1-1-1实验十一DNA的粗提取与鉴定

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1、实验十一rig的粗提取与鉴定教学目的1.初步掌握z粗提取和鉴定的方法。2.观察提取出来的Z物质。实验原理1.口赵在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。LNA在0.14nol/L的NaCl溶液中的溶解度最低，据此可使溶解于NaCl溶液中的斤出。2.ENM寸容于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的恥3.二苯胺沸水浴〉蓝色（用于IW勺鉴定）实验步骤1•材料制备0.15nl柠檬酸钠10500ml烧杯-玻璃棒搅拌一lOOOFin离心2miL吸去上清液-活鸡血180ml即得鸡血细胞液（也可将上述烧

2、杯置于冰箱中，静置一天使鸡血细胞自行沉淀）2方法步骤提取血细胞核物质取血细胞液20ml蒸懈水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌(1)纱布过滤，滤液中含Z和其他核物质，如蛋白质原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂（2）溶解核内g滤液+缶ol/LNaCl溶液4血1,玻璃棒沿一个方向搅拌（3）析出含IW勺粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸倔水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出I现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶&液相当于稀释到0.14nol/L）（4）滤取含IW勺粘稠物：用多层纱布过滤，含IW勺粘稠物留

3、在纱布上（5）LNA粘稠物再溶解：f2Qnl2nol/LNaCl溶液］50ml烧杯，JI上述粘稠物J缓慢搅拌3min（©过滤含IW勺^iol/LNaCl溶液：用2层纱布过滤，滤液中含恥（0直含杂质较少的恥上述溶液+95?酒精，缓慢搅拌，出现乳白色丝状物，用玻璃J棒将丝装物卷起。—0.00l5mol/LNaCl溶液5ml—伽I二茉胺沸水浴知5（不出现浅蓝色）I管2管（8LN遷定：——0.00l5mol/LN?Cl溶液5ml—伽I二茉胺——皱状物（DNA）沸水浴九5（濬液逐渐岀现浅蓝色）实验关键：本实验成功的关键是获取较纯净的Z因此应

4、注意：1•充分搅拌鸡血细胞液。rm存在于鸡血细胞核屮。将鸡血细胞与蒸憾水混合以后，应用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，并释放出rm2.沉淀ENX必须用冷酒精。实验前必须准备好大量95帅勺酒精，并在冰箱屮（5C以下）至少存放24小时。3.止确搅拌含有悬浮物的溶液。在第（3）、（5）步骤，玻璃棒不要直插烧杯底部，且搅拌要轻缓，以便获得较完整的ENX分子。在步骤（7）,要将玻璃棒插入烧杯溶液中间，用手缓慢转动11Onia【同类题库】•在“DNA的粗提取与鉴定”的实验中分别使用2mol儿、0.14mol/L、2mol/L、OO

5、lSmol/L的氯化钠溶液，其作用分别是（A）A.溶解、析出、溶解、溶解C.溶解、溶解、析出、溶解B.析出、溶解、析出、溶解D.溶解、析出、溶解、析出.下列图示中能反映DNA溶解度与NoCI溶液浓度之间关系的是（C）ST黑解度STI善解度0.14NaCl浓度（jwI/L）BST黑解度0.14I3C1浓度（mol/L）CBn挥解度0.14NaCl浓度（jwI/L）A0.14NaCl浓度（jwI/L）D•IWF•下列哪种浓度的NaCl溶液中溶解度最低（BA200mol/LB0.14mol/LC0.015mol/LD0.10nnl/L.

6、在IW勺粗提取过程中，初步析出LWri提取较纯净的INWffl的药品的浓度和名称分別是（B①。.1汕1的柠檬酸钠溶液②2OOnnlA的NaCl溶液③0.14iwlA的NaCl溶液④体积分数为95师勺酒精溶液⑤0.0151W1/L的NaCl溶液⑥0.04iml/L的NaCl溶液A①③⑤B③④C②④D②③④.与析出Z粘稠物有关的叙述，不止确的是（0A操作时缓缓滴加蒸倔水，降低IW勺溶解度R在操作削寸，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证D3分子完整c加蒸憎水可同时降低IW口蛋白质的溶解度，两者均可析出D当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl的浓度约

7、为0.14mol/L•（多选）下列有关“ENMA提取”的操作中，正确的是（AKL）A在鸡血细胞液中加入蒸悯水R在“析出Z粘稠物”吋，要缓缓加入蒸懈水，直至溶液中粘稠物不再增多C在用酒精凝集ENW,要使用冷酒精D用玻璃棒搅拌时要沿一个方向•“IW勺粗提取与鉴定实验”中有三次过滤：（1）过滤用蒸倔水稀释过的鸡血细胞液。（2）过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl.（3）过滤溶解有IWI勺NaCl.以上三次过滤分别为了获得（AA含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含Z的滤液B含核物质的滤液、滤液中Z粘稠物、含IW勺滤液C含核物质的滤液、滤

8、液中Z粘稠物、纱布中D3D含较纯的ENA滤液、纱布上粘稠物、含IW1勺滤液.为获取较纯净的DNA,采集來的血样可用蛋白酚处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。下列有关叙述，正确的是（D）A.除去血浆中的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋口质.在“LNA的粗提取