乳粉中克雷伯氏菌检测方法研究

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1、乳粉中克雷伯氏菌检测方法研究天津出入境检验检疫局高旗利纲要克雷伯氏菌（Klebsiella）简介克雷伯氏菌检测方法研究进口乳粉中克雷伯氏菌污染情况的普查克雷伯氏菌简介Klebsiella克雷伯氏菌简介1.分类肠杆菌科克雷伯氏菌属Ørskov分类法肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae产酸克雷伯氏菌K.oxytoca植生克雷伯氏菌K.planticola解鸟氨酸克雷伯氏菌K.ornithinolytica土生克雷伯氏菌K.terrigena肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种K.subsp.pneumoniae肺炎克雷伯氏菌臭鼻亚种K.subsp

2、.azaenae肺炎克雷伯氏菌鼻硬结亚种K.subsp.rhinoscleromatis克雷伯氏菌简介2.定义符合肠杆菌科定义，具荚膜、无鞭毛的革兰氏阴性球杆菌，大小0.5~0.8µm×1~2µm，单独、成双或短链状排列。发酵阿东醇或肌醇，不产生鸟氨酸脱羧酶。克雷伯氏菌简介3.生长条件肺炎克雷伯氏菌生长温度：20℃～45℃最适温度：37℃不生长：t<15℃,t>50℃生长pH：4.5～10.5最适pH:6.5～8.5产酸克雷伯氏菌生长温度：10℃～45℃最适温度：30℃～37℃不生长：t<5℃,t>50℃生长pH：4.5～10.5

3、最适pH:6.5～8.5克雷伯氏菌简介4.培养特性营养要求:不高，在普通肉汤、普通琼脂、血平板、麦康凯和SS培养基上均可生长。生长特征：肉汤：24h后呈混浊生长普通琼脂平板：菌落呈灰白色，凸起，边缘整齐，湿润而粘稠血平板：形成浓厚、灰白色、凸起而闪亮的菌落，不溶血麦康凯和SS琼脂：形成粉红色，表面湿润且突起的菌落在上述培养基上，相邻菌落可能发生融合现象。5.生化特性克雷伯氏菌简介克雷伯氏菌属内种的生化特征见下表生化特性肺炎克雷伯氏菌臭鼻克雷伯氏菌鼻硬结克雷伯氏菌产酸克雷伯氏菌肌醇+d++阿东醇++++吲哚---+甲基红-++-VP

4、+--（+）柠檬酸盐+（-）-+丙二酸盐（+）-+（+）尿素酶（+）--（+）赖氨酸脱羧酶+d-+果胶酸酶---+ONPG++-+10℃生长---++：≥90%阳性;（+）：75-89%阳性;d：种间不同菌株不定;（-）：75-89%阴性;-：≥90%阴性克雷伯氏菌简介6.致病性肺炎克雷伯氏菌鼻炎克雷伯氏菌鼻硬结克雷伯氏菌产酸克雷伯氏菌克雷伯氏菌是除大肠埃希氏菌外的医源性感染中最重要条件致病菌，易感对象为免疫力低或长期使用抗生素的人群。易引起肺炎、支气管炎和创伤感染，有时引起严重的败血症、脑膜炎、腹膜炎和肝脓肿等。易引起慢性萎缩性

5、鼻炎，侵犯鼻咽部，使组织发生坏死。易引起鼻部慢性肉芽肿性病变。可引起脑膜炎、败血症、结肠炎和食物中毒，有的菌株产生ST和LT肠毒素。克雷伯氏菌简介7.婴儿奶粉中克雷伯氏菌污染几率和含量Harry等人采用BP胨水结合EE肉汤增菌，VRBGA平板分离的方法，对35个国家141份婴儿奶粉中肠杆菌科污染情况进行了调查，按污染几率，依次为：取样方法为：3100g、310g、31g。检测结果表明：肺炎克雷伯氏菌含量为（0.36～46.22）CFU/100g，产酸克雷伯氏菌污染程度为（0.36～1.47）CFU/100g。肠杆菌科污染几率

6、（份/141份）团聚肠杆菌阴沟肠杆菌坂崎肠杆菌肺炎克雷伯氏菌弗劳地枸橼酸杆菌大肠埃希氏菌产酸克雷伯氏菌差异枸橼酸杆菌蜂房哈夫尼亚杆菌3530201354431克雷伯氏菌简介8.FAO/WHO日内瓦会议FAO/WHO于2004年5月2～5日在日内瓦召开了“婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌和其他微生物”联席会议。参会的17名专家分别来自美国、英国、荷兰等13个国家。会议报告（Enterobactersakazakiiandmicroorganismsinpowderedinfantformula,MeetingReport,2004）将婴儿配

7、方奶粉中病原微生物分成3类：A类B类C类克雷伯氏菌简介流行病学和微生物学上都有令人信服的证据表明，被污染的婴儿奶粉是婴儿患病的传播媒介和传染源，这类微生物包括阪崎肠杆菌和肠炎沙门氏菌。对婴儿致病，已从奶粉中检出，但无论是流行病学还是微生物学都不能很明确地表明，被污染的婴儿奶粉是婴儿传染病的传播媒介和传染源，这类微生物包括团聚肠杆菌、伤口埃希氏菌、蜂房哈夫尼亚菌、肺炎克雷伯氏菌、产酸克雷伯菌、克氏柠檬酸杆菌、弗氏柠檬酸杆菌和阴沟肠杆菌。对婴儿致病，但没有从婴儿奶粉中检出，或者尽管已从奶粉中检出，但没有证据表明被污染的婴儿奶粉是婴儿患

8、病的原因，这类微生物包括蜡样芽孢杆菌、艰难梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌。克雷伯氏菌检测方法研究常规检测方法的研究分子生物学方法的研究检测方法研究1.试验用参考菌株常规检测方法的研究共采用参考菌株33株，自备菌株为本室分