尿素检测步骤.doc

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1、尿素检测步骤1.原理：DMBA与尿素反应生成黄色的对二甲胺基甲醛脲，此物质的颜色深度与溶液中尿素含量成正比，因此可以通过测定在一定波长下反应溶液的吸光值来定量溶液中的尿素浓度（该反应需要在酸性条件下进行）。2.试剂：对二甲胺基苯甲醛(ＤＭＡＢ)溶液(浓度0.0975ｍｏｌ/Ｌ):溶解8.0ｇＤＭＡＢ于500ｍＬ无水乙醇中,加50ｍＬ盐酸。3.操作步骤（1）取5mlDMBA溶液加入到25ml比色管中，用水稀释到刻度，做为空白样。（2）尿素含量大于2%的时候，稀释500倍用1ml移液管吸取1ml样品加入到100ml容量瓶中，定容。

2、然后吸取稀释后溶液5ml，加入25ml比色管中，加入5mlDMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min。以空白样做对比，用紫外分光光度计在420nm波长下测定，记录吸光度。（3）尿素含量小于2%的时候，稀释100倍用5ml移液管吸取5ml样品加入到100ml容量瓶中，定容。然后吸取稀释后溶液5ml，加入25ml比色管中，加入5mlDMBA溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置20min。以空白样做对比，用紫外分光光度计在420nm波长下测定，记录吸光度。4.计算标准曲线为：y=0.0013x-0.0068y-吸光度x-尿素浓度

3、（g/L）尿素浓度为：x=y+0.00680.0013×稀释倍数（g/L）