魏氏梭菌及其主要毒素的研究进展.ppt

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1、魏氏梭菌及其主要毒素的研究进展报告内容魏氏梭菌概述魏氏梭菌毒素研究综述分型及其依据魏氏梭菌产生的毒素四种主要毒素研究进展纯化及鉴定细菌毒力综述革兰氏阳性有荚膜不运动的厌氧大杆菌，芽孢椭圆形,位于菌体中央或次极端，芽胞直径不大于菌体，在一般培养时不易形成芽胞，在无糖培养基中有利于形成芽胞（菌体形态）广泛分布于自然界，同时也是肠道中的常见菌之一，在一定条件下，可引起各种严重疾病发病急、死亡快，因此对于本病的防制主要用疫苗进行免疫预防危害：猝死症，家禽坏死性肠炎，人食物中毒及气性坏疽；家畜肠毒血症、坏死性肠炎，痢疾培养特性本菌虽属厌氧性细菌，但对厌氧程度的要求并不太严，2%~10%的CO2

2、条件下，生长更好在普通培养基上能生长，若加葡萄糖，血液，则生长更好生长适宜温度为37-47℃，多认为43-47℃为最宜温度，在适宜条件下增代时间仅8min培养特性血平板：双层溶血环内环完全溶血-θ毒素外环不完全溶血-α毒素蛋黄琼脂平板：Nagler反应庖肉培养基：数小时即可见到生长，产生大量气体，肉渣或肉块变为略带粉色，但不被消化牛乳培养基：“汹涌发酵”（stormyfermentation）分型及其依据根据此菌产生外毒素的种类，可将其分为A、B、C、D和E5个型A型菌：αB型菌：αβεC型菌：αβD型菌：αεE型：αι魏氏梭菌与相应疾病其中，A型菌主要引起人的气性坏疽和食物中毒，也

3、可引起动物的气性坏疽，牛、绵羊、家兔肠毒血症B型菌主要引起羔羊痢疾；C型菌主要是牛、猪肠毒血症、羊猝狙D型菌引起羔羊、绵羊、山羊、牛以及灰鼠的肠毒血症；E型菌可致犊牛、羔羊肠毒血症，但很少发生。气性坏疽发病急剧，后果严重，需要尽早准确的做出微生物学诊断，争取早期治疗：标本镜检：可发现G＋大杆菌，并伴有其他杂菌和少量形态不规则的白细胞。培养基厌氧培养进一步鉴定:牛乳培养基生化反应：TSC动物实验：泡沫肝实验分离诊断纯化液体培养基65-70°C半小时43°温箱培养3-4小时连续传代镜检TSC.石蕊牛奶血平板侵袭力：病原菌有突破宿主皮肤、黏膜生理屏障等免疫防御机制，进入体内定居、繁殖

4、和扩散的能力，包括荚膜、粘附素和侵袭性物质。毒素：含有损害宿主组织、器官并引起生理功能紊乱的大分子成分。毒力细菌的毒力荚膜、微荚膜。黏附素：细菌表面的蛋白质。菌毛分泌物　　　　　　细菌的表面组分：如磷壁酸。2、侵袭性物质：协助病菌抗吞噬或向四周扩散。如致病性葡萄球菌凝固酶、A群链球菌透明质酸酶、链激酶等从而有利于细菌在组织中扩散。㈠侵袭力1、菌体的表面结构细菌在生长繁殖中产生和释放的毒性成分，可直接或间接损伤宿主细胞、组织和器官，干扰其生理功能。外毒素内毒素（二）毒素内毒素毒性作用(A)热源性(C)内毒素血症和休克(D)弥漫性血管内凝血（DIC）(B)白细胞数目改变区别要点外毒

5、素内毒素存在部位由活的细菌释放至细菌体外为细菌细胞壁结构成份，菌体崩解后释出细菌种类革兰阳性菌多见革兰阴性菌多见化学组成蛋白质脂多糖稳定性60℃～80℃30min破坏耐热，160℃2h～4h破坏毒性作用强，有选择毒害作用，引起特殊临床表现稍弱，各种细菌内毒素的毒性作用大致相同。抗原性强，可刺激机体产生高效价的抗毒素。经甲醛脱毒成为类毒素，仍有较强的抗原性，可用于人工自动免疫刺激机体对多糖成份产生抗体，不形成抗毒素，不能经甲醛处理成为类毒素疫苗现状梭菌类的疫苗有单价苗和多联苗，单价疫苗在实际应用中难以取得很好的效果，原因是致病的梭菌种类较多，而且有的是混合感染，单价苗往往是顾此失彼，不

6、能有效地预防疾病。国外相继出现了包括产气荚膜梭菌的四联、五联、七联和八联苗梭菌苗，不仅把梭菌苗联合起来，而且还把所梭菌苗与需氧菌苗(如巴氏杆菌苗、沙门氏杆菌苗)联合起来，甚至与病毒苗(如羊痘疫苗)联合起来进行防疫。疫苗现状国内首先出现的是羔羊痢疾，肠毒血症等单价苗，继之出现了羊猝狙、快疫二联苗，羊黑疫、快疫二联苗，快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联苗。文希喆等(1978)研制成功了快疫、羔羊痢疾、碎狙、肠毒血症、黑疫五联苗。纪金春等(1978)研制成功了快疫、羔羊痢疾、猝狙、肠毒血症、黑疫和肉毒中毒六联苗。疫苗现状上世纪70年代到80年代，中监所的文希喆、王泰健、屠伟英等科研人员，在国际上

7、率先开创了梭菌多联干粉苗的研究，取得满意效果，保存期长，使用方便，可以随意搭配，疫苗的保护期也得到的延长，基本克服了液体苗的缺陷。效力检验：多联苗所含的成份越多，需要的动物也越多，以致于达到不便检验的程度，严重阻碍了多联苗的发展，采用免疫动物测定血清中和效价的方法，来评价梭菌苗的效力。其方法是用梭菌苗免疫动物两次后，用国际单位(I.U.)衡量血清的中和效价，检验每批疫苗所需试验动物为8-12只。免疫效果与制苗菌液中毒素毒力正相关抗原含量过大会产生严重局部反