免疫组化技术在妇科的临床应用

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'免疫组化技术在妇科的临床应用'
免疫组化技术在妇科的临床应用免疫组化的基本原理 免疫组化是免疫组织化学技术的简称。它是应用抗原、抗体特异性结合的原理,使用已知的抗体在病理切片上与相应的抗原结合,然后把结合产物应用组织化学的方法显现出来,使之可以在显微镜下观察得以确认。通常使用的显色剂为联苯胺,结合的抗体显示为棕色颗粒,所以把免疫组化成为“棕色革命”。 组成人体细胞分为若干种,如:上皮细胞、神经细胞、肌肉细胞、血细胞等,每种细胞都有其特殊的结构物质,每种细胞都有其特异功能,每种功能又有其物质基础。如:鳞状上皮细胞通过角化物可以防止机体水份的蒸发和外界病原体的侵入,肌肉可以通过肌动蛋白使自己收缩。突触素可以传导神经兴奋,某些器官借以实现其功能的激素受体,载有遗传物质的DNA全段——基因等。现在人们都可以把这些物质纯净的分离出来,并把它们作为抗原免疫大鼠和家兔,使之产生相应的抗体,人们再把每种抗体分离纯化,就得到我们免疫组化应用的抗体。我们把这些抗体作用于病理切片,然后再通过染色,如果切片上有这种抗体对应的抗原,就会在切片上出现棕色颗粒,如果没有棕色颗粒,就说明没有这种抗体的抗原,在显微镜下就一目了然。免疫组化标记在妇科肿瘤的应用及其意义 免疫组化以它的特异性和敏感性,结合组织学上的定位性已成为多种肿瘤病理形态学诊断的新手段。这里需要说明的是虽然目前具有诊断价值的肿瘤标记物有数百种之多,但至今还没有发现人体肿瘤的特异性抗原,也就是说还没有任何一种抗体能100%地确诊一种肿瘤。 尽管如此,人们正是得到了一些与肿瘤相关的抗原,存在于肿瘤细胞的胞核、胞浆和胞膜上,它的存在或量变可以提高肿瘤的性质,借以了解肿瘤的组织发生,细胞分化、细胞功能,以有助于肿瘤的诊断,鉴别诊断、分类,判断预后和指导临床治疗。 目前具有诊断价值的肿瘤标记物虽已有数百种,但在临床病理诊断常用的有50余种,其标记物有以下类型:一、肿瘤相关抗原 这种抗原只存在肿瘤组织中,正常组织内没有或含量甚微。或其为几种类型肿瘤所共有,故又称为肿瘤群体抗原,对判断肿瘤的良、恶性和起源均有一定帮助CA125 对卵巢上皮性肿瘤都有一定的表达,但主要对浆液性肿瘤阳性表达,卵巢粘液性腺癌CA125 不表达。可以用于这两种肿瘤的鉴别诊断。 CA125 对子宫内膜样肿瘤透明细胞癌,未分化癌上皮成份也是阳性表达。CEA癌胚抗原 广泛存在于各种上皮性肿瘤,大多数卵巢浆液性肿瘤不表达,而卵巢粘液性肿瘤表达,在子宫内膜样腺癌,透明细胞癌,勃勒纳氏瘤CEA都有不同程度的表达,在胃肠道恶性肿瘤中CEA也为阳性表达,所以卵巢库肯勃氏瘤CEA也是阳性表达。AFP甲胎蛋白 是胚胎卵黄囊细胞,胚胎肝细胞和胎儿肠道细胞合成的一种糖蛋白,主要用于肝癌的诊断,在卵巢内胚窦瘤、胚胎性癌,恶性畸胎瘤都为阳性表达。二、细胞结构抗原 这种抗原可存在于正常组织和肿瘤组织中,为某些组织细胞群所特有,对判断肿瘤起源有重要意义CK7: 主要标记腺上皮和移行上皮。卵巢、肺、乳腺上皮CK7阳性表达。而结肠,前列腺和胃肠道上皮CK7阴性表达。可用于卵巢癌与胃肠道癌的鉴别诊断。CK20: 主要标记胃肠道上皮、尿道上皮。卵巢粘液性囊腺癌CK20为阳性表达。子宫内膜腺癌、宫颈鳞癌、乳腺癌、肺癌和卵巢非粘液性肿瘤CK20均不表达。desmin 结蛋白 为中间丝蛋白之一,分布于正常平滑肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞和 肌上皮细胞及其肿瘤中。结蛋白在良性肌源性肿瘤是强阳性表达,而在平滑肌肉瘤中表达率仅为50%,另外在平滑肌瘤中结蛋白与波形蛋白Vimentin(是表达间叶组织来源的肿瘤,上皮来源肿瘤不含此蛋白,用于癌与肉瘤的鉴别,恶黑与癌的鉴别等)的表达呈反向关系,分化越好结蛋白阳性反应越强,波形蛋白阳性反应弱或阴性;反之,分化越差,结蛋白反应弱或阴性,而波形蛋白反应越强。另外含有肌源成份的癌肉瘤,恶性中胚叶混合瘤,畸胎瘤中也存在结蛋白S-100 是一种可溶性酸性蛋白,主要存在于神经组织、垂体、唾液腺等组织,是神经性肿瘤的主要标记。在恶黑及脂肪肉瘤为阳性表达SMA 肌动蛋白 是一种标记平滑肌瘤的蛋白,主要用于诊断平滑肌瘤、血管平滑肌瘤,平滑肌肉瘤以及肌上皮细胞。在乳腺肿瘤中以此抗体检测导管上皮肌上皮细胞阳性与否来判断乳腺肿瘤的良、恶性。三、可用于某些生殖细胞来源的肿瘤和妊娠有关的肿瘤的诊断,常用的有:内分泌激素及其受体抗原 包括肽类激素和类固醇激素两种,以肽类激素抗原应用较多,常用有胰岛素、高血糖素、胃泌素、生长抑素、降钙素等。类固醇激素有雌激素、孕酮、睾酮等。但此类激素在组织切片中保留困难,且在组织内有多种结构类似的激素前体,不仅染色效果不好,且难以正确判断。所以多检测其激素受体。如:ER(雌激素受体)、PR(孕激素受体)四、肿瘤中病毒抗原HPV(人乳头状瘤病毒)特别是HPV16、18是宫颈癌主要致病病毒,亦可用于头颈部癌、前列腺癌和食管癌的研究HIV(人类免疫缺陷病毒)即艾滋病病毒,表达于淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、滤泡树突状细胞和HIV感染的神经胶质细胞,主要用于艾滋病的研究.另外还有HSV(单纯性疱疹病毒等)五、作为判断预后的标记抗体C-erbB-2 是一种癌基因蛋白质,存在于细胞膜上,该蛋白可加速细胞的运动,参与细胞浸润和转移调节。在乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、胃癌阳性表达提示预后差。特别是乳腺癌阳性表达具有独特的预后价值,阳性表达者复发及转移率高,无瘤生存期及总生存期短。宫颈腺癌C-erbB-2 阳性表达者盆腔淋巴转移率和宫颈深肌层侵犯率高于阴性组。P53(肿瘤抑制基因) P53蛋白也是现代分子生物学中研究最多的蛋白质之一, P53蛋白除具有细胞生长阻滞作用外,同时还参与细胞DNA的损伤与修复、细胞生长与分化、诱导细胞调亡的过程,目前认为P53是生命科学领域中最重要的蛋白质分子。P53是肿瘤抑制因子,但由于失活、突变使蛋白结构发生变化,这在许多恶性肿瘤中可以见到P53基因的突变,特别是结肠癌、直肠癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、宫体癌、食道癌、胃癌、肝癌、乳腺癌及膀胱癌尤为常见。另外对骨肉瘤、软组织肉瘤、淋巴瘤及白血病等恶性肿瘤细胞中也可见到。研究证明, P53突变与肿瘤大小正相关,与分化程度、病人的总生存期和无瘤生存期呈负相关。 P53突变肿瘤复发率和死亡率明显高于阳性者。且P53突变与肿瘤血管侵袭呈明显相关。 在多种恶性肿瘤中突变性P53蛋白表达水平升高,用免疫组化可以检测到,所以我们仍以P53阳性表达来预测患者的预后、术后易复发等指标。 P53阳性表达与癌前病变的关系也极为密切,在宫颈和食管非典型增生中均可检测出P53蛋白。PCNA(增殖细胞核抗原) 是一种仅在增殖细胞中合成或表达的核内多肽。 PCNA阳性表达与细胞增殖活性有关,可做为细胞增殖状态的一个重要指标。在恶性肿
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