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时间:2019-07-17
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1、免疫比浊分析目的:掌握免疫透射比浊的原理、基本操作方法及其在临床上的应用。原理抗原浓度与浊度的关系:ΔAΔA0Cc0试剂与器材1.待检人血清2.人IgG标准液(6g/L、12g/L、20g/L、30g/L)3.羊抗人IgG诊断血清4.缓冲液(含PEG)5.加样器、试管、水浴箱、分光光度计等操作方法1.生理盐水稀释待测样本和标准液(1:10)?2.按下表操作加入物空白管(μl)标准管(μl)样品管(μl)缓冲液225022502250生理盐水30————标准品(稀释后?)——30——待测样本(稀释后?)————30混匀,37℃5min,600nm,空白管调零,读取各管吸光度值
2、A1抗IgG750750750混匀,37℃孵育5min后,在波长为600nm处测定,以空白管调零,读取各管吸光度值A2,ΔA=A2-A1结果计算以标准品各管的ΔA为横坐标,以对应标准品浓度为纵坐标,绘制标准曲线。依据样品管的ΔA在标准曲线上查出待测浓度。注意事项1.待检血清无溶血,稀释时必须准确。2.检测时反应体系保持抗体过量。3.当IgG浓度超过30g/L时,应将样品用生理盐水稀释后再测定,测得的结果乘以稀释倍数。4.检测用抗体应亲和力高,特异性好,R型抗体。5.试剂中含有叠氮钠,操作时注意不要接触皮肤或粘膜。
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