组培实验室的设计.ppt

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时间:2020-03-24

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1、第一章植物组织培养实验室构建第一节:商业性组织培养实验室和小工厂的设计与主要设备主要内容:实验室的设计仪器设备和器皿用具在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。一

2、、实验室设计组培实验室设计原则:保证无菌操作,达到工作方便,防止污染。组培实验室组成:标准组织培养室包括:洗涤室(区)制备室(区)灭菌室(区)储放室(区)操作室(区)培养室(区)观察室(区)药品室(区)▼可以根据自己的实际条件进行合并准备室:完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备:药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器.洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。主要设备:水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱)等。卧 式 灭 菌 锅无菌操作室(接种室):

3、主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。主要设备:紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针)等。接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌

4、。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。超 静 工 作 台酸 度 计培养室:培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。其大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火的性能。主要设备:培养架(控温控光控湿)、摇床、培养箱、紫外光源等。培养材料放在由金属制成培养架上培养。培养架一般设5层,最低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm左右,培养架高1.7m左右。其长度根据日光灯长度而设计,如采用40W日光灯,则长I.3m,30W的长lm,宽度一般为60cm。培养室最

5、重要的因子是温度,一般保持在20—27℃左右,具备产热装置,并安装窗式或立式空调机。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度,最好不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒定,相对湿度以保持在70%~80%为好,可安装加湿器。控制光照时间可安装定时开关钟,一般需要每天光照10-16h,也有的需要连续照明。现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源,这样不但可以节省能源,而且组培苗接受太阳光生长良好,驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充。细胞学实验室该室用于对培养物的观察分析与培养物的计数等。主要设备:双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等。小型仪器设

6、备有:分注器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心机等。显微镜显微镜玻璃器皿及用具玻璃器皿培养用的:试管、三角瓶、培养皿等;显微镜下观察用的:细胞微室、载玻片、培养皿等。微孔过滤器(细胞过滤器):激素用于灭菌。一般用石棉滤膜第二节:培养基及其配制主要内容:培养基的成分培养基的种类、配方及其特点培养基的配制1、培养基母液的配制2、培养基的配制一、培养基的成分大量元素微量元素氨基酸和有机附加物植物激素(植物生长调节剂)维生素类凝固剂大量元素(以Ms培养基为例)序号化学式化学名称用量mg/l1KNO3硝酸钾19002NH4NO3

7、硝酸铵16503KH2PO4磷酸二氢钾1704MgSO4.7H2O硫酸镁3705CaCL2.4H2O二氯化钙440微量元素(以MS培养基为例)序号化学名称化学式用量(mg/l)1碘化钾KI0.832硼酸H3BO36.23硫酸锰MnSO4.4H2O22.34硫酸锌ZnSO4.7H2O8.65钼酸钠Na2MoO4.2H2O0.256硫酸铜CuSO4.5H2O0.0257氯化钾CoCL2.6H2O0.025氨基酸和有机附加物(以MS培养基为例)序号化学名称化学式用量(mg/l)1肌醇C6H12O6.2H2O1002甘氨酸NH2.CH2.COOH23盐酸硫胺素C12

8、H17CLN4OS.HCL0.14盐酸吡哆醇C8H1

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