MicroRNA-16逆转上皮性卵巢癌耐药的动物实验研究.pdf

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1、现代妇产科进展2012年10月第21卷第10期ProgObstetGynecol,Oct.2012,Vo1.21,No.10·论著·MicroRNA一16逆转上皮性卵巢癌耐药的动物实验研究韩汶君,崔竹梅,唐蕊,于沙沙,娄艳辉,高慧(1.青岛大学医学院附属医院妇科,青岛266003;2.烟台毓璜顶医院,烟台264000)【摘要】目的:研究微小RNA-16(miR一16)对人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤耐药性的逆转作用,并初步探讨其逆转作用机制。方法:24只BALB/c裸鼠,随机分为四组,每组6只:I组给予皮下接种卵巢癌SKOV3细胞株,成瘤后应用顺铂治疗;

2、Ⅱ组皮下接种卵巢癌SKOV3/DDP顺铂耐药细胞株,成瘤后给予顺铂治疗;m组皮下接种卵巢癌SK.OV3/DDP顺铂耐药细胞株,成瘤后给予顺铂与miR.16阴性对照试剂(miR一16Negative)协同治疗;IV组接种卵巢癌SKOV3/DDP顺铂耐药细胞株,成瘤后给予顺铂与miR.16化学修饰模拟物(miR.16Agomir)协同治疗。观察比较四组皮下肿瘤生长情况,种瘤后第35天处死裸鼠,称取肿瘤组织质量,逆转录一聚合酶链反应(RT.PCR)方法检测肿瘤组织中bcl一2mRNA表达,免疫组化方法检测各组肿瘤组织中bc1.2蛋白表达。结果:顺铂与miR一

3、16Agomir协同治疗组裸鼠皮下肿瘤生长受到明显抑制,其肿瘤组织中bc1-2mRNA表达水平较其余各组降低,差异具有显著性(P<0.05),其bc1.2蛋白表达亦明显低于其余各组(P<0.05)。结论:miRNA-16可能通过对其靶基因bcl一2的反向调控作用,逆转裸鼠卵巢癌皮下移植瘤顺铂耐药性。【关键词】微小RNAs;卵巢肿瘤;基因,bcl-2;小鼠;移植;基因疗法;顺铂中图分类号:R737.31文献标志码:A文章编号:1004—7379(2012)10—0752—04Reversalofcisplatin-resistanceinhumanova

4、riancancerxenograflmodelbymicroRNA·-16innudemice.HanWenjun,CuiZhumei,Rui,eta1.DepartmentofGynecology,theAf-filiatedHospitalofMedicalCollege,QingdaoUnive~ity,Qingdao266003【Abstract】Objective:Toinvestigatethereversalofcisplatinresistanceofhumanovari—ancancerxenograftinnudemicebymi

5、croRNA一16andexploreitsreversalmechanism.Meth.ods:24BALB/Cnudemicewererandomlydividedintofourgroups;themiceinonegroupwereiniectedsubcutaneouslvwithhumanovariancancercells(SK0V3)inthefightflank,thenweretreatedwithcisplatin:miceintheotherthreegroupswerei-iectedsubcutaneouslvwithhum

6、ancisplatin—resistantovariancancercells(SK0V3/DDP),thenwererespectivelytreatedwithcis.platin;cisplatinandmiR一16negative;cisplatinandCholesterol—conjugatedmiR-16mimics(miR.16Agomir).Thetumorvolumesweremeasuredtwiceaweek.Tumorswereremoved35daysafterinoculation.ThemRNAlevelofbc1.2i

7、ntumorswasanalyzedbyreversetranscriptionPCRandtheexpressionofbc1.2proteinwasanalyzedbyIHC.Results:TherewasasignificantgrowthinhibitoryrateincisplatinandmiR.16Agomircombinationtreatmentgroup,andtheex.pressionofbc1.2mRNAinthisgroupwaslowerthanthoseintheothergroups(P<0.05).IHCanaly

8、sisshowedthattheexpressionofbcl一2proteinincispl

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