肾素检测的最新发展情况ppt课件

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1、肾素检测的最新发展情况几个问题为什么传统上肾素检测活性？为什么现在肾素要变为测浓度？肾素前体由406个氨基酸组成，其中包含两个前片段，分别为20和46个氨基酸。成熟的肾素包含340个氨基酸，分子量为37KD。肾素肾素原，肾素与活性肾素的异同肾素活性与活性肾素的区别活性肾素在体内的意义肾素检测的几个基本概念无活性的肾素原有活性的肾素原肾素肾素原活性肾素传统肾素检测试剂——肾素活性检测试剂盒组分：抗AngI多抗包被管125I标记的AngI校准品（6个）质控品酶抑制剂洗液检测步骤AngI转化将预冷的200ul酶抑制剂加入200ul血浆样本中，混合均匀后，分为两份，分别置于冰水浴和37度中孵育1

2、小时，孵育后将37度的样本置于冰水浴中迅速冷却备用。放免竞争法检测AngI加样孵育检测在多抗包被管中加入：校准品、质控品、待测样本各50ul。加入125I标记的AngI200ul。充分混匀室温(18-25°C)振荡孵育2小时将包被管用洗液洗两次后，检测。根据标准曲线计算出样本中的AngI浓度结果转换肾素检测-PRAvsPRC肾素检测-PRAvsPRC血管紧张素原肾素血管紧张素I降解片段血管紧张素II血管紧张素原酶微生物污染血管紧张素转化酶目前PRA检测存在的问题各实验室之间差异较大，无法标准化操作复杂，重复性差，结果无互通性除此之外无国际标准品可参照体外的孵育条件和体内状态差异较大加入酶

3、抑制剂放置血管紧张素I降解肾素检测-PRAvsPRCPRA带给临床最大的困扰重复性差周期长依赖外送如何做到活性肾素的检测？关键在于那一个关键的抗体。关键抗体一般的肾素抗体肾素检测-PRAvsPRC肾素检测-PRAvsPRCPerscheletal.ClinChem.2004美国内分泌学会原醛症指南该指南同时推荐了肾素活性和浓度应用于ARR实验，同时给出了基于美国人群的不同方法学ARR的cut-off值美国Quest实验室集团肾素浓度检测（Renin,Direct），使用化学发光法检测浓度，当天反馈结果，85%。肾素活性检测放弃了RIA法，改用LC-MS法，一周后出结果，15%。美国目前肾

4、素检测的应用安图PRC和Aldosterone诊断效力研究中山大学附属第一医院--曹教授放免RIA与化学发光CLIA测醛固酮浓度呈正相关（r=0.967）放免RIA肾素活性与化学发光CLIA肾素浓度呈正相关（r=0.905）放免RIA法醛固酮肾素活性比值ARR以30为切点，灵敏度为90.2%，特异度为92.6%；化学发光CLIA法醛固酮肾素浓度比值AARR以25为切点，灵敏度为95.1%，特异度为83.3%；两种方法检测结果计算所得醛固酮/肾素比值的ROC曲线下面积分别为0.94和0.92，ROC曲线下面积比较差异无统计学意义（P=0.52）。已开展PRC的医院北大人民北京阜外北京同仁上

5、海中山上海华山上海曙光中山一、二、三附院广医三附院山东省立中南湘雅四川省医郑大一附院武汉同济