人教版教学课件1.1dna的基本工具

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1、基因工程的产物基因工程专题11、概念:基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或DNA拼接技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取(复制)出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传特性。一、基因工程的概念基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外DNADNA分子水平人类需要的基因产物剪切→拼接→导入→表

2、达基因重组基因工程的概念二、DNA重组技术的基本工具“分子手术刀”──限制性核酸内切酶“分子缝合针”──DNA连接酶“分子运输车”（运载体）──基因进入受体细胞的载体识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开.（特异性）原核生物（微生物）4000种。1、来源：3、种类：4、作用：5、结果：形成两种末端三、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶粘性末端平末端6、例子：EcoRΙ（大肠杆菌限制酶）、SmaΙ2、特点：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并且能在特定的切点上切割DNA分子(酶的专一性)大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ

3、)能识别GAATTC序列，并在G和A或A与G之间切开。SmaI识别CCCGGG序列,并在C和G或G与C之间切开。限制酶限制酶什么叫黏性末端？什么叫平末端？当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。寻根问底P4你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是是什么吗？防止外来病原物的侵害。当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。[课堂反聩]下图示限制酶切割DNA分子的过程：从图中可知，该限制酶能识别的酶基序列及切点是（）A、CT

4、TAAG，切点在C和T之间B、CTTAAG，切点在G和A之间C、GAATTC，切点在G和A之间D、GAATTC，切点在C和T之间C四、“分子缝合针”——DNA连接酶1、种类：2、作用部位：两类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶磷酸二酯键作用:将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,这样一个重组的DNA分子就形成了。可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，E·coliDNA连接酶　　　　　　　　或T4DNA连接酶即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键T4DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低T4DNA连接酶DNA聚合

5、酶DNA连接酶区别1区别2相同点寻根问底DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?1)只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键2)以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链2)将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板Goon据右图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（　）A.限制性内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处B.DNA聚合酶可以连接a处C.解旋酶可以使b处解开D.连接C处的酶可以为DNA连接酶D五、“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体⒈运载体需具备的四个

6、条件：⑴有1~多个不同的限制酶切点⑵对受体细胞无害⑶自我复制⑷具有某些标记基因，便于筛选⒉常用运载体：⑴质粒⑵λ噬菌体衍生物（3）动植物病毒常用的运载体：质粒能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在，可用含氨苄青霉素的培养基鉴别3、质粒的特点:质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子4、是不是所有的质粒都可以用作运载体？不是。天然的质粒不能用作运载体,作为运载体都是人工改造过的.随堂练习：1、关于限制酶的说法中，正确的是（）A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键C

7、．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD．限制酶只存在于原核生物中答案：C2.（多选）有关基因工程的叙述中，错误的是A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种B、重组DNA的形成在细胞内完成C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、质粒都可作为运载体答案：BD3.下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是A．①②B．②③C．③④D．②④答案：D2和7能连接形成…ACGT……TGCA…；4和8能连接形成…GAATTC……CTTAAG…；3和6能连接形成