DB13T 434-2000 甘薯脱毒种苗培育及生产规程

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1、B05DB河北省地方标准DB13IT434一2000甘薯脱毒种苗培育及生产规程2000一04一29发布2000一05一01实施创叮北省质分效术生怪局发布DB13/T434一2000前官本标准由河北省农林科学院提出。本标准由河北省农林科学院昌黎果树研究所、秦皇岛市甘蒋研究开发中心起草。本标准主要起草人:章德明、韩继成、郭恩才、陈久铁、杨军。河北省地方标准DB13/T434一2000甘薯脱毒种苗培育及生产规程1范围本标准规定了脱毒甘薯核心原种、原原种、原种等三级萦殖材料(其形态包含种薯、薯秧，以下简称种苗)培育及

2、生产技术、工作程序的要求。本标准适用于甘薯核心原种、原原种、原种脱毒种苗的培育和生产。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB7413一87甘薯种苗产地检疫规程。3定义本标准采用下列定义3.1核心原种指经过检侧确认，无本规程确定的应脱除病毒的试管苗，在网室隔离条件下外移及系统的种性鉴定后形成的优系种薯。3.2原原种由核心原种，在网室隔离条件下(包括苗床及落地)形成的种苗。

3、3.3原种由原原种，在空间隔离条件下(包括苗床及礴地)形成的种苗。3.4网室隔离以40目以上尼龙网建成的带有1.5m进深级冲间的网拥。3.5空间隔离以育苗床、田间采蔓圃及种薯田的外缘为界，向外垂直距离5JDOm范围内，无普通甘薯田、蚜传寄主及黄花植物。4应脱除的病毒甘薯羽状斑驳病毒SweetpotatofeatheryMottleVuv$(SPFMV)甘薯潜隐病毒SweetpotatoLatentVirus(SPLV)5核心原种翻犷北省质骨李几浏卜生门卜月.2000一04一29批准2000一05一01aft学

4、兔兔www.bzfxw.comDB13/T434一20005.1脱毒5.气少外植体选定在临近田间收获前，取拟脱毒品种健壮单株的蔓尖，材料应具该品种的典型性状(包括地上部及块根)。5.1.2外掉林灭菌用75%酒精浸搅90S，取出后，再用0.1%升汞(城C12)灭菌7min，随即用无菌水冲洗3次以上，放在垫有滤纸的培养皿中，在加皿盖保鲜条件下，将外植体附着的水分吸去。5.1.3剥够尖在解剖镜下切取0.2mm一0.3mm大小的茎尖(不多于2个叶原基)，迅速置于5.1.4温度:24'C11`C;光照时间:12h一14

5、h;光强:冷光灯2500Lx;培养基:ms，附加成份根据不同品种初代茎尖分化生长的需要，确定BA等生长调节物质相应;pH5.4一5.805.1.5当试管苗长到4一5片展开叶时，将其移至38七11℃的条件下热处理20d05.1.6切取小"I经热处理后的试管苗，再切取一次小茎尖(0.5mm左右)进行培养，培养条件同5.1.405.1.7建立单株左声)茎尖发育，获得单株后，编号。5.2检测5.2.1NCM一ELISA初检淘汰当单株(系)的试管苗展开叶达6片以上时进行。按株(系)取样，保留每株的顶芽和带1个基部芽的原

6、株继代。中部材料用NCM一ELISA初检，淘汰呈阳性反应的单株(系)。通过初检的单株(系)继续扩繁。检测方法见一2一学兔兔www.bzfxw.comDB13/T434一20附录A(标准的附录)。5.2.2指示植物检侧确认通过NCM-ELISA的阴性株(系)继续扩萦，在单株(系)有10株以上时，外移7株一8株。待恢复生长、每株形成10片叶以上时，同巴西牵牛嫁接。每单系接5株，以3株成活用子观察有效。检侧方法见附录A(标准的附录)。5.3试管苗生产5.3.1组培快策将最终确认已脱除病毒的保留株(系)进行组培快繁。

7、采用侧芽增殖路线，以避免出现愈伤组织及由其形成的不定芽，即每次继代均切取带1一2个芽的茎段，在试管内徽扦插。培养条件同5.1.405.3.2试管萦殖的时期控制5.3.2.1冀东地区:用于春栽时(5月上旬)，应于3月1日后进行试管内锻炼(在自然光、温条件下进行，外移前2d-3d逐渐打开瓶盖)，为期1周，4月1日前移栽于有隔离网的温室。经扦插扩萦后，于5月上旬栽植于落地网室。用于夏栽时(7月中旬)，应不晚于5月1日进行试管内锻炼，6月1日前移栽于隔离温(网)室。经扩繁后，于7月中旬栽植于礴地网室。5.3.2.2冀

8、中南地区:以冀东地区为准，春、夏栽分别提前、错后10d一15d05.3.2.3河北以外地区:可根据当地生产物候期，具体拟定。5.3.3试管苗外移及管理用营养钵(高’10cm，直径6crn)单株移栽，用硫松肥沃的营养土(园土:蛙石:腐熟有机肥=6:3:1)。外移操作严防植株机械损伤。外移之初，拥内温度不低于15t，白天不高于28r,，空气相对湿度不低于75%。同时注意防病、防治地下害虫。级苗成活，发出