金花茶种子对激素相关性肿瘤体外抑制作用的实验研究.doc

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1、金花茶种子对激素相关性肿瘤体外抑制作用的实验研究作者：韩立春，史丽颖,于大永,唐前,唐玲,冯宝民,王永奇【摘要】目的观察金花茶种子不同提取物对激素相关性肿瘤体外抑制作用。方法采用噻唑蓝比色法(MTT)检测金花茶种子不同提取物对人宫颈癌HeLaS3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的影响。结果金花茶种子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分都显示了较强的抑制人宫颈癌HeLaS3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的作用，其IC50分别为85.88，67.62，55.71μg/ml和63.06,56.20,68.53μg/ml，且抑制作用和样品浓度呈量效关系。结论金花茶种子乙醇提取物的正丁醇部分和水溶部分在

2、体外对激素相关性肿瘤具有抑制作用，为其抗癌活性的有效部位。【关键词】金花茶;宫颈癌;前列腺癌;HeLaS3细胞;PC3细胞　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinhibitiveeffectoftheseedsofCamelliachrysantha(Hu)TuyamaonGonadalHormonesdependenttumourinvitro.MethodsHeLaS3cellswerecultivatedinRPMI1640mediumcontaining10%fetalcalfserum,PC3cellswerecultivatedinDMEM

3、mediumcontaining10%fetalcalfserum.Theanti-proliferativeeffectoftheseedsofCamelliachrysantha(Hu)TuyamaonHeLaS3cellsandPC3cellswereanalyzedbyMTTassay.ResultsEtOHextract,BuOHfractionandH2OfractionfromtheEtOHextractfromtheseedsofCamelliachrysantha(Hu)TuyamacouldsignificantlyinhibittheproliferationofH

4、eLaS3cellsandPC3cellsatIC50concentrationof85.88,67.62,55.71μg/mland63.06,56.20,68.53μg/ml,respectivelyandadose-dependentrelationshipbetweeninhibitiveabilityandsampleconcentration.ConclusionBuOHfractionandH2OfractionfromtheEtOHextractfromtheseedsofCamelliachrysantha(Hu)Tuyamaareeffectiveforantican

5、cer.　　Keywords:Camelliachrysantha(Hu)Tuyama;Cervicalcancer;Prostaticcancer;HeLaS3cells;PC3cells金花茶Camelliachrysantha(Hu)Tuyama系山茶科Theaceae山茶属CamelliaLinn.金花茶组SectionchrysanthaChang植物，被列为国家一级、世界二级珍稀保护植物［1］。金花茶不仅有较高的观赏价值，而且具有一定的药用价值和营养价值。其叶和花为壮族民间用药，主要用于治疗咽喉炎、痢疾、高血压病、便血、月经不调［2,3］。金花茶叶是一种含有丰富营养成分的山茶

6、，含有多种微量元素和氨基酸，而咖啡碱含量低［4］。我们在对山茶属植物抗肿瘤活性的研究中发现，金花茶种子的乙醇提取物具有较强的抗肿瘤作用。本研究将通过考察金花茶种子乙醇提取物不同萃取部位对人宫颈癌HeLaS3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的影响，探讨其抗癌活性的有效部位及量效关系。　　1材料与方法　　1.1金花茶的提取分离金花茶种子采集于广西南宁，由广西林业科学研究院高级工程师梁盛业鉴定。取金花茶种子100g，粉碎后用95%乙醇回流提取3次，3h/次，合并提取液，减压浓缩成浸膏，加适量水分散，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取液分别浓缩至浸膏，得醋酸乙酯部分、正丁醇部分和水溶部分，

7、减压浓缩并真空干燥后得到各部分的浸膏，各浸膏用DMSO配成各浓度溶液备用。　　1.2细胞系和培养液人宫颈癌HeLaS3细胞株和人前列腺癌PC3细胞株从HumanSciencesResearchResourceBank(日本人类科学基金会,东京,日本)获得，HeLaS3细胞培养于含有10%热灭活小牛血清的RPMI1640培养液中，PC3细胞培养于含有10%热灭活小牛血清的DMEM培养液中，37℃，5%CO2，饱和湿度条件下培养。选取对