《动物细胞工程复习》ppt课件

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1、动物细胞工程专题复习动物细胞培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代细胞部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞1、过程：细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变几个有关概念：原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到

2、两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。1、无菌、无毒：2、全部的营养物质：3、适宜的温度和PH值：4、必要的气体条件：（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）保证细胞顺利的生长增殖36.5+（-）0.5度,7.2-7.4O2和CO2（95%空气和5%CO2）2、条件：维持培养液的PH3、应用：大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）作为基因工程中的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据细胞的全能性细胞植株培养结果获得细胞或细胞产物快速繁

3、殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较1.动物细胞工程技术的基础是（）A、动物细胞融合B、胚胎移植C、动物细胞培养D、核移植2.下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（）A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株CB核移植技术和克隆动物1.概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一

4、个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。核移植（难度高）受体细胞：MⅡ期的卵母细胞胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易用核移植的方法得到的动物称为克隆动物原理：动物体细胞核的全能性。取供体细胞取卵母细胞供体细胞培养培养到MⅡ中期卵母细胞去核供体细胞注入去核的卵母细胞供体核进入受体卵母细胞重组胚胎代孕母牛生出与供体遗传物质基本相同的个体2.过程：3.克隆动物的研究意义：1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白2.改良动物品种3.治疗人类疾病，作为供体4.保护濒危动物4．体细胞核移植技术存在的问题：1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难

5、，免疫失调等。2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。动物细胞融合1.过程：动物细胞A动物细胞B诱导，融合2个完整的杂交细胞AB有丝分裂（膜融合、质融合）（核融合）注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞2.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。3.应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体植物体细胞杂交和动物细胞融合比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理诱导方法用途细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性用纤维素酶、

6、果胶酶去壁用胰蛋白酶使细胞分散物理、化学方法物理、化学、生物方法获得部分或完整植株主要用于制备单克隆抗体1、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④2、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是A、融合的原理B、融合的优点C、融合的诱导手段D、融合的过程单克隆抗体1.单克隆抗体制备过程诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交

7、瘤细胞获得单克隆抗体的方法过程：B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养抗体检测产生所需抗体的杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体2.单克隆抗体的应用：１.作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合2.用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗优点：准确、高效、简易、快速单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高优点:疗效高、毒副作用小