DB21∕T 2149-2013 水产育苗用盐生杜氏藻培养技术

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1、ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB21辽宁省地方标准DB21/T—XXXX水产育苗用盐生杜氏藻培养技术CulturetechniquesofDunaliellasalinaforaquaculturebreeding点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（本稿完成日期：2012-12-12）XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T—XXXX前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由辽宁省海洋水产科学研究院提出。本

2、标准由辽宁省海洋与渔业厅归口。本标准主要起草单位：辽宁省海洋水产科学研究院。本标准主要起草人：李华琳、王笑月、李文姬、陈冲、王庆志。本标准附录A、B为资料性附录。本标准首次发布。7DB21/T—XXXX水产育苗用盐生杜氏藻培养技术1　范围本标准规定了水产育苗用盐生杜氏藻(Dunaliellasalina)培养的术语和定义、水质条件和设施设备、消毒方法、培养液的配制、藻种提纯与培养、生产性培养及收获等。本标准适用于盐生杜氏藻培养。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文

3、件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB11607渔业水质标准GB19106次氯酸钠溶液GB26373乙醇消毒剂卫生标准GB26369季铵盐类消毒剂卫生标准NY5052无公害食品海水养殖用水水质NY5071无公害食品渔用药物使用准则SC/T1059渔用含氯消毒剂3　术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1　盐生杜氏藻(Dunaliellasalina)属绿藻门（Chlorophyta）、绿藻纲（Chlorophyceae）、团藻目（

4、Volvocales）、盐藻科（Dunaliellaceae）、杜氏藻属（Dunaliella）。藻体单细胞，无细胞壁，通常为梨形、椭圆形，前端2条等长的鞭毛比细胞长1/3，无性繁殖。主要生存于海水、咸水湖。3.2　藻种具有良好的特征性状，细胞活跃，新鲜无污染的单种藻。3.3　接种在无污染条件下，将合格藻种接入到培养液中的操作过程。7DB21/T—XXXX1.1　封闭式培养藻种在封闭透明的容器中培养。除了充气管、加液管和藻液抽出管外，不与外界接触。1.2　开放式培养藻种在敞开的容器中培养。1.3　一次

5、性培养藻种在定量培养液中生长繁殖达到指数生长期时，一次性全部收获或全部用于下一级接种培养。1.4　次氯酸钠溶液有效氯指次氯酸钠加酸后放出氯的量，是次氯酸的有效成分。按照GB19106测定。2　水质条件和设施设备2.1　水质条件水源水质应符合GB11607和NY5052规定，培养用水经过沉淀、过滤、消毒后使用。2.2　设施设备2.2.1　藻种间培养藻种的房间，光线应充足、通风条件好。配有控温、调光和培养设施。2.2.2　培养间生产性培养车间，光线应充足、通风条件好。配有培养池、处理水池、输水、控温、调光

6、设施。培养池容积5m3～20m3，深度0.8m～1.0m的水泥池或其他容器，配有搅拌耙。处理水池与培养池容积比1：10。2.2.3　操作间用于器具清洗消毒、海水加热消毒、培养液配制及藻液质量检查等操作的房间。配有清洗水槽、消毒盆、电炉、工作台、显微镜、天平、量筒、试剂柜和化学试剂等。2.2.4　配套设施应具备供电系统、供水系统、控温系统、海水沉淀砂滤处理设施等。3　消毒方法7DB21/T—XXXX1.1　培养用海水消毒1.1.1　加热消毒加热至100℃沸腾3min～5min，冷却至室温备用。1.1.2

7、　次氯酸钠溶液消毒按含有效氯20mg/m3～40mg/m3，加入次氯酸钠溶液处理时间应≥12h，然后按25g/m3～55g/m3加入硫代硫酸钠还原，强充气1h后，用碘化钾淀粉试剂（见附录A）或碘化钾淀粉试纸测试无余氯后才可使用。硫代硫酸钠实际用量随次氯酸钠有效氯的变化而适量增减。含氯消毒剂使用应符合SC/T1059的规定。1.2　培养用器具消1.2.1　煮沸消毒——刻度吸管、筛绢放入加热容器中，加水煮沸10min～15min。——三角烧瓶注入适量水，置于电炉上煮沸10min，消毒完毕用无菌纸包扎瓶口。

8、1.2.2　烘箱干燥消毒培养皿、试管等小型玻璃器皿用清水洗净后，均匀放入烘箱，加热到180℃维持1h。1.2.3　乙醇消毒温度计、天平、药匙等用70%～75%乙醇涂擦表面2遍。乙醇消毒剂使用应符合GB26373的规定。1.2.4　次氯酸钠溶液消毒——二级培养容器、搅拌耙等用含有效氯0.1%的次氯酸钠溶液浸泡12h消毒。——水泵、水管用含有效氯0.1%的次氯酸钠溶液循环15min，停留12h消毒。1.2.5　苯扎溴铵溶液消毒操作台、培养架用0.1%苯扎溴铵