DB21∕T 2289.4-2016 海洋微藻成分分析 第4部分脂肪酸组成成分的测定

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1、ICS71.040.01A43DB21辽宁省地方标准DB21/T2289.4—2016海洋微藻成分分析第4部分：脂肪酸组成成分的测定AnalysisofcompositionsinmarinemicroalgaeForthPart:Determinationoffattyacidprofile2016-03-28发布2016-05–28实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T2289.4—2016前言本标准是按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草的。DB21/T2289《海洋微藻成分分析》分为以下9个部分：——第1部分：中性脂的测定；——第2部分

2、：极性脂的测定；——第3部分：酸值的测定；——第4部分：脂肪酸组成成分的测定；——第5部分：蛋白质的测定；——第6部分：总糖的测定；——第7部分：淀粉的测定；——第8部分：色素的测定；——第9部分：灰分的测定。本部分为DB21/T2289《海洋微藻成分分析》的第4部分。本部分由中国科学院大连化学物理研究所提出。本部分由大连市质量技术监督局归口。本部分起草单位：中国科学院大连化学物理研究所。本部分主要起草人：薛松、姚长洪、刘娇、曹旭鹏。IDB21/T2289.4—2016引言海洋微藻是海洋初级生产力的主要来源，其生长繁殖快，光合效率高，培养不占耕地，节约淡水资源,在水产养殖、生物能源、食品、医药

3、等领域有广泛的应用前景，是未来海洋经济的潜在增长点。然而，目前缺少相应的海洋微藻成分测定的标准方法，不同方法测定的各成分含量差别较大，使得不同实验室公布的数据可比性小，影响了海洋微藻天然产物代谢的研究，限制了海洋微藻生物质产业的发展。海洋微藻中脂肪酸组成成分是海洋微藻品质的重要指标之一。海洋微藻的脂肪酸组成成分受地域、养殖方式等因素影响，不同地域和养殖方式的海洋微藻脂肪酸构成和比例不同。分析海洋微藻脂肪酸组成成分是进一步开发微藻相关产品的基础，同时有利于认识微藻脂肪酸积累规律，从而为人工定向调控微藻脂肪酸含量和组成提供依据。因此,对海洋微藻进行脂肪酸组成成分的分析测定，确定其脂肪酸组成成分具有

4、重要意义。IIDB21/T2289.4—2016海洋微藻成分分析第4部分：脂肪酸组成成分的测定1范围本部分规定了海洋微藻脂肪酸组成成分测定方法的术语和定义、原理、试剂、仪器设备、操作步骤、结果表示和重复性。本部分适用于海洋微藻藻粉和海洋微藻藻泥中脂肪酸组成成分的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB21/T2289.1—2014海洋微藻成分分析第1部分：中性脂的测定3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1微藻藻粉microalgalpowder微

5、藻生物质经干燥、研磨、过80目筛后得到的粉状物质。3.2微藻藻泥wetmicroalgalpaste微藻培养液于12000r/min的条件下离心5min，除去上清液后所获得的含水量为70%～80%的微藻样品。3.3脂肪酸组成成分fattyacidprofile微藻生物质中不同脂肪酸的组成及比例。4原理在硫酸催化下，海洋微藻生物质中含有脂肪酰基结构的成分与甲醇反应生成脂肪酸甲酯。脂肪酸甲酯经过毛细管气相色谱柱分离以及火焰离子化检测器检测，通过与已知脂肪酸甲酯标准品保留时间比对进行鉴别，由色谱峰面积归一化法直接计算不同脂肪酸占全部脂肪酸的比例。5试剂1DB21/T2289.4—20165.1水：去

6、离子水或等效纯水。5.2正己烷：色谱纯；5.3甲醇：色谱纯。5.498%浓硫酸：分析纯。5.5无水硫酸钠：分析纯。5.6硫酸-甲醇溶液：硫酸（5.4）/甲醇（5.3）体积比为1:50。5.7脂肪酸甲酯标准品：C12:0，C14:0，C14:1，C16:0，C16:1n7，C16:2，C16:3n4，C16:4n4，C18:0，C18:1n9，C18:1n7，C18:2n6，C18:3n6，C18:3n3，C18:4n3，C18:5n3，C20:0，C20:1，C20:2，C20:3，C20:4n6，C20:4n3，C20:5n3，C22:0，C22:1，C22:3，C22:5，C22:6n3，

7、C24:0等脂肪酸甲酯标准品。5.8载气：氮气，完全干燥，且氧气含量低于10mg/kg。5.9助燃气：空气，不含有机杂质；氢气，纯度99.9%，不含有机杂质。5.10脂肪酸甲酯标准溶液：将脂肪酸甲酯标准品（5.7）用正己烷（5.2）溶解，配制成浓度为50µg/mL～200µg/mL单一脂肪酸甲酯标准品和混合脂肪酸甲酯标准品溶液。该标准溶液可在-20ºC下储藏3个月。6仪器设备6.1分析天平：感应量