蛋白纯化试剂盒.ppt

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1、销售培训北京平利洋医疗设备有限公司科研仪器产品生化/分子生物酶联斑点(ELISPOT)分析仪电泳仪蛋白质&核酸纯化试剂盒生物分子相互作用系统基因扩增(PCR)仪生物工程设备生物安全柜组织细胞均质设备实验室常用设备超纯水系统蛋白核酸纯化试剂盒一、NORGEN-公司概述加拿大的NorgenBiotek公司是一家致力于研究蛋白核酸纯化、浓缩新产品的公司。该公司建立了一种基于NORGEN专利树脂用于核酸和蛋白的的分离技术平台,在2003年受到国际研究委员会(NRC)的认可。1.离子交换反应离子交换层析是以离子交换剂为固定相,以特定的含离子

2、溶液为流动相,利用离子交换剂与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。2.阳离子交换反应:阴离子交换反应:R-SO3HR-SO3-+H+反应简式为:R-NR3OHR-NR3++OH-反应简式为:R-SO3NaR-SO3-+Na+R-NR3ClR-NR3++Cl--离子交换反应离子交换树脂是一种不溶于酸、碱和有机溶剂的具有离子交换功能的固态高分子材料。离子交换作用是可逆的离子交换树脂1.树脂预处理2.上柱交换3.洗脱4.树脂的再生离子交换树脂的工作过程:根据样品类型分别用酸和碱处理,最后调pH值至所需范围。蛋

3、白质核酸表面的带电基团和树脂上带相反电荷的离子交换基团相互结合用亲和力更强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物。先用清水洗涤,然后用再生剂再生,最后用清水洗至所需pH值。离子交换层析技术已广泛于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。离子交换层析的应用二、产品型号蛋白质样品制备RNA样品制备蛋白质纯化基本操作流程样品准备纯化柱的活化蛋白质结合纯化柱的清洗洗脱蛋白质蛋白纯化试剂盒的优势理论PI0-7酸性蛋白;7-14碱性蛋白试剂盒0-8酸性蛋白(pH调至4

4、.5);8-14碱性蛋白(pH调至7.0)+12346789105pH-蛋白质净电荷等电点选择碱性蛋白纯化流程选择酸性蛋白纯化流程注意事项注意蛋白质样品起始pH条件并进行调整,选择相应的酸性/碱性蛋白纯化流程确定上样的体积,选择相应体积的试剂蛋白质浓缩、缓冲液交换 和脱盐试剂盒性能功能作用:norgen树脂对于盐是低亲和力,对于蛋白是高结合力,盐去除、浓缩和缓冲液交换同时进行。高效性:20分钟处理12个样品高回收:回收效率高达99%无分子量的限制:从多肽到抗体都可处理适用的下游应用:质谱、SDS-PAGE、等点聚焦、X射线晶型、核

5、磁共振表面活性剂去除试剂盒表面活性剂:能显著降低溶剂(一般为水)的表面张力和液液界面张力的一类物质.由于它们能起乳化、分散、增溶、润湿、发泡、消泡、杀菌等作用。功能作用:同时去除酸性和碱性蛋白样品中的表面活性剂(SDS、TritonX-100、CHAPS等)和浓缩蛋白质修饰性纯化柱活化和清洗缓冲液:pH结合缓冲液+异丙醇适用于:质谱、SDS-PAGE、蛋白酶解、等点聚焦、X射线晶型、核磁共振波谱等蛋白酶解试剂盒功能作用:蛋白质和非活性酶结合在纯化柱上,盐类和非特异性物质被洗脱,胰蛋白酶然后被激活,多肽生成并被纯化无额外的人工产物生

6、成适用于:质谱、SDS-PAGE、MALDI-TOF高丰度血清蛋白去除试剂盒高丰度血清蛋白:白蛋白;珠蛋白;α-抗胰蛋白酶针对除去高丰度蛋白的离心柱功能:去除高丰度血清白蛋白和盐类,促进低丰度蛋白的检测适用于:SDS-PAGE、双向电泳、液相/质谱、蛋白质芯片等包涵体分离试剂盒功能:分离和纯化大肠杆菌培养的包涵体重组蛋白三合一:裂解、释放(细菌裂解液);增溶(包涵体增溶剂);纯化(SiC离心柱)适用于:SDS-PAGE、双向电泳、重折叠、质谱蛋白质和多肽内毒素去除试剂盒内毒素:指机体在代谢过程中没有被排解而蓄积于体内的有毒物质比如

7、各种原因引起人体肠道菌群失调时条件致病菌所产生的毒素功能:除去蛋白质样品中的内毒素方法:在纯化柱中加入内毒素去除剂适用于:活体和离体的细胞和器官导入、单克隆抗体和多克隆抗体制备尿蛋白浓缩试剂盒同时浓缩尿蛋白和脱盐样品收集时加入稳定剂以防止尿蛋白降解无分子量限制,处理广泛适用于:SDS-PAGE;双向电泳、质谱、蛋白质芯片等RNA纯化试剂盒的优势利用旋转、离心柱,操作简单、快速从单一裂解液中按顺序分离核酸和蛋白质-无需将样品分份分离总RNA,从大分子的rRNA到microRNA无需苯酚或氯仿的抽提分离高质量的总RNA分离高质量的基因

8、组DNA,分子量≥30kbRNA/DNA/蛋白质同步纯化试剂盒裂解细胞或组织分离蛋白质纯化RNA-(最先)纯化DNA纯化蛋白质RNA/蛋白质同步纯化试剂盒同时分离和纯化所有长度的RNA和蛋白质同一离心管从同一样品中分离纯化,对于珍贵样品或微量样品极

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