丹参指纹图谱研究与.ppt

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1、丹参指纹图谱研究与 分类鉴别答辩人:郁露指导老师:吴京洪前言实验部分结论实验展望致谢一前言丹参简介中药指纹图谱选题意义国内外研究现状工作设想及创新之处丹参简介来源唇形科植物丹参的干燥根和根茎功效祛瘀止痛,活血通经、清心除烦成分一类为脂溶性的二萜醌类,另一类为水溶性的酚酸类化合物中药指纹图谱特征性和专属性可量化性稳定性和重现性有效性细节处理的模糊性选题意义适应中药质量控制标准的发展要求药材产地不同,成分不同,药效不同研究现状用NIRDRS对同属不同种的丹参药材进行模式识别用HPLC,以单一成分(丹参酮ⅡA或原儿茶醛)为指标来比较不同产地丹参的差异用

2、HPLC,对几种标示性化学成(丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ)的测定来比较不同产地丹参的差异工作设想通过FTIR光谱无损分析、硅胶柱层析和薄层层析三种方法,借助红外光谱的指纹性以及色带的Rf值,找出不同丹参的特征,从而能够实现对丹参药材的分类鉴别。创新之处快速综合的整体分析以TLC的比移值作为聚类分析的依据二实验部分实验仪器药品及试剂实验步骤与结果讨论实验仪器傅里叶变换红外光谱仪型号:Vector22厂家:德国BRUKER紫外-可见分光光度计型号:CARY100厂家:美国VARIAN旋转蒸发仪型号:RE52CS厂家:上海亚荣生化仪器厂药品与试剂层

3、析用硅胶(青岛海洋化工厂),石油醚(沸程:60—90℃),乙酸乙酯,无水乙醇,苯,甲醇等均为分析纯(广州化学试剂一厂)所有丹参样品均在广州清平中药市场购买,由广州中医药大学中药鉴定研究室鉴定,均为SalviamiltiorrhizaBge.实验步骤与结果讨论丹参FTIR光谱无损鉴别丹参硅胶柱层析丹参薄层色谱分析FTIR光谱无损鉴别丹参图1.不同丹参粉末的红外图谱γ/cm-1γ/cm-1γ/cm-1γ/cm-1ABSABSABSABS图2.丹参粉末的红外吸收峰相对强度-波数图表1.不同丹参粉末的红外特征吸收产地特征吸收峰安徽栽培位置/cm-1-14

4、201051-强度-0.621.00-河北栽培位置/cm-133501421--强度1.000.58--湖北栽培位置/cm-1-14121032-强度-0.630.97-湖南栽培位置/cm-1-14101030534强度-0.61.000.18山西栽培位置/cm-1-14211030-强度-0.611.00-山西野生位置/cm-1---669强度---0.20四川栽培位置/cm-133442361--强度1.000.31--丹参硅胶柱层析适量丹参工业酒精提取2h浓缩湿法装柱干法进样用合适比例的乙酸乙酯石油醚溶液洗脱测定各条色带的IR图,进行比较图

5、3.湖北栽培丹参的五条色带的红外吸收比较产地安徽四川山西山西野湖北河北湖南V1/ml17.529.028.234.827.030.022.5V2/ml28.837.039.038.035.039.033.0V3/ml22.923.021.017.020.024.020.0V4/ml12.015.012.510.012.016.013.0V5/ml12.011.512.010.011.015.012.0(*:Vi表示第i个色带洗脱出来所用的淋洗液的体积)表2.不同产地丹参的硅胶柱层析分离情况图4.不同丹参的第四条色带的红外吸收比较柱状图γ/cm-1

6、γ/cm-1γ/cm-1γ/cm-1ABSABSABSABS安徽栽培河北栽培湖北栽培湖南栽培山西栽培山西野生四川栽培色带吸收峰/cm-1色带吸收峰/cm-1色带吸收峰/cm-1色带吸收峰/cm-1色带吸收峰/cm-1色带吸收峰/cm-1色带吸收峰/cm-1315851773375421410217473182338005141451180——31254517174173041925——————41458——————表3.不同丹参的红外特征吸收色带和特征吸收峰位置薄层层析适量丹参水提2h浓缩调节pH2水饱和乙醚萃蒸发乙醚,乙醇溶解苯:乙酸乙酯:甲醇

7、(80:50:8)为展开剂展开紫外灯下收集不同Rf值的色带表4.不同丹参的薄层展开比移值产地四川山西安徽湖南山西野河北湖北1暗红0.860.960.970.920.950.880.912橙红0.800.920.910.890.910.840.853暗红0.710.820.820.800.840.770.784浅黄绿0.560.730.71-0.730.700.725紫色荧光0.380.650.630.730.630.59-6粉红-----0.52-7黄绿--0.21----欧氏聚类分析可以将七种丹参分为三大类:四川丹参为一类,河北、湖北和湖南的栽

8、培丹参为一类,安徽、山西的栽培丹参和山西野生丹参为一类。图5.不同丹参的欧氏聚类结果表5.模糊模式识别结果样本1234567聚类结果安徽

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