《仪器法血细胞检查》ppt课件

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1、仪器法血细胞检查授课内容概述仪器法测定原理方法学评价分析仪应用进展先进技术预览概述1.手工法:原理简单、方便实用,但是比较费时费力、影响因素较多。2.仪器法:灵敏度高、技术先进、信息含量大、容易标准化,规范化。1).电阻式2).光学式3).离心式仪器法测定原理电阻式仪器法测定原理及临床意义光学式仪器法测定原理离心式仪器法测定原理电阻式仪器法测定原理及意义一.白细胞分析原理二.红细胞分析原理三.血小板分析原理四.分析仪检测参数及临床意义(一).细胞直方图的应用(二).RDW的临床意义(三).血小板参数的临床意义1.电阻抗法血细胞分析仪基本结构示意图2.

2、W.H.Coulter原理:根据血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮的白细胞,在通过计数小孔时引起的电阻变化,而进行血细胞的计数和体积测定。3.根据检测项目的不同设定小孔直径的不同。4.根据细胞大小的不同,所形成的脉冲信号强弱不同。白细胞体积的大小经过溶血剂的处理后,形成大小不等的颗粒。小细胞区主要是淋巴细胞;中间细胞区主要是M、E、B等;大细胞区主要是中性粒细胞。WBCAnalyzer5.血细胞的脉冲信号经过放大、甄别、整形后,送入计数系统,得出计数结果。(细胞分布直方图)图1-2白细胞体积分布直方图小细胞中间细胞大细胞flRELNOR1R2R3

3、R4WBC1.红细胞计数(RBC)和红细胞比积(Hct)1)RBC原理(脉冲数的多少)2)Hct/PCV原理(脉冲的高度与叠加)3)白细胞数的干扰4)红细胞体积分布直方图2.血红蛋白(Hb)含量测定1)原理:血液+稀释剂+溶血剂Hb+溶血剂血红蛋白衍生物(HiCN,SLS-Hb…)Hb检测系统2)溶血剂配方不同所形成的Hb衍生物也不同3)ICSH推荐HiCN法为仪器校正的标准方法4)HiCN最大吸收在540nm,含毒性。100200flRBCRBC溶解RBCAnalyzer3.各项红细胞指数检测原理1)MCV,MCH,MCHC计算原理同手工法2)RD

4、W(红细胞体积分布宽度)RDW-反映外周血液红细胞体积异质性的参数,或是反映外周血红细胞体积大小不等的客观指标。3)RDW的表示方法RDW-CVRDW-SDL1L2X轴上的68.28%(可信区间)RDW-CV100%20%RDW-SD1.与RBC共一系统,不同的域值(2~30fl)为PLT1)脉冲多少——PLT2)脉冲大小——MPV2.专门设置:鞘流技术、浮动界标、拟合曲线等血小板准确性技术。102030flPLTPLTAnalyzer(一).细胞直方图的应用1.WBC直方图/及“分类”计数1)初步估计细胞群体的变化2)技术因素或病理变化100200

5、300400flfl1002003004002.RBC体积直方图要注意观察图形峰的位置、峰底的宽度、峰顶的形状及有无双峰现象。1)缺铁性贫血2)轻型β-Hb合成障碍3)铁粒幼细胞性贫血4)叶酸缺乏的巨幼细胞性贫血5)其他100200fl3.血小板直方图当血小板计数和血小板体积直方图呈现异常现象时,均应检查血液是否有血小板凝聚和微小血块,必要时作血涂片检查,观察是否有小红细胞、红细胞碎片或大血小板增多现象。102030fl(二).RDW的临床意义1.鉴别缺铁性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血1)共同点:小细胞性贫血,峰左移。2)鉴别点:a.RDW增高,峰

6、底宽b.RDW正常,峰底窄2.诊断缺铁性贫血为小细胞低色素性贫血,伴有RDW异常增高者(RDW正常可排除)3.进行贫血的新的形态学分类(MCV/RDW)a大细胞不均一性正细胞不均一性小细胞不均一性异常大细胞均一性正细胞均一性小细胞均一性正常RDW增高正常减低MCVbNfl1002001.PLT正常参考范围(100~300)×109/L2.MPV的变化:1)鉴别血小板减少①PLT↓而MPV↑:Pt破坏增多(如DIC、ITP等)②PLT↓而MPV↓:M增生不良、AIDS、M纤维化、再障、M瘤、白血病化疗、败血症等2)鉴别血小板增高①PLT↑而MPV↑:反

7、应性Pt增多症,失血等。②PLT↑而MPV正常:M增生性疾病,如PLT增多症。3)其他①PLT正常而MPV↑:慢性M性白血病、脾切等②因MPV先于PLT变化,MPV可用于观察病情变化,如MPV↑表示BM恢复,局部炎症MPV正常,败血症MPV升高。③对于出血倾向评估:MPV与出血倾向呈负相关。(三).血小板参数的临床意义光学式仪器法测定原理2.根据每个细胞所产生的散射角度判断细胞的体积和形态特征进行白细胞分类。一.原理示意图:二.原理:1.又称光散射式计数法。由细胞悬液中的血细胞通过流通检测器阻断一次光束,细胞不断阻断光束使检测器在单位时间内检出光束

8、阻断的次数,从而计算出细胞数。离心式仪器法测定原理一.原理:(干式细胞计数仪)血液+AC荧光染色剂离心红细胞

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