《糖酶和蛋白酶》ppt课件

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1、第三篇食品工业酶第六章糖酶糖酶(Carbohydrases)的作用是裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键,使多糖降解成较小的分子。糖酶还能催化糖单位结构上的重排,形成新的糖类化合物,这类反应被称为转糖苷作用(由糖基(G)与糖苷配基(R)组成的糖苷RG,把糖基转移给别的物质(A)生成AG的反应:RG+A→R+AG)。一些酯酶能作用于酯化糖类,例如果胶酯酶。主要的糖酶:淀粉酶、果胶酶、转化酶、乳糖酶、纤维素酶第一节淀粉酶淀粉酶(Amylases)不仅存在于动物中,也存在于高等植物和微生物中,能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总称。淀粉酶作用于淀粉、糖原、多糖衍生物。三类淀粉

2、酶:α-淀粉酶,从底物分子内部将糖苷键裂开;β-淀粉酶,从底物分子的非还原性末端将麦芽糖水解下来;葡萄糖淀粉酶,从底物的非还原性末端将葡萄糖单位水解下来。一、α-淀粉酶(α-1,4-葡聚糖-4-葡萄糖水解酶EC3.2.1.1)存在于植物、哺乳类动物组织和微生物。α-淀粉酶以随机方式作用于淀粉而产生还原糖。α-淀粉酶作用于淀粉时,将α-1,4糖苷键裂开,产物的构型保持不变α-淀粉酶:是一种内切酶,只能水解α-1,4糖苷键,不能水解α-1,6糖苷键,但可越过α-1,6糖苷键水解α-1,4糖苷键,但不能水解麦芽糖中的α-1,4糖苷键α-淀粉酶以直链淀粉为底物时,反应一

3、般按两个阶段进行:①直链淀粉→寡糖,快速,随机机制②寡糖→葡萄糖和麦芽糖,缓慢直链淀粉:葡萄糖+麦芽糖+麦芽三糖+低聚糖的混合物α-淀粉酶作用支链淀粉时,产生葡萄糖、麦芽糖和一系列α-限制糊精(4个或更多个葡萄糖基构成的寡糖,含有α-1,6糖苷键)。支链淀粉:葡萄糖+麦芽糖+麦芽三糖+α-极限糊精一般分解限度以葡萄糖为准是35-50%,但在细菌的淀粉酶中,亦有呈现高达70%分解限度的(最终游离出葡萄糖)极限糊精是指淀粉酶不能再分解的支链淀粉残基.α-极限糊精是指含α-1,6糖苷键由3个以上葡萄糖基构成的极限糊精.1、分子大小相对分子质量为50,000左右,每一个

4、分子含有一个Ca++可能存在相对分子质量为100,000的二聚体,二聚体中锌原子在两个单体之间形成了交联。2、钙的作用Ca++没有直接参与形成酶-底物络合物,但是它起着维持酶的最适宜构象的作用,从而使酶具有最高活力和最高的稳定性。在低pH和存在螯合剂的条件下,将酶分子中的钙完全除去,会导致酶基本上失活和对热、酸或脲等变性因素的稳定性降低。3、温度对α-淀粉酶作用的影响在与钙相结合的条件下,α-淀粉酶的热稳定性高于β-淀粉酶。不同来源的α-淀粉酶具有不同的热稳定性,某些细菌α-淀粉酶的最适温度可达70℃以上。在超过糊化温度时使用细菌α-淀粉酶特别适宜,淀粉颗粒糊化

5、后对于酶的作用变得非常敏感,往往在酶失活前淀粉已被完全水解。高浓度的淀粉糊(30~40%)能显著提高α-淀粉酶的稳定性,它使地衣形芽孢杆菌淀粉酶和淀粉液化芽孢杆菌淀粉酶在110℃和85~90℃下具有短时间的作用能力。4、在α-淀粉酶作用下淀粉分解速度α-淀粉酶以随机的方式作用于淀粉,因而酶反应动力学比Michaelis-Menten方程所描述的要复杂得多。酶作用的淀粉底物在反应过程中分子量逐渐下降,因而Km和Vmax随底物分子量变化而变化。α-淀粉酶水解葡聚糖的速度随聚合度的减小而很快地下降;它水解直链淀粉的速度比水解分支分子(支链淀粉和糖原)要高。5、α-淀粉

6、酶活力测定的方法底物——可溶性淀粉或糊精测定参数——底物与碘显色能力下降(蓝至红棕色)的速度粘度下降的速度二、β-淀粉酶(α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶EC3.2.1.2)也称糖化淀粉酶,存在于高等植物,不存在于哺乳类动物。1、β-淀粉酶的作用外切酶,从淀粉分子的非还原性端裂开α-1,4-糖苷键,依次将一个麦芽糖单位水解下来,将C(1)的构形转变为β-型。β-淀粉酶不能绕过α-1,6-糖苷键。以支链淀粉为底物时,50-60%转变成麦芽糖,其余部分称为β-限制糊精。作用于直链淀粉时也只有70-80%转变成麦芽糖。当底物直链淀粉分子含奇数葡萄糖基时,β-淀粉酶作用的

7、最终产物除含有麦芽糖外,还含有麦芽三糖和葡萄糖。酶作用于麦芽三糖的速度是很慢的。支链淀粉产物:麦芽糖+β-极限糊精β-极限糊精是指β-淀粉酶作用到离分支点2-3个葡萄糖基为止的剩余部分.2.β-淀粉酶性质耐酸,pH3时仍保持活性 不耐高温,70℃15分钟失活钙离子对β-淀粉酶有降低稳定性的作用酶蛋白中的巯基是β-淀粉酶活力必需β-淀粉酶是一种巯基酶,它能被许多巯基试剂抑制2、β-淀粉酶的作用机制酶的活性部位中至少含有三个特异基团Χ、A和BΧ基团——淀粉分子非还原性末端C(4)上的—OH基当Χ基团和C(4)上的—OH基发生相互作用时,底物分子的第二个糖苷键恰到好处

8、地配置在催化基团A和B的

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