RNAi和GroEL介导的双价转基因番茄对TYLCV的抗性

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1、江苏农业学报(JiangsuJ.ofAgr.Sci.),2014,30(5):1102~11081102http://www.jsnyxb.com杨玛丽,张保龙,郭佳茹,等.RNAi和GroEL介导的双价转基因番茄对TYLCV的抗性[J].江苏农业学报,2014,30(5):1102鄄1108.doi:10.3969/j.issn.1000鄄4440.2014.05.027RNAi和GroEL介导的双价转基因番茄对TYLCV的抗性1221111杨玛丽,摇张保龙,摇郭佳茹,摇赵统敏,摇余文贵,摇赵丽萍,摇王银

2、磊(1.江苏省农业科学院蔬菜研究所,江苏南京210014;2.江苏省农业科学院农业生物技术研究所,江苏南京210014)摇摇摘要:摇本研究将已构建的SUC2鄄GroEL和pBI121鄄AC1鄄AC2植物表达载体共转化番茄,共获得19株卡那霉素抗性再生植株。经过PCR和RT鄄PCR检测,初步获得转SUC2鄄GroEL载体的阳性植株5株,转pBI121鄄AC1鄄AC2载体的阳性植株3株以及转SUC2鄄GroEL/pBI121鄄AC1鄄AC2双载体的阳性植株2株。利用TYLCV侵染性克隆农杆菌注射接种法对T代转基

3、因阳性植株进行抗性鉴定,获得抗TYLCV的转基因植株7株。对T代未扩出病毒条带的T001代植株进行抗性鉴定,结果发现转SUC2鄄GroEL、pBI121鄄AC1鄄AC2、SUC2鄄GroEL/pBI121鄄AC1鄄AC2不同载体的株系植株中平均带毒率依次是35%、25%和15%,推断转双基因的植株的抗病能力优于转单个基因植株的抗病能力。关键词:摇番茄黄化曲叶病毒;RNAi;GroEL;共转化;转基因番茄+中图分类号:摇S436.412.17摇摇摇文献标识码:摇A摇摇摇文章编号:摇1000鄄4440(2014

4、)05鄄1102鄄07RNAiandGroELmediatedresistancetotomatoyellowleafcurlvirus(TYLCV)intomato122111YANGMa鄄li,摇ZHANGBao鄄long,摇GUOJia鄄ru,摇ZHAOTong鄄min,摇YUWen鄄gui,摇ZHAOLi鄄ping,摇1WANGYin鄄lei(1.InstituteofVegetableCrops,JiangsuAcademyofAgriculturalSciences,Nanjing210014,

5、China;2.InstituteofAgro鄄biotechnology,JiangsuAcademyofAgriculturalSciences,Nanjing210014,China)摇摇Abstract:摇Tomatoyellowleafcurlvirus(TYLCV)isoneofthemostdevastatingvirusesofcultivatedtomatoesintheworld.Recently,thediseaseoccurredsuddenlyinChina,spreadingto

6、wardsnorthfromsouth,whichhasresultedingreateconomiclosses.ThelackofresistanceresourcelimitstheTYLCVresistancebreeding.Inordertogenerateengineeredre鄄sistance,theplantexpressionvectorsSUC2鄄GroELandpBI121鄄AC1鄄AC2wereco鄄transformedintotomatobyagrobacterium鄄med

7、iatedgenetictransformationmethod,andnineteenkanamycinresistantregeneratedtomatoplantswereobtained,inclu鄄dingfiveplantsofSUC2鄄GroELvector,threeplantsofpBI121鄄AC1鄄AC2vectorandthreeplantsofdoublevectorsconfirmedbyPCRandRT鄄PCR.Tgenerationofthetransgenicplantsw

8、ereinoculatedwithTYLCV,anditturnedout8wereTYLCV0resistant.ThecarryingratesofTYLCVbyTgeneration1收稿日期:2014鄄05鄄08achievedviavectorsSUC2鄄GroEL,pBI121鄄AC1鄄AC2,and基金项目:江苏省自然科学基金项目(BK2011676);江苏省农业科技SUC2鄄GroEL/pBI12

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