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1、滋阴补肾丸对广防己减毒作用的初步研究的论文作者:孙芸 冯高平 毛晓春 陈琳熹【摘要】:目的通过研究滋阴补肾丸对广防己中马兜铃酸a含量的影响,探讨广防己的解毒问题。方法广防己与滋阴补肾丸共煎后,采用rp-hplc法测定马兜铃酸a的吸收值,观测其含量的变化情况。结果加入滋阴补肾丸后,广防己中马兜铃酸a的含量明显降低。结论滋阴补肾丸可显著降低广防己中马兜铃酸a的含量。【关键词】滋阴补肾丸 广防己 马兜铃酸a 减毒作用abstract:objectivetostudytheeffectsofziyinbushenpillonaristolochiaacidainaristolochia
2、fangchi,andpreliminarystudyonreducingpoisonouseffectsofziyinbushenpilltoaristolochiafangchi.methodsabsorptionofaristolochhiaacidainthemingleddecoctionofaristolochiafangchiandziyinbushenpillbyhplc,andthechangeofaristolochiaacidaarkedlydecreasedafterziyinbushenpillarkedlydecreasedaristolochhia
3、acidacontentofaristolochiafangchi. key为了研究滋阴补肾丸对广防己的减毒作用及机理,我们设计了以下实验。 1实验材料 1.1仪器 日立l6000型高效液相色谱系统,包括l-4200huv-visdetectord-2500型色谱数据处理仪。ma240d电子分析天平,上海第二天平仪厂。gq7oe-5型红外快速干燥箱,上海市吴淞五金厂。数显恒温水浴锅,金坛市大地自动化仪器厂。 1.2药物 广防己,为马兜铃科植物广防己aristolochifangchiy.的干燥根,购自中国药品生物制品检定所,批号919-9001。滋阴补肾丸(浓缩丸),甘肃
4、省河西制药有限公司生产,批号060601。 1.3试剂 马兜铃酸a对照品(aristolochicacida,以下简称aa-ⅰ),由中国药品生物制品检定所提供,批号110746-200406。甲醇、乙腈为色谱纯,山东省禹王实业总公司禹王化工厂产品;无水乙醇、冰醋酸为分析醇,购于安徽医药公司。水为纯化水。 1.4色谱条件 色谱柱:依利特hypersilods25(4.6mm×250mm),柱号为e:1417177;流速:1ml/min;柱温:室温;检测波长:250nm;进样量:10μl;流动相:乙腈-(水+冰醋酸)=48∶52,其中,水-冰醋酸=62.5∶1。理论塔板数不
5、低于2000。 2方法与结果 2.1标准溶液的制备 称取aa-ⅰ对照品7mg,置于50ml量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓度为0.14mg/ml的对照品储备液。精密量取对照品储备液2.0ml于10ml量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,摇匀,即得浓度为0.028mg/ml的aa-ⅰ对照品溶液。 2.2供试液的制备 2.2.1广防己样品溶液的制备 精密称取广防己样品0.6g,置于200ml烧杯中,加120ml自来水,煎煮30min,过滤,收集滤液,残渣加80ml自来水,煎煮30min,过滤,收集滤液,合并两次滤液,置于水浴上,浓缩至干。用适量的无水乙醇溶解并完
6、全转移至10ml的量瓶中,加无水乙醇至刻度,摇匀。放入冰箱冷藏,静置过夜。抽取上清液,过滤,弃去初滤液,收集续滤液,放入1ml塑料离心管中,作为供试液1。 2.2.2广防己与滋阴补肾丸供试液的制备 分别取广防己样品、滋阴补肾丸粉末少许,各精密称取0.6g,置于200ml烧杯中,混合两种药物,加入120ml自来水,按“2.2.1”项下制备广防己样品溶液的方法进行操作,其制备液作为供试液2。 2.3马兜铃酸a对照品的定性分析 分别吸取供试液1和对照品溶液,注入液相色谱仪,按“1.4”项下色谱条件,测绘其色谱图。色谱图见图1。 2.4标准曲线的制备 精密吸取对照品储备液1、
7、2、3、4、5、6ml,分别置10ml的量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度。按“1.4”项下的色谱条件,依次进样测定,测得aa-ⅰ的峰面积。以aa-ⅰ的进样量(μg)为横坐标,以对应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。由标准曲线可知,在0.08~0.40μg之间,进样量与峰面积之间呈良好的线性关系,回归方程为:y=1.7×105x+5248,r=0.9999。 2.5精密度试验 精密吸取对照品溶液10μl,按“1.4”项下的色谱条件,注入液相色谱仪,测定对照品溶液的峰面积,平行测定5次。结果rsd=