骨髓 骨髓细胞学检查.ppt

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1、第二节骨髓细胞学检查一血细胞生成发育规律正常形态学特征造血干细胞的分化及增殖示意图正常骨髓涂片原粒细胞(myeloblast)早幼粒细胞(promyeloblast)中幼粒及晚幼粒细胞(lategranulocyteprecursors)嗜酸粒细胞(eosinophil)嗜碱粒细胞(basophilprecursors)二.骨髓细胞形态学检查的方法和内容㈠低倍镜检查⒈确定骨髓标本取材和涂片满意?⒉观察骨髓增生度⒊观察巨核细胞数量:低倍镜成熟程度:油镜产血小板功能形态4.异常细胞异常组织细胞转移癌细胞Gaucher细胞Nie

2、mann-Pick细胞骨髓增生程度分级有核细胞:成熟红细胞有核细胞/H常见原因增生极度活跃1:0.5-21:1>100leukemia增生明显活跃1:5-121:1050~100leukemia,增贫增生活跃1:16-321:2020~50正常,各种贫血增生减低1:35-701:505~10CAA增生明显减低1:100-3001:200<5AAA(二)油浸镜检查㈡油镜下检查1.有核细胞计数、分类G:E=2~4:1巨核细胞计数、分类⒉观察细胞形态:异常细胞,寄生虫各系细胞及各发育阶段比例比例各发育阶段比例粒系50%~60%原

3、、早、中1/5,余1/5红系20%原红<1%,早红<5%淋巴系20%以成熟淋巴细胞为主单核<4%成熟单核细胞为主浆细胞<2%成熟阶段为主巨核细胞各系列细胞比例改变临床意义粒红比例粒系红系淋系单核细胞系统浆细胞系统巨核细胞系统㈢BloodSmear⒈白细胞分类计数 ⒉成熟红细胞形态有无异常 ⒊略估血小板形态与数量 ⒋注意有无寄生虫疟原虫填充报告单三.血细胞的细胞化学染色细胞化学染色是以细胞形态学为基础,根据化学反应的原理应用骨髓涂片进行固定,化学反应显色,复染等程序染色光学显微镜下观察㈠过氧化物酶染色(POX)苏丹黑染色(S

4、B)氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D)Peroxidase(POX)急性粒细胞(+)和单核细胞(+/-)、急性淋巴细胞(-)Myeloblast(-)→Promyelocyte/N(+)↑EosinophilstrongpositiveBasophil(-)Monocyte(±)Lymphocyte、erythroid、Megakaryocyte(-)鉴别:急粒、急单和急淋,特别是M3和M5。(二)苏丹黑B染色临床意义同POX(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色NAP正常值阳性率10~40%,积分值40~80临床意义慢粒和

5、类白血病反应急粒、急单和急淋AA和PNH化脓性感染和病毒感染恶性组织细胞病反应性组织细胞增生症(四)酸性磷酸酶染色ACP1。协助诊断HCL。HCL时ACP呈阳性且不被L-酒石酸所抑制。2.协助诊断T和B淋巴细胞。T(+)B(-)3.Gaucher病(+)、Niemann-Pick细胞(-)(五)氯化醋酸AS-D萘酚脂酶染色(AS-DNCE)急性粒细胞白血病(+)急单和急淋(-)(六)α-醋酸萘酚酯酶染色α-NAE主要存在于单核系细胞中临床意义急单+++,但被NaF抑制急粒±,不被NaF抑制(七)糖原染色(PAS)PAS染色

6、反应正常细胞白血病红系(-)(+++)粒系原粒(-)余(+)(-)或(±)淋系(-)或(±)(++)单核系(+)(++)巨核系(++)临床意义LPD;病毒感染正常红白血病+++;MA正常急粒-;急淋+,颗粒状或块状;急单+++,弥漫性成熟巨核+++(八)铁染色1.细胞外铁2.细胞内铁意义:1.缺铁性贫血:细胞外铁(-).2.非缺铁性贫血:胞外铁增多3.铁粒幼细胞贫血:环状铁粒幼细胞15%以上㈤铁染色细胞外铁细胞内铁几种常见急性白血病的细胞化学染色结果急淋急粒急单红白血病POX–+~+++--+视合并的白细胞类似而定SB–+

7、+~++++~–同上AS-DNCE-++~++++~–同上α-NAE––~++++~+++同上α-NAE+NaF–不被NaF抑制能被NaF抑制同上NAP增加减少正常或增加同上PAS+,粗–或+,弥漫–或+,弥漫性+++颗粒状性淡红色淡红色或细颗或块状粒状四免疫分型一检测方法:1.免疫荧光法2.免疫酶染法识别不同系列细胞(二)细胞免疫分型的临床应用识别不同系列细胞识别不同淋巴细胞检测T细胞亚群识别不同分化阶段细胞识别不同功能状态细胞对不同系列和分化阶段细胞进行分离研究白血病细胞免疫表型研究白血病微小残留病的检测急性白血病免疫

8、表型特点B淋巴细胞:cCD22,cCD79,CD10,CD19T淋巴细胞:CD2,Ccd3,CD4,CD7,CD8髓系:MPO,cCD13,CD14,CD15,CD33,CD65(三)急性白血病的免疫分型1.ALL与AML细胞免疫表型的特点:CD19CD7CD33CD13HLA-DRTDTB-ALL+-

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