dpvul46基因转录表达时相和主要抗原域表达抗体制备和夹心elisa检测dpv研究

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5、..删』.肌岬“.・」卜"・』...朋』・第“嘟分文就综述m目的意义仲・•.・川・・・・…川仲・•jn.jii.jiL106駆及購僵测»jii.jii-jih••…丿ii」r删…恥jilj卜ji・・・“.i1鸭瘟概述…〃……………"〃….….12鸭瘟病毒概述・一.・・・川.………•……12.1鸭瘟病毒的分类…-12.2鸭瘟病訓形态特征及形态发生.…••卄•”….…"..，・・・12.3關病•毒駆姗斓述-•“1

6、3搞男多病毒UL46基因及其编码蛋白VP11112的研究进展・・・..・・...23.1縱褊雌“・•“…HI...23.2抱磅病毒基因组结构・・・・・・23.3炮螃病毒形态结构・・"..111::23.4抱磅病毒皮层的结构和组成………33.5蹦磅病儀UL46基因序列的特点….33.6VP11112的细胞定位•……"…43.7VP11112表达时相…43.8VP11112的功能"…••“•…4381VP11112的结构功能和调节功能…4382UL46-UL49基因簇编码蛋白的功能53.9VP11/12与某些酶和其他蛋白的相互作用…川53旦1US3蛋白激酶对于VP11/12表达稳定性的影响

7、53且2UL21对VPll/12组装的影响・・・・・・・...5393VPH112与VP13/14之间的相互作用………63.9.4VPHH2与VP16Z问的相互作用川..63.9.5VPH112和VP13/14对aTIF蛋白的调指作用....・・•6•・•••••••••••••・・•••■・•••••・•••・•••••••••V•II•••••!II•••••»•••••»»>1

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10、••••3.10®-•…4趣郦斂.…….M第工部分试验研究”・・・•.川.・.・・・・••川.第工章鸭瘟病毒UL

11、46基因的分子特性分析..川丿丿川1DPV与其他痛磅病毒的UL4钳基因序矿•…”….“训..…..…•••.川…2生物信息学分析工具•“3方法3.1UL46基因的鉴定83.2核酸斑点杂交试验验证。PV…….……83.2.1UL46基因寡核背酸探针的合成"……〃…………・・...83.2.2核飙点杂交检测・・・..，.，…•“93.2.3核嚴辭将异讎漱…•“・・・…93.3DPVUL46基因的分子特性分析.…….....93.3.1核酸序列生物倍息学分析■-"-10103.3.2氨基酸序列生物信息学分析〃4躲“““••••••••••••104.1基于UL46基因的DNA斑点杂交检测DP

12、V....………〃…_104.2UL46基囚的分子特性分析.104.2.1UL46基因的鉴定……104.2.2DPVUL46核酸序列分析114立2/UU6基因序列的基本特性・・・・.・・・・•・・・・114.2.3DPVUL46®基酸序列分析……"…川…134.2.3.1“““....川・”•川••••••....14…..144.2.3.2信号職测4.2.3.3跨膜区预测"…………154.2.3.4二级结构、B细胞表位预测分析及主要抗原域的确定...154.2.3.5功能位点及功能域的分析4立3.6问源性与系统进化分析……5M5.1基于UL46基因探讨DPV的系统进化・・・・5.2U

13、L46基因的分子特性分析………5.3UL46蛋白抗原表位的分析及截断表达的意义……•・♦♦♦••••••〃16..20..20_20....21......22第三章鸭瘟病毒UL46基因主要抗原城蛋白的原核表达、多克降抗体的制备及初步应用川…•川••川•”…......241材料及仪器设备••::……242方法"・・・"・・・"'if"川…242.1DPV基因组DNA提取••…:42.2PCR扩增DPVUL46和UL46M基因川242.2.1引物设计川..川川.•川..川.………”……一”…二242.2.2UL46和UL46M基因的PCR扩增川…262.3UL46和UL46M基因的下载

14、体克隆与鉴定…..…272,3.1UU6和UL46M基因的U载体克隆272.3.2重组质粒的鉴定272.4UL46和UL46M基因重组表达菌株的构建,・・・・・・...282.4.1感受态细胞的制备及目的片段的回收……••…...…282凡1.1感受态细胞DH5a和Rosetta的制备••…:82.4.1.2pMDI8-T几JL46、pMDI8・T几JL46M及表达质粒pET-32a(+)的提取、晦切与凹收…………282.4.2酶切回收产物pE