低剂量伊曲康唑间歇冲击疗法治疗甲真菌病x

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1、差别聚介酶链反应定量检测艾滋病患者外周血前病毒DNA水平差別聚合酶链反应定量检测艾滋病患者外周血前病毒DNA水平屮华皮肤科杂志1998年第3期笫31卷论著作者：范雪莉徐文严范江李了仁闫小君陈若延关键词：聚合酚链反应；差别；艾滋病；前病毒【摘要】目的为了评价艾滋病的治疗效果、筛选有效治疗药物，了解患者体内病情变化，常常需要对治疗前后患者体内病毒水平进行客观的定So方法采用差别聚合酶链反应，共同扩增待测靶基因HIVJgag和参照模板P-globin基因，建立起检测HIV-1复制水平的定量方法，并对8例艾滋病患者外周血前病毒DNA含量进行定量。结果8例患者的前病毒DNA水平介于0.508〜2

2、.210拷贝数/吒DNA之间，其复制和整合水平存在差异。结论该方法具有快速、可靠、重复性好等优点，非常适合于典型的临床标本的检测，为艾滋病疗效判定提供客观依据。DifferentialPolymeraseChainReactionforQuantitationofHIVDNAinPeripheraIBloodMononuclearCellofAIDSPatientsFanXueli,XuWenyan,FanJiang,etal」nstituteofDermatology,ChineseAcademyofMedicalSciences,PekingUnionMedicalCollege,

3、Nanjing210042【Abstract］ObjectiveInordertoevaluatethetherapeuticeffeet,toscreeneffectivedrugsforAIDS,andtofindoutthechangesofpatient'scondition,itisnecessarytodevelopanobjectivemethodtoquantitatetheIevelsofviralloadofthepatientsbeforeandaftertreatment.MethodDifferentialPCR(D-PCR)wasusedtoco-ampli

4、fythetargetHIV-1gaggeneandrefereneetemplate0-globingene,soastodeterminethelevelofHIVreplicationquantitatively.ThelevelsofHIVDNAintheperipheralbloodmononuclearcellsof8patientswithAIDSweredeterminedquantitatively.ResultsThelevelsoftheprovirusofthe8patientsrangedfrom0.508-2.210copies/ugDNA,therewer

5、edifferencesinthelevelsofreplicationandintegration•ConclusionItistheauthorsropinionthatthismethodiseasytocontrolwithanadvantageofreliability,quicknessandreproducibility,Itissuitabletomeasureclinicalspecimens,andprovidesanobjectiveevideneefortheevaluationofresponsestotherapeuticintervention.【Keyw

6、ords】PC^differentialAIDSProvirus在探索控制艾滋病的约物及各种防治途径的过程中，为了解病情变化，评价治疗效果，常常需耍对治疗前示患者体内病毒水平或核酸复制状态进行客观地定量。常用的方法包括Southern>Northern卬迹和点卬迹杂交，但这些方法由于敏感性低而不能检出基因剂虽的微小差别［1］。聚合酶链反应(PCR)克服了上述缺点，可以分析极微量的DNA,并可同时扩增多种序列，并发展成为一种理想的核酸定量方法。我们在普通PCR的基础上，在同一反应体系中共同扩增HIV-1靶基因和参照模板，建立起差别PCR(DifferentialPCR,D-PCR)方法用

7、以检测艾滋病患者外周血单一核细胞(PBMC)中前病毒DNA水平。材料和方法（一）标本：患者外周血标本共8份采集于北京等作者单位：210042南京，中国庚学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究所［范雪莉（现在第四军医大学西京医院皮肤科）、徐文严、范江、李子仁、陈若延］;全军基因诊断技术应用研究所（闫小君）地，其中7例为艾滋病患者，1例为HIVJ感染者，均经初筛试验和确证试验证实其抗HIV-1抗体阳性。所有标木均在P3实验室处理提取DNA后运输。（二