医院感染监测的实验室检验(20140411) 广西医科大学第一附属医院

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1、医院感染监测的实验室检验广西医科大学第一附属医院广西医院感染管理培训基地郭世辉主要内容�一、手和皮肤黏膜消毒效果监测一、手和皮肤黏膜消毒效果监测�二、物品和环境表面消毒效果监测二、物品和环境表面消毒效果监测�三、空气消毒效果监测三、空气消毒效果监测�四、使用中消毒液的监测四、使用中消毒液的监测一、手和皮肤黏膜消毒效果监测检测方法:将采样管在混匀器上震动20s或用力振打80次,用无菌吸管吸取1.0mL待检样品接种于灭菌平皿,每一样本接种2个平皿,平皿内加入已溶化的45℃~48℃的营养琼脂15ml~18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置36℃±1℃温箱培养4

2、8h,计数菌落数。一、手和皮肤黏膜消毒效果监测准备监测结果工作方法报告实验操作流程1——准备工作准备工作:采样液:中和剂的制备:A.量取蒸馏水100ml。B.称取硫代硫酸钠0.5g;亚硫酸钠0.5g;量取吐温-803ml,混匀。并煮溶;C.5ml/支分装。D.15磅高压灭菌20min。E.待冷,4℃冰箱存放。(无菌棉签另备,同时灭菌)浸湿采样双手棉签(60CM2)2.2.实验操作实验操作((倾注平板法倾注平板法))::A.配制普通营养琼脂若干ml,灭菌后置56℃水浴箱备用;B.吸1ml混匀后检样品到平皿中,倾注平板(边倾注边摇匀)。C.待干待冷后置36º

3、C±1ºC温箱培养48小时,计数菌落数。琼脂的准备9CM采样后用力摇匀的标本准备取样取样加样倾注倾注后马上自然冷却琼脂摇匀后置温箱培养48H倾注取样平皿摇匀计算方法:X=M×N/A=10N/60=0.167N(单位:cfu/cm2)N=平板平均菌落数M=稀释倍数A=被采样手的面积(cm2)cfu=菌落形成单位结果报告方式:A.结果<100cfu/cm2实数报告,如3.8cfu/cm2或99.2cfu/cm2。B.结果≥100cfu/cm2采用两位有效数字报告,如3248cfu/cm2报3.2×103cfu/cm2。一、手和皮肤黏膜消毒效果监测结果判定:卫

4、生手消毒后细菌总数卫生手消毒后细菌总数≤≤10cfu/cm10cfu/cm2,,外科手消毒后细菌总数外科手消毒后细菌总数≤≤5cfu/cm5cfu/cm2。。二、物品和环境表面消毒效果监测医院内环境表面包括地面、墙壁、天花板,物体表面包括病房和医护办公室内的桌、椅、凳、床具、门及门把手、治疗台、治疗车、电话等,同时也包括辅助科室的工作台面、仪器表面等物体表面。由于这些部位处在医院这个特殊环境内,所以不断地受到污染。监测时机�定期常规监测�发生医院感染流行特别是暴发流行时的监测�环境变动时监测监测时机�定期常规监测:3个月监测1次,每次监测不要求全面,但一

5、定要有代表性,可反映出医院卫生学状况并能作出科学的结论。监测时机�发生医院感染流行特别是暴发流行时的监测:这种监测愈早愈好,要围绕流行区域对可能引起传播的媒介都应该列入监测范围,必须找出感染病原和传播途径,便于切断。监测时机�环境变动时监测:医院乃至一个病房的搬迁、粉刷、装修等,对新的环境包括外环境要作全面的微生物学监测并对原场所带来的物品要作卫生学处理并通过监测才可搬进新的环境。监测方法准备监测结果工作方法报告要点Y选择代表面选择代表面Y采样方法规范(面积、转动)采样方法规范(面积、转动)Y适量倾注法适量倾注法Y细菌的分类计数细菌的分类计数实验操作流程

6、1——准备工作:采样液采样液11((0.9%NaCl0.9%NaCl))的制备:的制备:A.A.量取蒸馏水量取蒸馏水100ml100ml。。B.B.称取称取NaCl0.9g,NaCl0.9g,混匀。混匀。C.C.5ml/5ml/支分装。支分装。D.D.1515磅高压灭菌磅高压灭菌20min20min。。E.E.待冷待冷,4,4℃℃冰箱存放。冰箱存放。((无菌棉签另备,同时灭菌无菌棉签另备,同时灭菌))实验操作流程2——采样:1.1.采样要求采样要求((棉拭子法棉拭子法))::A.A.对洁净区等有代表性的物体表面进行抽查采样。对洁净区等有代表性的物体表面进

7、行抽查采样。B.B.采取样本时,将采取样本时,将内径为内径为55cmcm的无菌规格板放在的无菌规格板放在被检物件表面,用浸过无菌生理盐水的棉签拭子被检物件表面,用浸过无菌生理盐水的棉签拭子在规格板内在规格板内横竖往返各涂抹横竖往返各涂抹55次次,,边涂抹边转动边涂抹边转动棉签(棉签(往返往返22回为一次回为一次)移动规格板,按同样方)移动规格板,按同样方法连续采样四处(法连续采样四处(100cm100cm22)),,然后烧断手接触部然后烧断手接触部位,将棉拭子放入位,将棉拭子放入10ml10ml((5ml5ml))生理盐水管内。生理盐水管内。采样后送院感

8、实验室。采样后送院感实验室。采样方法要点示例浸湿采样棉签100CM2实验操作流程

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