往往是基因融合的产物。例如:天冬氨酸激酶I---高丝氨酸脱氢酶I融合体(双功能酶)该酶是四聚体α4,每条肽链含两个活性区域:N-端区域是Asp激酶,C端区域是高Ser脱氢酶四、酶的分类及命名(一)、习惯命名1.依据底物来命名(绝大多数酶):蛋白酶、淀粉酶2.依据催化反应的性质命名:水解酶、转氨酶3结合上述两个原则命名:琥珀酸脱氢酶。4.有时加上酶的来源胃蛋白酶、牛胰凝乳蛋白酶(二)、国际系统命名基本原则:明确标明酶的底物及催化反应的性质(底物为水时可略去不写)。酶国际系统命名法举例谷丙转氨

6、酶的系统名称:丙氨酸:α-酮戊二酸氨基转移酶六、酶的活力测定与分离纯化1、酶活力与酶促反应速度酶活力:在一定条件下,酶催化某一反应的反应速度(一般测初速度)。酶促反应速度:单位时间、单位体积中底物的减少量或产物的增加量。单位:浓度/单位时间研究酶促反应速度,以酶促反应的初速度为准(底物消耗≤5%)。2、酶的活力单位(U)国际单位(IU单位):在最适反应条件下,每分钟催化1µmol底物转化为产物所需的酶量,称一个国际单位(IU),1IU=1µmol/min国际单位(Katal,Kat单位):在在最适反应条件下,每秒钟催化1mol底物转化为产物所需的酶量,称Kat单位1Kat

7、=60*106IU最适条件:最适温度(25℃或37℃,最适pH、最适缓冲液离子强度、最适底物浓度。3、酶的比活力Specificactivity每毫克酶蛋白所具有的酶活力。单位:U/mg蛋白质。酶的比活力是分析酶的含量与纯度的重要指标。一个酶的分离纯化分为4步。步骤1234总活力(U)6432总蛋白质(mg)201052比活力(U/mg)6/204/103/52/2酶的提纯过程中,总蛋白减少,总活力减少,比活力增高。酶的纯化倍数:酶的回收率:×100%4、酶活力的测定方法分光光度法荧光法同位素法电化学法第二部分酶促反应动力学研

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