实验室诊断技术--实训总结

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时间:2019-09-16

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1、实训总结本学期,我们在老师的带领下做了一系列的实验室诊断实验。以下就是我们组的各实验步骤与结果:一、病鸡的解剖与病料的采集:分组拿到病鸡后,我们先检查病鸡的外观,外观检查包括鸡脚的检查、皮肤的检查、头的检查、鸡冠的检查以及肉髯的检查。我们的检查结果是脚与皮肤为正常;鸡冠苍白;肉髯发绡。接下来,我们就将鸡用消毒水打湿,防止剖检时羽毛乱飞,同时也有消毒作用。打湿完毕,就是先将腹壁和大腿内侧的皮肤切开,再用力将大腿按下,使髓关节脱臼,破坏其髓关节,进而两人腿向外展开以便固定鸡体。鸡休固定好后,再于胸骨末端后方将皮肤横切,与两侧大腿切口连

2、接,将胸骨末端后方的皮肤拉起,向前用力剥离到头部,使整个胸腹及颈部的皮下组织和肌肉充分暴露,同时,检查皮下肌肉、坐骨神经,坐骨神经两侧是否一致。我们的检查结果是皮下无出血、坐骨神经两侧一致。以下是无菌操作步骤。在无菌操作前,我们要先将解剖工具进行消毒处理。接着,用消毒过的解剖工具进行解剖与采样。术者在胸骨后腹部沿腹白线将腹壁剪开,捏住胸骨用力向上翻拉,去掉胸骨露出体腔。紧接着,术者用手指伸到肌胃下,向上勾起,从腺胃前端剪开,在靠近泄殖腔处把肠剪断,将整个消化道连同脾脏取出。小心切断肝脏韧带并连同心脏一起取出。用小蹑子将陷于肋间的肺

3、脏完整取岀,从嘴角一侧剪开至食管和嗦囊,把气管剪开。从鼻孔上方剪断鸡喙,露出鼻腔,用力挤压,检查分泌物的性状和鼻腔及眶下窦有无病变。其间,我们要采集并观察的部位是,心、肝、脾、肺、肾、腺胃、肌胃、盲肠、法氏囊、泄殖腔、喉头、食道、气管以及心、肝、肺的组织液。观察结果是:气管有出血;脾有染绿色;肺部有出血;心脏心尖脂肪较多;直肠有条状出血;盲肠扁桃体肿大,并且有点状出血;盲肠一侧肿大;腺胃有淤血;肾略肿;其他正常。采集的病料要分别装入塑封袋,放于4摄氏度冰箱中保存。另外,在每个塑封袋上还要注明病料名称,采集日期、组别。剩余病料进行无

4、公害化处理。二、细菌的分离培养:这个实验我们用的是平板划线分离法。首先,右手持接种环于酒精灯上灼烧灭菌,待冷。然后,在酒精灯旁进行,直接用灭菌的接种环接触病料,取一环病料。接着,左手持平皿,舟拇指、食指及中指将皿盖打开一侧,角度小,以能顺利划线为宜,避免空气中的细菌污染培养基。将已取被检材料的接种环仲入平皿,并涂于培养基一侧,然后自然抹处成30-40度角,以腕力在平板表面轻轻地分区划线。划线完毕,烧灼接种环,盖好培养皿,用签字笔在培养皿的底部注明被检材料及日期,倒置37摄氏度温箱中,培养24h。24h后,我们从温箱中拿出培养皿,在

5、该培养皿上挑一个疑似菌落进行细菌的纯培养。用灭菌过的接种环蘸取该菌落,重新在新的平板表面划线培养。步骤同上。然后,将纯培养的细菌平皿取出,挑一个菌落植入已经准备好,灭好菌的液体培养基中进行培养,注意无菌操作,用灭好菌的接种环取菌假如液体培养基中,放入恒温箱中进行培养。三、革兰氏染色:首先,用灭菌的接种环蘸取少量的细菌液,在玻璃片上均匀涂开。涂好后,将接种环用酒精灯烧灼灭菌。同时,将涂有细菌液的玻璃片放于酒精灯的火焰上方烘干,烘干温度不宜过高,以不烫手背触感为准。烘干玻片后,在涂有细菌液处滴加结晶紫,1分钟后用清水洗去甩干;滴加革兰

6、氏碘液,1分钟后用清水洗去甩干;滴加酒精褪色,30s后用清水洗去甩干;再滴加沙黄,1分钟后用清水洗去,用滤纸吸干,即可镜检。镜检是先用低倍镜找到细菌,然后在玻璃片上滴加香柏油,用油镜观察。我们组的观察观察结果是红色的杆状细菌,初步怀疑是大肠杆菌。四、药敏试验:在“超净台”中,用移液枪吸取适量菌液加入新的培养J1【L,用灭菌棉签涂匀表面。将银子于酒精灯火焰灭菌后略停,取药敏片有规律的贴于平皿培养基表面。在平皿中央贴一片,外周等距离贴6片,我们组贴的分别是复方新诺明、头鞄呼林、链霉素、恩诺沙星、大观霉素、阿莫西林、庆大霉素。将平皿培养

7、基置于37°C温箱中培养24小时后,观察效果。我们组的结果是:复方新诺明的抑菌圈直径是Ocm,头抱呼林的抑菌圈直径是0.8cm,链霉素的抑菌圈直径是l&m,恩诺沙星的抑菌圈直径是3.2cm,大观霉素的抑菌圈直径是1.6cm,阿莫西林的抑菌圈直径是1.1cm,庆大霉素的抑菌圈直径是2.7cmortl此町得,该细菌对恩诺沙星和庆大霉索最为敏感。五、动物试验:这个实验选用的动物是5日龄的雏鸡两只,用一次性注射器吸取0.2ml的菌液,分别注入两只雏鸡的腹腔。大约10小时之后,两只雏鸡中有一只出现了倒地抽搐,躺地不起,翅膀一侧无力的症状,推

8、测为神经症状。六、细菌生化试验:先挑出硫化氢、苯丙氨酸、葡萄酸盐、靛基质、甲基红、枸椽酸盐、尿素、动力、赖氨酸、鸟氨酸、棉了糖、山梨醇、木糖的生化管,将它们依次排列用胶布贴好固定。然后用磨砂石掰断,灭菌接种环拉直,做成直线,再蘸取菌液,依次接入生化

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