兽医临床诊断学(卞建春)实验9尿液常规检验

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实验九尿液常规检验一、 目的要求掌握尿液化学检验方法及尿沉渣的检査方法,并能认识某些沉渣及管型。二、 实验内容(一)尿液酸碱反应的测定1. 器材广范pH试纸。2. 方法取一条广范pH试纸浸于被检尿中,数秒钟后取岀试纸条,根据试纸的颜色改变与标准色板比色以 判定尿液的pH3. 正常值健康家畜尿液的pH值为:马7. 2?7. 8,牛7. 7?& 7,羊&0?& 5,猪6. 5?7. 8。4. 临床意义草食动物尿液变为酸性,杂食动物的尿液显著偏酸或偏碱,都是不正常的,见于某些热性病、 长期食欲不振、某些营养代谢病等。(二)尿中蛋白质的检验1. 原理蛋白质遇酸类物质,可发生凝固或沉淀。2. 器材中试管,滴管,试管架等。3. 试剂35%硝酸。装入滴瓶中备用。4. 方法取中试管1支,滴加35%硝酸1?2ml (20?40滴),再沿试管壁缓缓滴加尿液,使两液重叠,静 置5min,观察结果。两液重叠而产生白色环者为阳性反应。白色环愈宽,表示蛋白含虽愈高,可用1?3 个“+”号表示之。5. 注意事项马的尿液中含冇大尿的碳酸钙,因此应事先加入适戢10%醋酸液使尿呈酸性,尿液透明,便 于观察结果。6. 临床意义健康动物的尿中含有微量的蛋白质,用一般方法难以检出。病理性蛋白尿见于肾炎、大多数急 性热性传染病(如猪瘟、猪丹毒、流感等)和某些传染病。(三)尿中潜血的检验健康家畜的尿液中不含冇红细胞或血红蛋白。尿液中不能用肉眼直接观察的红细胞或血红蛋白叫做潜血(或 叫隐血),可用化学方法进行检查。1. 原理尿液中的血红蛋白或红细胞被酸破坏所产生的血红蛋白,冇过氧化氢酶的作用(但并非为酶,因为 被点沸后仍冇触媒作用),它町以分解过氧化氢而产生新生态氧,使联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝。2. 器材与试剂小试管,滴管,联苯胺,冰醋酸,过氣化氢溶液3. 方法联苯胺法:取联苯胺少许(约一刀尖),溶解在2血冰酷酸中,加双氧水2?3ml,混合。混合后, 加入等量尿液,如果液体变绿色或蓝色,表示尿中冇血红蛋白存在。4. 临床意义尿屮出现红细胞,多见于泌尿系统各部位的出血,如急性肾炎、膀胱炎等。此外,某些溶血性 疾病,如新生仔猪的溶血性黄疸、中毒等,尿中也可出现潜血阳性。(四)尿中尿胆素原的检验1. 原理尿胆索原在酸性溶液中可与对二甲氨基苯甲醛发生醛化反应而生成红色化合物,此醛化反应与尿胆 素原所含的毗咯环冇关。2. 试剂艾(Ehdich)氏试剂:对二甲氨基苯甲醛2. Og,蒸憎水加至100ml,浓盐酸20ml。混合贮于棕色 瓶中。3. 方法取10ml刻度试管1支,加廉液9ml,再加艾氏试剂lml,充分颠倒混合,静置lOmin,在试管底衬 一白纸,于光线明亮处,两眼自管口垂直视向管底,观察尿液垂直柱而的颜色呈櫻桃红色者为阳性反应。必要吋,可将被检尿液做2、4、6、8、16、32、64倍稀释,取稀释尿液9ml,加艾氏试剂1ml,经lOmin 后观察结果,记录红色反应的最后一管的稀释倍数。一般正常时仅2?4倍稀释管呈现红色反应;如8倍以上的稀释管呈明显红色反应,则证明尿胆素原增加。4. 注意事项碱性尿,应事先加10%酷酸液酸化。5. 临床意义健康家畜的尿中含有少量的尿胆素原,溶血性疾病及肝实质性疾病,尿中尿胆素原大量增加。 当家畜患阻塞性黄疸时,尿胆素原消失。(五)尿中葡萄糖的检验健康家畜的尿中仅含微量的葡萄糖,用一般化学方法无法检查。若用-?般方法能检出尿中含有葡萄糖吋, 称为糖尿,表示机体的碳水化合物代谢障碍或肾的滤过机能严重破坏。1. 原理葡萄糖含冇醛基,在热碱性溶液中,能将硫酸铜还原成黄色的氧化铜或黄红色的氧化亚铜。2. 试剂班(Benedict)氏试剂:先将173. 0g枸椽酸钠及100. 0g无水碳酸钠溶解T 700ml蒸储水中,可加 热促其溶解“另将17. 3g硫酸铜溶解于100ml蒸憾水中,然后将硫酸铜液慢慢倾入己冷却的上液内,并加 蒸憎水至1000ml,过滤保存于棕色瓶内备用。3.方法取班氏试剂5ml蛊于试管中,加尿液0. 5ml (约10滴)充分混合,加热煮沸1?2min,静K 5min 后观察结果。判断:管底出现黄色或黄红色沉淀者为阳性反应。黄色或黄红色的沉淀愈多,表示尿中葡萄糖含量愈高。 也可按表9-1估计葡萄糖的大约含量:表9-1尿中葡萄糖含戢判定表符号反应试剂仍呈清晰蓝色葡萄糖的大约含虽无糖1仅在冷后才有微量黄绿色沉淀约0.5g%以下++静置后,管底冇少量黃绿色沉淀约0. 5?lg%+++静置后,管底有多戢黄色沉淀约1?2g%++++静置后,管底有多最黄红色沉淀约2g%以上4. 注意事项:(1) 尿液中如含蛋白质,应把尿液加热煮沸,然后过滤,再行检验。(2) 尿液与试剂一定要按规定的比例加入,如尿液加得过多,由于尿液中某些微量的还原性物质,也可产 生还原作用而呈现假阳性反应。(3) 应用水杨酸类,水合氯醛,维生素C及链霉素治疗时,尿中可能冇还原性物质而呈假阳性反应。5. 临床意义生理性的糖尿,为暂时的,见于一时性恐惧、兴奋、饲喂大量含糖饲料等。病理性的糖尿,可 见于肾脏疾病,化学药品中毒,肝脏疾病等。(六)尿中酮体的检验1. 原理酮体在碱性溶液中与亚硝基铁氟化钠作用可产生紫红色的亚铁五氤化恢,这种产物在醋酸溶液内不 但不褪色,反而颜色会加深。2. 试剂(1)5%亚硝基铁氤化钠溶液。此液应新配制,贮于棕色瓶中可保存一周。(2) 10%氢氧化钠溶液。(3) 20%醋酸溶液。3.方法取中试管1支,先加尿液5ml,随即加入5%亚硝基铁氤化钠溶液和10%氢氧化钠溶液各0.5ml (约 10滴),颠倒混合,再加20%醋酸约51 (20滴),再颠倒混合,观察结果。判断:尿液呈现红色者为阳性,如尿液开始变红,加入20%酷酸后红色乂消失者为阴性。根据颜色深浅的 不同,可估计酮体的大约含量(表9-2)。表9-2尿中酮体含戢判定表符号反应酮体的大约含戢(mg%)1浅红色3?5++红色10 ?15+++深红色20 ?30++++黑红色40 ?604.临床意义酮体包括B-粗丁酸、乙酰乙酸、丙酮三种物质。健康家畜尿中含有微量的酮体,用一般化学 试剂无法检出。尿中出现酮体,主要见于奶牛的酮病、奶羊的妊娠毒血症、仔猪的低血糖等。(七) 尿沉渣的检查尿沉渣有两类:有机沉渣和无机沉渣。有机沉渣包括各种细胞和各种管形,无机沉渣包括碱性尿中的盐类 结晶和酸性尿中的盐类结晶。1.尿沉渣标本的制备与检查方法⑴将尿液静置lh或低速(lOOOrpm)离心5?lOmin。(2) 取沉渣物1滴,置于载玻片上。用玻棒轻轻涂布使其分散开來。滴加1滴稀碘溶液(也可不加),加盖玻 片,低倍镜观察。(3) 镜检时,宜将聚光器降低、缩小光圈,使视野稍喑,用低倍镜观察到大体卬象后再转换高倍镜仔细观察。@ 9-1尿中的上
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