DB21∕T 1888-2011 鸡传染性支气管炎诊断技术规范

《DB21∕T 1888-2011 鸡传染性支气管炎诊断技术规范》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS65.020.30B41备案号：DB21辽宁省地方标准DB21/T1888—2011鸡传染性支气管炎诊断技术规程DiagnostictechniquesproceduresforAvianInfectiousBronchitis点击此处添加与国际标准一致性程度的标识2011-01-17发布2011-02-01实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T×××—2010前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则并起草。本标准由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。本标准主要起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省

2、动物医学研究院。本标准起草人：李清竹、薛树山、顾贵波、王竹、段亚良、李井春、马君敏、邓文超、郑红玲。8DB21/T×××—2010鸡传染性支气管炎诊断技术规程1　范围本标准规定了鸡传染性支气管炎病毒的病原分离、微量血凝抑制试验、琼脂凝胶免疫扩散试验、RT-PCR诊断方法本标准适用于辽宁省境内的鸡传染性支气管炎诊断、流行病学普查和检疫。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18935-2003口蹄疫诊断技

3、术标准GB/T19438.1-2004禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法标准GB/T23197-2008鸡传染性支气管炎诊断技术标准NY/T541-2002动物疫病实验室检验采样方法3　临床诊断3.1　临床症状由于病毒的组织嗜性不同，临床症状表现出一定差异。根据病毒感染鸡只所表现临床症状的不同，可将鸡传染性支气管炎分为以下致病型：a)呼吸型：临床突然发生，并迅速传播全群。5周龄以下病雏表现明显，伸颈，张口呼吸，啰音、咳嗽、喷嚏和甩鼻。6周龄以上鸡症状较轻。突出症状是气管啰音、气喘、呼吸困难。b)肾型：表现为肾炎、肠炎，并伴有呼吸道症状。发病2

4、d～3d开始死亡，经6d～11d达死亡高峰。病鸡死亡率在30%左右。c)腺胃型：病死鸡表现为肠炎、严重脱水、极度消瘦。多伴有呼吸道症状。d)肠型：主要表现为脱水症状为主，伴有呼吸道症状。e)输卵管炎型：产蛋鸡主要表现为卵巢及输卵管发炎而引起产蛋量显著下降，并在较长时间内出现软壳蛋、畸型和粗壳蛋；蛋质变差，蛋白稀薄呈水样，蛋黄与蛋白分开及蛋白粘附在壳膜上。产蛋鸡有程度不同呼吸道症状。3.2　剖检病变a)呼吸型：鼻窦、气管、支气管粘膜肿胀，呈浆液卡他性炎。喉头、气管内有灰白色或灰黄色粘液。肺充血、淤血和水肿，或有小灶性肺炎。b)肾型：剖检时肾脏肿大，

5、表面及实质有大量尿酸盐沉积，有时可见到输尿管内尿酸盐形成的结石。8DB21/T×××—2010a)腺胃型：剖检时腺胃肿大，呈球状，腺胃壁增厚，粘膜出血溃疡，胸腺，胰腺和法氏囊明显萎缩。b)肠型：剖检时气管粘膜出血肿胀，肾脏尿酸盐沉积，肠道粘膜肥厚，充血，盲肠扁桃体出血。c)输卵管炎型：产卵母鸡卵泡充血，出血，变形，腹腔内有液关卵黄和腹膜炎。18日龄以内的雏鸡输卵管断裂、萎缩或局限性增生，以致造成永久性不能产卵。1　实验室诊断1.1　病原分离与鉴定1.1.1　采样急性呼吸道型的病鸡采取气管，刚扑杀的病鸡采取支气管和肺组织。肾型和产蛋下降型的病鸡采取

6、病肾或输卵管，若分离病毒应采取大肠、扁桃体、或粪便。1.1.2　样品处理1.1.2.1　将病料放在含有青霉素（10000IU/mL）和链霉素（10mg/mL）pH值为7的磷酸盐缓冲盐水内，置冰盒中发送到实验室。1.1.2.2　将病料研磨，加含抗菌素的PBS制成体积分数为20%的组织悬液，冻融3次，以3000g离心20min，取上清液，加入终浓度为1000IU/mL的青霉素和终浓度为1mg/mL的链霉素，37℃下作用1h后用于鸡胚接种。1.1.3　分离培养1.1.3.1　取病料上清液，接种于5枚9日龄的SPF鸡胚尿囊腔内，在取5枚接种PBS，接种量

7、均为0.2mL/枚。37℃孵育。每天照蛋，24h内死亡的鸡胚弃去。收集接种后3d-7d的鸡胚尿囊液，将所有尿囊液混合，用含1000IU/mL青霉素和1mg/mL链霉素的PBS稀释5倍-10倍，继续在鸡胚内传代。典型的毒株通常在鸡胚中传至第2代或第3代时，可见侏儒胚，传至第3代，某些鸡胚可出现死亡。1.1.3.2　将分离物经鸡胚传至3代或3代以上，收获接种后7天仍存活的鸡胚，取胎儿，用剪刀剪除胎儿体外的附属物，并用吸水纸吸干胎儿表面的液体。如接种胎儿重量比对照胚最轻胎儿重量少2g以上者，可初步判定为有病毒感染。1.1.3.3　对病毒的进一步鉴定可通

8、过反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）进行。1.2　血清学诊断1.2.1　微量血凝抑制试验（按照GB/T23197-2008）1.2.2