QTOF质谱材料培训

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1、内部资料经验交流仅供参考仪器原理介绍电喷雾电离源（ESI）套管的清洗、维护（如果需要可以演示操作）电喷雾电离源是一种软电离方式，即便是分子量大，稳定性差的化合物，也不会在电离过程中发生分解，它适合于分析极性强的大分子有机化合物，如蛋白质、肽、糖等。（对于非极性、挥发性的待测化合物，则不使用。）电喷雾电离源的最大特点是容易形成多电荷离子。这样，一个分子量为10000Da的分子若带有10个电荷，则其质荷比只有1000Da，进入了一般质谱仪可以分析的范围之内。根据这一特点，目前采用电喷雾电离，可以测量分子量在300000Da以上的蛋白质。（因此由ESI电离源电离的质谱仪在

2、测量的分子量范围上，理论无上限，只需要调节条件，让其带上更多的电荷即可。）电离源几个参数的意义1、毛细管电压（3KV~8KV）控制合适的电压，以便对于待测化合物有更好的电离度并且在这个条件下不会发生电化学反应，从而降低待测物质的信号。在负离子模式下，由于电压过高，电离源尖端会出现紫色的尖端放电现象，做样品测试的时候要尽量避免，防止由于尖端放电，电压过高使样品发生裂解，从而不能得到较高丰度的分子离子峰。同时也会由于电流的产生，损毁离子源内的元件。2、去溶剂温度（溶剂的最低的气化温度到最高的气化温度之间）电离源温度是溶剂气化的重要参数。软件添加附件之后可以将该参数设置到

3、350℃。对于水比较多流动相而言，我们需要调高电离源的去溶剂温度以便水能最大程度液化，因为有时候未气化的水会进入到质谱仪器内部，对一些阀门造成损坏。（当然，对于水而言，由于表面张力比较高，很难形成电喷雾，所以可以在不影响液相分离的情况下，尽量减少水的含量，避免信号的损失。）3、锥孔电压（根据灵敏度和分辨率进行数值优化）锥孔也可以叫采样孔，调节合适的锥孔电压可以增强仪器的灵敏度，但是锥孔电压过高会造成待测化合物的源内裂解。造成非二级质谱造成的碎片峰的产生，不利于谱图的解析。4、去溶剂气去溶剂气流量的选择：经验法选择去溶剂气，一般流动相的流速为0.1mL/min时候，选

4、择100L/h的去溶剂气流量，0.2mL/min时选择200L/h的去溶剂气流量，依次类推。去溶剂气的流量必须11内部资料经验交流仅供参考稳定，需将液氮分压表的分压控制在0.6左右，否则做出实验的待测化合物的离子计数重现性很差。另外，当去溶剂气流量升到1000L/h的时候，会发现去溶剂温度的反馈值保持在300℃（如果预设为350℃），属于正常现象。总而言之，电离源的最佳使用效果是要保证从电离源外观看来，一定要产生锥形电喷雾。从图谱上看，如果样品量能保证在mg/mL,质谱的响应值能达到103或者104数量级。如果未达到，分析思路：1、离子模式选择是否正确。2、离子源、

5、锥孔是否清洁。3、所设的离子源数值是不是没有得到相应的反馈值。4、待测样品是否适合用这种电离源进行电离。5、仪器的灵敏度是不是不够（在重新进行软件的附件安装之前，应该保存mstune方法参数，以防由于参数设置问题造成灵敏度下降）。四级杆检测器两种工作方式：1.全扫描scan：指定的两个质核比间扫描每个离子的丰度。2.仅检测被选择的一个或多个离子的丰度。飞行时间检测器原理11内部资料经验交流仅供参考质荷比与时间的平方成正比，只要测定出飞行时间，就可换算成质荷比。在检测时，显然是质荷比小的先到达检测器，质荷比大的后到达。在通常情况下，离子的飞行时间为微秒数量级。飞行时间

6、性能指标：1.分辨率：RP=M/DM（M:为测定的质量，DM:半峰高的峰宽）线性模式，分辨串较低；反射模式，分辨率可高达15000“延迟引出”（DE）技术或称“脉冲离子引出”（PIE）2.质量范围：目前的商品仪器．—般可测到几十万原子质量单位（u）飞行时间在多肽，蛋白质，糖，核苷酸有广泛的应用，能使有机质谱测试难得到信号的物质得到理想谱图。11内部资料经验交流仅供参考MCP检测器微通道板与电子倍增器的作用类似，都是离子的物理型放大器。与电子倍增器不同的是，MCP有成像功能；但是在TOFMS应用中仅使用了电子倍增功能。在微通道板的每个通道的内壁上都涂有一种能发射次级电

7、子的半导体材料，当给微通道板加了一定电压后，就会在每个通道中产生一个均匀的电场。这个电场是轴向的。所以能使进入电场的低能电子（光子或电子）与壁碰撞的时候能产生次级电子，并且在轴向电场的作用下次级电子被加速，这样次级电子碰到壁上又会产生更多的新的次级电子。这样。对于一个入射粒子。在板的输出端就会产生很多的电子。实际上我们很容易理解，每个通道就是一个光电倍增管，不过它没有专门的光阴极，而且打拿极是连续分布的，另外入射电子不只限于光子，事实上任何载能电子，只要在通道壁上能打出次级电子，它都能响应，与光电倍增管外电路分压器相比拟，它利用铅玻璃自身的体电阻作为分压电阻，一