植物细胞的形态和

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1、植物细胞的培养特性和技术制作孙坤坤梅亚茹董素漫6.2植物细胞的形态与培养特性植物细胞是植物体结构和功能的基本单位单细胞植物有一个细胞构成，其生长、发育、生殖等一切生命活动有一个细胞完成高等植物的个体是有许多形态、大小不同的细胞组成的，不同细胞的功能作用不同，完成植物的生长、发育等各种生命活动6.2.1植物细胞的形态植物细胞的形态随之物的种类，存在的部位及执行的生理功能的不同而不同但一般植物细胞由细胞壁和原生质体两大部分组成如右图6细胞壁5原生质体1)质膜2）细胞质（基质细胞器细胞核液泡）原生质体细胞壁基质

2、高尔基体细胞核线粒体叶绿体内质网核糖体液泡6.2.2植物培养的特性一方面植物细胞与动物细胞一样可在人工控制条件的生物反应器中生长繁殖生产人们所需的各种产品。另一方面植物细胞与动物细胞、微生物细胞在细胞体积、营养要求、倍增时间的敏感程度等许多方面都有所不同。植物细胞的8个培养特性1细胞形态不同的细胞种类、培养条件和时间其形态大不相同，细胞在植物细胞分批培养初期体积大，旺盛生长期体积变小，生长平衡期细胞伸长，体积再次变大。2生长代谢生长速度缓慢，代谢率低，生长倍增时间长，易受微生物污染，一般需使用抗生物。且在

3、细胞中期和对数期，细胞已凝聚成直径为350-400μm的团块。因此。植物细胞悬浮培养比较困难，以小细胞团悬浮培养为主。3耐受性植物细胞有纤维素细胞壁，耐拉不耐扭，对剪切力敏感，抵抗剪切力较差。4群体效应即无锚的依赖性(贴壁性）和接触抑制性。5营养要求植物细胞在培养时需要供养，培养液粘度要大，不能耐受强力通风搅拌。6光照要求植物细胞培养要求一定的光照强度和光照时间，并且不同波长的光具有不同效果，这是植物细胞和动物细胞及微生物细胞培养的主要区别之一。7产物植物细胞主要用于生产色素、药物、香精和酶等次级代谢产物

4、，且产物潴留在细胞内，产量也比较低。8功能全能性植物细胞培养过具有结构的全能性。6.3植物细胞培养技术定义植物细胞培养是只从外植体获得植物细胞，在一定条件下进行培养，并诱导其增殖、分化，以获取人类所需要的植物细胞或者各种细胞产物的技术过程。外植体就是从植物体上取出的用于无菌培养或直接分离细胞的部分植物组织或器官。（植物的根、茎、叶、花、果实等各个部位都可以作为外植体）6.3.1植物细胞材料的准备植物细胞培养的第一步是获得所需的植物细胞。方法:直接从植物组织、器官中通过机械切割、组织破碎或酶解获取，通过诱导

5、愈伤组织经分散、筛选获得，通过分离原生质体经细胞壁再生方法获得植物细胞培养成功的两个重要因素：一是培养基和培养条件；二培养材料的来源，也就是外植体的来源。不同植物、同一植物的不同器官或组织被诱导的难易程度有很大差别，细胞分化的结果也会有所不同，次级代谢产物也不一样。用于植物体细胞培养的外植体，必须是无杂菌材料，通常应选择生长正常、无病虫害的植株，并在培养前灭菌。用于表面灭菌的消毒剂应易于灭菌后除去或易分离。使用量和时间时情况而定。常用的灭菌剂是次氯酸钠、次氯酸钙和升汞（氯化汞）植物外植体的消毒方法1茎切段

6、和叶片的消毒先用自来水冲洗，再用沾有肥皂粉或洗洁精的软毛刷刷洗，75％的酒精浸泡10~30秒，无菌水冲洗2~3次，无菌。滤纸擦拭干净。2果实及种子的消毒先用水清洗，后用75％酒精迅速漂洗一次，果实用2％次氯酸钠溶液浸泡10min，无菌水冲洗；单个种子先用10％次氯酸钠溶液浸泡20~30min，10g/L溴水浸泡10min，无菌水冲洗几次。3根、地下储藏器官等的消毒先用自来水洗干净，后用软毛刷刷洗，用滤纸吸干后再用酒精漂洗，用20g/L次氯酸钠溶液浸泡20~30min，最后用无菌水洗3~4次用滤纸吸干。6.

7、3.2植物细胞营养要求和培养基的种类及组成1植物细胞的营养要求1）无机营养物N、P、K、S、Ca、Mg、Fe、等2）维生素维生素B1、维生素B6、生物素、肌醇等3）碳源蔗糖、葡萄糖、木糖、甘露醇、山梨醇等4）天然物质椰乳、水解乳蛋白、酵母提取液等5）植物激素生长素3-吲哚乙酸（IAA）等6）核酸及其水解物DNA、RNA、黄嘌呤、腺嘌呤7）氨基酸类甘氨酸、谷氨酸等其他氯化胆、碱胆质素、胶氨酸、苹果酸等2培养基的种类及组成⑴种类：常见的有SM培养基、B5培养基、White培养基、NT培养基等⑵组成；培养基一般

8、都含有①碳源②氮源③无机盐④植物生长调节剂⑤维生素3植物细胞培养基的制备为了减少每次配制培养基时称取试剂的麻烦和微量试剂在称量时造成的误差通常将各组分，分成大量元素母液、微量元素母液（不含铁）、铁盐母液、维生素母液、植物激素母液等。先配制成10倍或100倍浓度储备液冷冻备用。用时只需取出一定体积的储备液，通过稀释、溶解、按比例混合稀释即可得到所需培养基。注意：培养中试剂、水、器皿的选用、前处理要适当。例：水是双蒸水或去离子水，